जैव रासायनिक गुण जीनस के ज्यादातर विशिष्ट साल्मोनेला।विशिष्ट विशेषताएं हैं: एस टाइफी के किण्वन के दौरान गैस के गठन की अनुपस्थिति, एस। पैराटाइफी ए की हाइड्रोजन सल्फाइड और डीकार्बोक्सिलेट लाइसिन का उत्पादन करने में असमर्थता।

महामारी विज्ञान।टाइफाइड बुखार और पैराटाइफाइड बुखार एंथ्रोपोनोज हैं, यानी। मनुष्य में ही रोग उत्पन्न करते हैं। संक्रमण का स्रोत रोगी या बैक्टीरिया का वाहक होता है, जो रोगज़नक़ को मल, मूत्र, लार के साथ बाहरी वातावरण में उत्सर्जित करता है। इन संक्रमणों के प्रेरक कारक, अन्य साल्मोनेला की तरह, बाहरी वातावरण में प्रतिरोधी होते हैं, मिट्टी और पानी में बने रहते हैं। एस टाइफी बिना खेती वाले रूप में बदल सकता है। उनके प्रजनन के लिए अनुकूल वातावरण है खाने की चीज़ें(दूध, खट्टा क्रीम, पनीर, कीमा बनाया हुआ मांस, जेली)। रोगज़नक़ पानी से फैलता है, जो वर्तमान में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा रहा है, साथ ही साथ आहार और संपर्क-घरेलू मार्ग भी। संक्रामक खुराक लगभग 1000 कोशिकाएं हैं। इन संक्रमणों के लिए लोगों की प्राकृतिक संवेदनशीलता अधिक है।

रोगजनन और नैदानिक ​​​​तस्वीर। एक बार अंदर छोटी आंत, टाइफाइड और पैराटाइफाइड रोगजनक श्लेष्म झिल्ली पर आक्रमण करते हैं जब

प्रभावकारी प्रोटीन ТТСС-1 का उपयोग करते हुए, पीयर्स पैच में संक्रमण का प्राथमिक फोकस बनाते हैं। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सबम्यूकोसा में आसमाटिक दबाव आंतों के लुमेन की तुलना में कम है। यह वी-एंटीजन के गहन संश्लेषण को बढ़ावा देता है, जो रोगज़नक़ की एंटीफैगोसाइटिक गतिविधि को बढ़ाता है और सबम्यूकोसा की कोशिकाओं द्वारा प्रो-भड़काऊ ऊतक मध्यस्थों की रिहाई को दबा देता है। इसका परिणाम संक्रमण के प्रारंभिक चरणों में भड़काऊ दस्त के विकास और मैक्रोफेज में रोगाणुओं के गहन गुणन की अनुपस्थिति है, जिससे पीयर के पैच की सूजन और लिम्फैडेनाइटिस का विकास होता है, जिसके परिणामस्वरूप मेसेंटेरिक के बाधा कार्य का उल्लंघन होता है। लसीकापर्वऔर साल्मोनेला का रक्तप्रवाह में प्रवेश, जिसके परिणामस्वरूप बैक्टरेरिया होता है। यह ऊष्मायन अवधि के अंत के साथ मेल खाता है, जो 10-14 दिनों तक रहता है। बैक्टीरिया के दौरान, जो पूरे ज्वर की अवधि के साथ होता है, रक्त प्रवाह के साथ टाइफाइड और पैराटाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंट, पैरेन्काइमल अंगों के रेटिकुलोएन्डोथेलियल तत्वों में बसते हैं: यकृत, प्लीहा, फेफड़े, साथ ही अस्थि मज्जा में। जहां वे मैक्रोफेज में गुणा करते हैं। कुफ़्फ़र की यकृत कोशिकाओं से, साल्मोनेला पित्त नलिकाओं के माध्यम से, जिसमें वे फैलते हैं, पित्ताशय की थैली में प्रवेश करते हैं, जहाँ वे भी गुणा करते हैं। में जमा हो रहा है पित्ताशयसाल्मोनेला सूजन का कारण बनता है और पित्त प्रवाह के साथ छोटी आंत को फिर से संक्रमित करता है। पीयर के पैच में साल्मोनेला के पुन: परिचय से उनमें हाइपरर्जिक सूजन का विकास होता है जैसे कि आर्थस घटना, उनका परिगलन और अल्सरेशन, जिसके कारण हो सकता है आंतों से खून बहनाऔर आंतों की दीवार का छिद्र। टाइफाइड बुखार और पैराटाइफाइड बुखार के प्रेरक एजेंटों की क्षमता जीवित रहने और फागोसाइटिक कोशिकाओं में बाद की कार्यात्मक अपर्याप्तता के साथ गुणा करने के लिए बैक्टीरिया वाहक के गठन की ओर जाता है। साल्मोनेला भी पित्ताशय की थैली में लंबे समय तक बना रह सकता है, मल में लंबे समय तक उत्सर्जित हो सकता है और पर्यावरण को दूषित कर सकता है। रोग के दूसरे सप्ताह के अंत तक, रोगज़नक़ शरीर से मूत्र के साथ, फिर स्तन के दूध के साथ उत्सर्जित होना शुरू हो जाता है। डायरिया रोग के दूसरे या तीसरे सप्ताह की शुरुआत के अंत में शुरू होता है, जिस समय से रोगजनकों को मल से बोया जाता है।

निजी सूक्ष्म जीव विज्ञान

सामान्य माइक्रोफ्लोरा का अध्ययन करने के तरीके

सामान्य माइक्रोफ्लोरा का अध्ययन करने के लिए दो विधियों का उपयोग किया जाता है; बैक्टीरियोस्कोपिक और बैक्टीरियोलॉजिकल।

बैक्टीरियोस्कोपिक विधि। मानव शरीर के उन बायोटोप्स के लिए इसका बहुत स्वतंत्र महत्व है जिसमें बड़ी संख्या में विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीव रहते हैं (मौखिक गुहा, आंत, योनि)। यह आपको माइक्रोफ्लोरा की संरचना का एक सामान्य विचार प्राप्त करने की अनुमति देता है (चने की प्रबलता / + या ग्राम / - एक रूप या किसी अन्य के बैक्टीरिया - कोक्सी, डिप्लोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी, बेसिली, बेसिली, स्ट्रेप्टोकोकी, फ्यूसीफॉर्म बैक्टीरिया, उपस्थिति कवक, आदि), साथ ही उन सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए जिन्हें पोषक माध्यमों पर खेती नहीं की जा सकती है। बैक्टीरियोलॉजिकल विधि। बायोटोप्स के लिए उपयोग किया जाता है एक विस्तृत श्रृंखलाबैक्टीरियोस्कोपी के आंकड़ों को ध्यान में रखते हुए सूक्ष्मजीवों (मौखिक गुहा, आंतों, योनि) का प्रदर्शन किया जाता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल रिसर्च के मूल सिद्धांत:

ए) गुणात्मक (प्रजाति संरचना) और मात्रात्मक का उपयोग

(विभिन्न प्रकार के मात्रात्मक अनुपात) माइक्रोफ्लोरा का आकलन; 6) प्रारंभिक संवर्धन के बिना सामग्री की प्राथमिक बुवाई, चूंकि

संवर्धन प्रजातियों के मात्रात्मक अनुपात का उल्लंघन करता है; ग) विभिन्न पोषक माध्यमों के एक बड़े समूह का उपयोग, चयन

खेती की स्थिति (एरोबिक, अवायवीय, CO2 वातावरण, आदि)। शोध के लिए सामग्री लेने के तरीके:

1. प्राकृतिक मलमूत्र (लार, मूत्र, आदि) प्राप्त करना।

2. प्रतिकृति विधि; ए) अगर माध्यम की सतह पर प्रिंट, बी) धुंध-अगर प्लेटों पर प्रिंट।

3. एक सिक्त झाड़ू से फ्लश करने की विधि।

4. एस्पिरेशन मेथड (इंटरडेंटल स्पेस, जिंजिवल पॉकेट्स, अपर और मिडल सेक्शन से) श्वसन तंत्र, फिल्टर पर आकांक्षा)।

5. आंत में जांच का परिचय।

6. आवेदन विधि - एक निश्चित क्षेत्र के कागज या ऊतक प्लेटों का उपयोग करके सूक्ष्मजीवों को हटाना।

न्यूमोकोकस (स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया) एक ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकोकस है, इसमें पॉलीसेकेराइड कैप्सूल होता है। यह मीडिया पर पीएच 7.6 (5% रक्त अगर) पर प्रोटीन के साथ खेती की जाती है, ए-हेमोलिसिस के साथ छोटी (मध्यम) चपटी कॉलोनियां बनाती है। जब हवा CO से संतृप्त होती है तो यह बेहतर तरीके से बढ़ता है। K-एंटीजन के प्रकार के अनुसार इसके 84 प्रकार हैं। रासायनिक के प्रति संवेदनशील और भौतिक कारक, विशेष रूप से, पित्त लवण (लिसिस), ऑप्टोचिन, NaCl को। न्यूमोकोकस के रोगजनक कारकों में एक कैप्सूल, हाइलूरोनिडेस, न्यूरोमिनिडेज़, आईजीए एक्सोप्रोटीज़, ओ-न्यूमोलिसिन, ल्यूकोसिडिन शामिल हैं। सफेद चूहों के लिए रोगजनक। न्यूमोकोकस तीव्र और . का कारण बनता है पुराने रोगोंश्वसन पथ (साइनसाइटिस, ब्रोंकाइटिस, निमोनिया), मेनिन्जाइटिस, सेप्सिस, सूजन संबंधी बीमारियां, रेंगने वाले कॉर्नियल अल्सर। के लिए सामग्री नैदानिक ​​अनुसंधानन्यूमोकोकल संक्रमण के रूप के आधार पर लें: उदाहरण के लिए, निमोनिया के साथ - थूक, सेप्सिस के साथ - रक्त, एक शुद्ध बीमारी के साथ - मवाद, ओटिटिस मीडिया के साथ - कान नहर से निर्वहन, आदि। एटियोट्रोपिक उपचार शुरू करने से पहले सामग्री लेना महत्वपूर्ण है।

एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए सीरम की जांच की जाती है।

के उद्देश्य के साथ प्रयोगशाला निदाननिम्नलिखित विधियों को लागू करें।

मैं। एक्सप्रेस तरीके(रोग सामग्री में रोगज़नक़ का पता लगाना):

1. माइक्रोस्कोपिक परीक्षा - धब्बाग्राम दाग के साथ रोग संबंधी सामग्री से। ग्राम-पॉजिटिव कैप्सुलर डिप्लोकॉसी का पता लगाना।

2. प्रतिक्रिया में कैप्सूल के प्रतिजन का निर्धारण "कैप्सूल की सूजन" (नीफेल्ड के अनुसार - पॉलीवलेंट एंटी-कैप्सूल सीरम की उपस्थिति में कैप्सूल के आकार में वृद्धि की घटना)। उत्तरार्द्ध को परीक्षण सामग्री के एक धब्बा पर लागू किया जाता है; एक चरण-विपरीत माइक्रोस्कोप का उपयोग करके लेखांकन।

3. सीरम या मस्तिष्कमेरु द्रव (आरएसके, लेटेक्स एग्लूटीनेशन, काउंटर इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस) में एंटीजन का पता लगाना। एक्सप्रेस विधियाँ अधिक बार सांकेतिक होती हैं, क्योंकि:

ए) हमेशा न्यूमोकोकस का पता लगाना इसकी एटिऑलॉजिकल भूमिका (अक्सर गाड़ी) को इंगित नहीं करता है;

बी) एटियोट्रोपिक उपचार की शुरुआत के साथ रोगज़नक़ का पता नहीं चला है।

द्वितीय. सांस्कृतिक (बैक्टीरियोलॉजिकल) विधि:

प्रथम चरण। सामग्री (नमूने के क्षण से 1-2 घंटे बाद नहीं) 5% रक्त अगर पर टीका लगाया जाता है, 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 20-24 घंटे के लिए एक मोमबत्ती (सीओ 2) के साथ एक desiccator में खेती की जाती है;

चरण 2। ए-हेमोलिसिस, माइक्रोस्कोपिक (ग्राम दाग, प्रति कैप्सूल) देने वाली चुनिंदा संदिग्ध कॉलोनियों को मट्ठा शोरबा में बहाया जाता है;

चरण 3. संस्कृति की शुद्धता (चने का दाग) निर्धारित करें। पहचान रूपात्मक, सीरोलॉजिकल (पी। पॉलीवलेंट एंटी-कैप्सूल सीरम के साथ ग्लास पर एग्लूटीनेशन), सांस्कृतिक, जैविक गुणों द्वारा की जाती है। उत्तरार्द्ध को 10% पित्त शोरबा (लिसिस), चूहों के इंट्रापेरिटोनियल संक्रमण (मृत्यु) में ऑप्टोक्विन (कोई वृद्धि नहीं) के साथ एक माध्यम पर बुवाई द्वारा किया जाता है। यदि आवश्यक हो (उदाहरण के लिए, निमोनिया के साथ), न्यूमोकोकस का एटियलॉजिकल महत्व साबित होता है (विशेष रूप से, सीएफयू / एमएल निर्धारित किया जाता है)। एंटीबायोटिक संवेदनशीलता भी निर्धारित की जाती है। संस्कृति पद्धति प्रमुख निदान पद्धति है, क्योंकि यह प्रारंभिक, सटीक, संवेदनशील है और आपको पर्याप्त एटियोट्रोपिक उपचार चुनने की अनुमति देती है।

III. सीरोलॉजिकल विधि: RNIF (ऑटो स्ट्रेन के साथ), RSK और RIGA (संदर्भ न्यूमोकोकल स्ट्रेन के साथ) का उपयोग करके रक्त सीरम में एंटी-कैप्सुलर एंटीबॉडी और उनकी गतिशीलता का निर्धारण। अधिक बार के लिए उपयोग किया जाता है जीर्ण रूपआह संक्रमण। विधि का उपयोग परिणाम प्राप्त करने की बाद की शर्तों और तैयार निदान की कमी से सीमित है।

चतुर्थ। जैविक विधि:परीक्षण सामग्री (आमतौर पर थूक) के साथ सफेद चूहों का अंतर्गर्भाशयी संक्रमण। मृत चूहों को खोला जाता है, स्मीयर बनाए जाते हैं, प्रिंट, रक्त और अंगों को रक्त अगर पर लगाया जाता है, इसके बाद रोगज़नक़ की पहचान की जाती है। विधि सहायक है, श्रमसाध्यता से सीमित है, चूहों के लिए रोगजनक अन्य प्रकार के सूक्ष्मजीवों की सामग्री में उपस्थिति, न्यूमोकोकस के कुछ सेरोवरों के लिए चूहों की कम संवेदनशीलता।

अधिकतर परिस्थितियों में न्यूमोकोकल निमोनियाएस न्यूमोनिया युक्त लार की आकांक्षा के बाद विकसित होता है। फिर न्यूमोकोकल बैक्टीरियाघुसना निचले खंडश्वसन तंत्र। सुरक्षात्मक जल निकासी तंत्र की गड़बड़ी - खांसी आवेग और श्लेष्मा निकासी - आवश्यक है। शक्तिशाली भड़काऊ घुसपैठ का गठन बिगड़ा हुआ फेफड़े के ऊतक होमियोस्टेसिस के साथ होता है। फेफड़े के पैरेन्काइमा में गुहाओं के गठन के साथ सबसे अधिक विषैले सेरोवर 3 के संक्रमण हो सकते हैं।

न्यूमोकोकस के प्राथमिक फोकस सेफुफ्फुस गुहा और पेरीकार्डियम में प्रवेश कर सकते हैं या हेमटोजेनस रूप से फैल सकते हैं और मेनिन्जाइटिस, एंडोकार्डिटिस और आर्टिकुलर घावों का कारण बन सकते हैं।

न्यूमोकोकस के रोगजनक कारक

मुख्य कारक न्यूमोकोकस की रोगजनकताकैप्सूल और पदार्थ सी पर विचार करें।

न्यूमोकोकस कैप्सूल- पौरुष का मुख्य कारक। यह बैक्टीरिया को फागोसाइट्स की माइक्रोबायसाइडल क्षमता और ऑप्सोनिन की क्रिया से बचाता है। न्यूमोकोकस के अनकैप्सुलेटेड स्ट्रेन व्यावहारिक रूप से एविरुलेंट हैं, वे शायद ही कभी पाए जाते हैं। एंटीन्यूमोकोकल एटी के अधिकांश पूल एटी टू एजी कैप्सूल हैं।

पदार्थ सी न्यूमोकोकस- कोशिका भित्ति का टेकोइक एसिड, जिसमें कोलीन होता है और विशेष रूप से सी-रिएक्टिव प्रोटीन के साथ बातचीत करता है। इस तरह की प्रतिक्रिया का परिणाम पूरक कैस्केड की सक्रियता और सूजन के तीव्र चरण के मध्यस्थों की रिहाई है। फेफड़े के ऊतकों में उनका संचय पॉलीमोर्फोन्यूक्लियर फागोसाइट्स के प्रवास को उत्तेजित करता है।

न्यूमोकोकी (पर्यायवाची: न्यूमोकोकस टैलमोन - फ्रेंकल, स्ट्रेप्टोकोकस लैंसोलेटस पाश्चर, माइक्रोकोकस न्यूमोनिया, डिप्लोकोकस न्यूमोनिया फ्रेंकल, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया) मानव निमोनिया में स्रावित लैंसोलेट डिप्लोकॉसी हैं। 1881 में एल. पाश्चर द्वारा और स्वतंत्र रूप से संयुक्त राज्य अमेरिका में जी.एम. स्टर्नबर्ग द्वारा खोजा गया। मानव निमोनिया के लिए न्यूमोकोकी का एटियलॉजिकल संबंध 1884 में फ्रेनकेल और वीचसेलबौम (ए। फ्रेंकल, ए। वीचसेलबौम) द्वारा स्थापित किया गया था।

न्यूमोकोकी, मानव या पशु शरीर से पृथक, अंडाकार या लांसोलेट कोक्सी होते हैं, जो जोड़े में व्यवस्थित होते हैं; ग्राम के अनुसार सकारात्मक रूप से दाग, लगभग 1 माइक्रोन। प्रत्येक जोड़ी एक मोटी कैप्सूल से घिरी होती है जिसे ईओसिन धुंधला [टीजे मैकी, जेई मेकार्टनी] द्वारा पता लगाया जा सकता है। न्यूमोकोकी आमतौर पर कृत्रिम संस्कृति मीडिया पर जंजीरों के रूप में विकसित होता है। न्यूमोकोकस में श्रृंखला आमतौर पर पाइोजेनिक स्ट्रेप्टोकोकस की तुलना में छोटी होती है। संस्कृतियों में, न्यूमोकोकी कम लांसोलेट और अधिक गोल, गतिहीन होते हैं और बीजाणु नहीं बनाते हैं। न्यूमोकोकस में कैप्सूल पशु और मानव एक्सयूडेट्स की तैयारी पर स्पष्ट रूप से दिखाई देता है, जब पोषक तत्व मीडिया पर बढ़ रहा है जिसमें रक्त, रक्त सीरम या जलोदर तरल पदार्थ जोड़ा जाता है, लेकिन सामान्य पोषक मीडिया पर बढ़ने पर यह खराब दिखाई देता है। न्यूमोकोकी एरोबेस या ऐच्छिक अवायवीय हैं, जो आसानी से साधारण एनिलिन रंगों से सना हुआ है और ग्राम के लिए सकारात्मक है, हालांकि वे पुरानी संस्कृतियों में ग्राम-नकारात्मक हो जाते हैं।

पारंपरिक पोषक माध्यम पर न्यूमोकोकी की वृद्धि खराब है, लेकिन पोषक माध्यम में ग्लूकोज (0.1%), रक्त, सीरम या जलोदर तरल पदार्थ मिलाए जाने पर इसमें काफी सुधार होता है। 5-10% कार्बन डाइऑक्साइड युक्त वातावरण में न्यूमोकोकी अच्छी तरह से विकसित होता है। वृद्धि के लिए इष्टतम तापमान 37°, अधिकतम 42°, न्यूनतम 25° है। न्यूमोकोकी पोषक माध्यम के पीएच में परिवर्तन के प्रति संवेदनशील होते हैं; इष्टतम पीएच 7.8 है, अम्लता की सीमा 6.5 है, और क्षारीयता 8.3 है। न्यूमोकोकी पोषक तत्व अगर पर बढ़ता है, 1 मिमी व्यास में छोटी कॉलोनियों का निर्माण करता है, नाजुक, पारभासी, ओस की बूंदों से मिलता-जुलता है जो एक दूसरे के साथ विलय नहीं करते हैं। विशेष पोषक माध्यम पर न्यूमोकोकी की कॉलोनियां, उदाहरण के लिए, रक्त अगर (5%) पर, छोटी, नम, पारदर्शी, अच्छी तरह से सीमांकित किनारों के साथ, α-हेमोलिसिस दिखाती हैं, एक हरे रंग के फीके पड़े क्षेत्र से घिरी हुई प्रतीत होती हैं, जैसे कि हरे रंग का स्ट्रेप्टोकोकस (स्ट्रेप्टोकोकस विरिडन्स) होने पर देखा गया।

रंगीन पोषक माध्यम पर बढ़ने पर, न्यूमोकोकी एसिड के गठन के साथ कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करता है, लेकिन गैस के गठन के बिना। इनुलिन का किण्वन न्यूमोकोकी की एक महत्वपूर्ण पहचान है (हरे रंग के स्ट्रेप्टोकोकस में इंसुलिन को नीचा दिखाने की क्षमता नहीं होती है)। न्यूमोकोकी पित्त लवण की क्रिया के तहत तेजी से ऑटोलिसिस करने की क्षमता दिखाता है। पित्त या पित्त लवण न्यूमोकोकस को घोलते हैं, जो इसे स्ट्रेप्टोकोकस से भी अलग करता है।

न्यूमोकोकी कई अन्य सूक्ष्मजीवों की तुलना में कुनैन और इसके कुछ डेरिवेटिव की जीवाणुनाशक कार्रवाई के प्रति अधिक संवेदनशील है। उदाहरण के लिए, ऑप्टोक्विन (एथिलहाइड्रोक्यूप्रिन) 1: 500,000 की एकाग्रता पर न्यूमोकोकी को मारता है, और स्ट्रेप्टोकोकी 1: 5000 की एकाग्रता पर।

पारंपरिक पोषक मीडिया पर संग्रहीत होने पर न्यूमोकोकी जल्दी से अपना पौरुष खो देता है, लेकिन एक सफेद माउस के वैक्यूम-सूखे प्लीहा में ठंड में महीनों तक बना रह सकता है जो न्यूमोकोकल सेप्टीसीमिया से मर गया। सफेद चूहे और खरगोश न्यूमोकोकी के प्रति सबसे अधिक संवेदनशील होते हैं, गिनी सूअर असंवेदनशील होते हैं, और बिल्लियाँ, कुत्ते, मुर्गियाँ और कबूतर अत्यधिक प्रतिरोधी होते हैं। न्यूमोकोकस एक सच्चे विष का उत्पादन नहीं करता है, लेकिन हेमोलिसिन बनाता है, जो भेड़, गिनी सूअरों और मनुष्यों के एरिथ्रोसाइट्स के साथ-साथ हाइलूरोनिडेस, लेनकोट्सिडिन और एक नेक्रोटाइज़िंग पदार्थ के खिलाफ सक्रिय हैं। न्यूमोकोकस का विषाणु संकेतित विषाक्त संरचनाओं पर निर्भर नहीं करता है, बल्कि संबंधित प्रकार के न्यूमोकोकस में निहित एक विशिष्ट घुलनशील पदार्थ की उपस्थिति पर निर्भर करता है।

न्यूमोकोकी में कई एंटीजन होते हैं। माइक्रोबियल सेल की गहराई में, प्रजातियों की विशिष्टता से जुड़ा एक न्यूक्लियोप्रोटीन घटक होता है। सतह के करीब एक प्रजाति-विशिष्ट पॉलीसेकेराइड (सी-एंटीजन) है - एक दैहिक प्रतिजन जो सभी न्यूमोकोकी में प्रतिरक्षात्मक रूप से समान है। हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी के एम-एंटीजन के समान एक प्रकार-विशिष्ट प्रोटीन (एम-एंटीजन) भी माइक्रोबियल सेल की सतह के करीब स्थित होता है। सतही कैप्सूल में पूरी तरह या आंशिक रूप से प्रत्येक प्रकार के न्यूमोकोकस के लिए विशिष्ट पॉलीसेकेराइड होता है, और यह एक जीवित सूक्ष्म जीव के विषाणु से निकटता से संबंधित है। यह एंटीजन - एक पॉलीसेकेराइड हैप्टेन या विशिष्ट घुलनशील पदार्थ (एसएसएस) - प्रकार-विशिष्ट है और न्यूमोकोकी के प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रकारों को अलग करने का कार्य करता है।

प्रत्येक प्रकार की एक व्यक्तिगत एंटीजेनिक संरचना और पौरुष होता है। निमोनिया में स्रावित न्यूमोकोकी को प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं के आधार पर I, I, III और IV प्रकारों में विभाजित किया जाता है। टाइप IV न्यूमोकोकी प्रतिरक्षात्मक रूप से विषम हैं। इस प्रकार में सभी न्यूमोकोकी शामिल हैं जो पहले तीन प्रकारों से संबंधित नहीं हैं। एक समय में न्यूमोकोकी की टाइपिंग इस तथ्य के कारण महत्वपूर्ण थी कि विशिष्ट सीरम के साथ निमोनिया के लिए सेरोथेरेपी का प्रभाव रोगज़नक़ के प्रकार के सीधे अनुपात में था।

न्यूमोकोकी के माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स में सूक्ष्म परीक्षण और कृत्रिम पोषक माध्यम पर न्यूमोकोकी का अलगाव शामिल है। न्यूमोकोकस के प्रकार द्वारा निर्धारित किया जाता है: कैप्सूल की सूजन की प्रतिक्रिया, कांच पर माइक्रोग्लगुटिनेशन की प्रतिक्रिया (सीबिन की विधि) और मैक्रोस्कोपिक एग्लूटीनेशन की प्रतिक्रिया। यदि किसी कारण से एक सफेद माउस का उपयोग नहीं किया जा सकता है, तो थूक या अन्य रोग संबंधी सामग्री को ग्लूकोज के साथ रक्त शोरबा में डाला जाता है, जिसे बाद में उसी प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं में एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है।

न्यूमोकोकी मानव वातावरण की तुलना में मुंह और ऊपरी श्वसन पथ के श्लेष्म झिल्ली पर अधिक बार पाए जाते हैं। न्यूमोकोकी संचारित होते हैं हवाई बूंदों से... टाइप IV न्यूमोकोकी टाइप I, II और III की तुलना में बहुत अधिक सामान्य हैं। हाल ही में निमोनिया में न्यूमोकोकी की बुवाई दर में तेजी से कमी आई है, जबकि स्टेफिलोकोसी की बुवाई दर में काफी वृद्धि हुई है। न्यूमोकोकी की बोने की दर में उल्लेखनीय कमी के साथ और, परिणामस्वरूप, एटिऑलॉजिकल एजेंटों के रूप में उनके मूल्य में कमी के साथ, ई। कोलाई, एंटरोकोकी, प्रोटीस और अन्य सूक्ष्मजीव अधिक मात्रा में जारी होने लगे।

न्यूमोकोकस के लिए अधिग्रहित प्रतिरक्षा स्पष्ट रूप से कैप्सुलर एंटीजन से जुड़ी होती है, टीकाकरण के दौरान जिसके साथ इस एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी के रूप में प्रतिक्रिया के साथ प्रतिरोध का एक स्पष्ट सहसंबंध स्थापित होता है। बैक्टीरिया भी देखें।

जीनस स्ट्रेप्टोकोकस में शामिल हैं: स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स (हेमोलिटिक) और स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया (न्यूमोकोकस)। पहली बार स्ट्रेप्टोकोकी की खोज बिलरोथ (1874), एल पाश्चर (1879) ने की थी। उनका अध्ययन ई। रोसेनबैक (1884) द्वारा किया गया था।

स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स (हेमोलिटिक)

आकृति विज्ञान... स्ट्रेप्टोकोकी गोलाकार कोक्सी हैं। प्रत्येक कोकस का व्यास औसतन 0.6-1 माइक्रोन होता है, हालांकि, उन्हें बहुरूपता की विशेषता होती है: छोटे और बड़े कोक्सी होते हैं, सख्ती से गोलाकार और अंडाकार होते हैं। स्ट्रेप्टोकोकी को एक श्रृंखला में व्यवस्थित किया जाता है, जो उन्हें एक विमान में विभाजित करने का परिणाम है। जंजीरों की लंबाई अलग है। घने पोषक माध्यम पर, जंजीरें आमतौर पर छोटी होती हैं, तरल पर - लंबी। स्ट्रेप्टोकोकी गतिहीन होते हैं, उनमें बीजाणु नहीं होते हैं (चित्र 4 देखें)। ताजा पृथक संस्कृतियां कभी-कभी एक कैप्सूल बनाती हैं। अल्ट्राथिन वर्गों पर, एक माइक्रोकैप्सूल दिखाई देता है, जिसके तहत एक तीन-परत कोशिका भित्ति और एक तीन-परत साइटोप्लाज्मिक झिल्ली होती है। ग्राम पॉजिटिव।

खेती करना... स्ट्रेप्टोकोकी ऐच्छिक अवायवीय हैं। वे 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान और 7.6-7.8 के पीएच पर बढ़ते हैं। उनकी खेती के लिए इष्टतम माध्यम रक्त या रक्त सीरम युक्त माध्यम हैं। ठोस पोषक माध्यम पर, स्ट्रेप्टोकोकल कॉलोनियां छोटी, सपाट, बादलदार, भूरे रंग की होती हैं। रक्त अगर पर, स्ट्रेप्टोकोकी की कुछ प्रजातियां हेमोलिसिस बनाती हैं। β-हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी एक स्पष्ट हेमोलिसिस ज़ोन बनाता है, α-हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी एक छोटा हरा-भरा क्षेत्र बनाता है (हीमोग्लोबिन के मेथेमोग्लोबिन में संक्रमण का परिणाम)। स्ट्रेप्टोकोकी हैं जो हेमोलिसिस नहीं देते हैं।

स्ट्रेप्टोकोकी चीनी शोरबा पर एक पार्श्विका और नीचे के महीन दाने वाले तलछट के निर्माण के साथ बढ़ता है, जबकि शोरबा पारदर्शी रहता है।

एंजाइमी गुण... स्ट्रेप्टोकोकी में saccharolytic गुण होते हैं। वे एसिड बनाने के लिए ग्लूकोज, लैक्टोज, सुक्रोज, मैनिटोल (हमेशा नहीं) और माल्टोज को तोड़ते हैं। उनके प्रोटियोलिटिक गुण खराब रूप से व्यक्त किए जाते हैं। वे दूध में दही जमाते हैं, वे जिलेटिन का द्रवीकरण नहीं करते हैं।

विष निर्माण... स्ट्रेप्टोकोकी कई एक्सोटॉक्सिन बनाते हैं: 1) स्ट्रेप्टोलिसिन - एरिथ्रोसाइट्स को नष्ट करते हैं (ओ-स्ट्रेप्टोलिसिन का कार्डियोटॉक्सिक प्रभाव होता है); 2) ल्यूकोसिडिन - ल्यूकोसाइट्स को नष्ट कर देता है (अत्यधिक विषाणुजनित उपभेदों द्वारा निर्मित); 3) एरिथ्रोजेनिक (स्कार्लेट ज्वर) विष - स्कार्लेट ज्वर की नैदानिक ​​​​तस्वीर निर्धारित करता है - नशा, संवहनी प्रतिक्रियाएं, दाने, आदि। एरिथ्रोजेनिक विष का संश्लेषण प्रोफ़ेज द्वारा निर्धारित किया जाता है; 4) साइटोटोक्सिन - ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस पैदा करने की क्षमता रखते हैं।

स्ट्रेप्टोकोकी में विभिन्न एंटीजन पाए गए हैं। कोशिका के साइटोप्लाज्म में एक विशिष्ट न्यूक्लियोप्रोटीन प्रकृति का एक एंटीजन होता है - सभी स्ट्रेप्टोकोकी के लिए समान। प्रोटीन प्रकार के प्रतिजन कोशिका भित्ति की सतह पर स्थित होते हैं। स्ट्रेप्टोकोकी की कोशिका भित्ति में एक पॉलीसेकेराइड समूह प्रतिजन पाया गया।

पॉलीसेकेराइड समूह-विशिष्ट प्रतिजन अंश की संरचना के अनुसार, सभी स्ट्रेप्टोकोकी को बड़े लैटिन अक्षरों ए, बी, सी, डी, आदि द्वारा एस से चिह्नित समूहों में विभाजित किया जाता है। समूहों के अलावा, स्ट्रेप्टोकोकी को सीरोलॉजिकल प्रकारों में विभाजित किया जाता है, जो अरबी अंकों द्वारा निर्दिष्ट हैं।

ग्रुप ए में 70 प्रकार शामिल हैं। इस समूह में अधिकांश स्ट्रेप्टोकोकी शामिल हैं जो इसका कारण बनते हैं विभिन्न रोगइंसानों में। ग्रुप बी में मुख्य रूप से स्ट्रेप्टोकोकी शामिल हैं जो मनुष्यों के लिए अवसरवादी हैं। ग्रुप सी में मनुष्यों और जानवरों के लिए स्ट्रेप्टोकोकी रोगजनक शामिल हैं। ग्रुप डी में स्ट्रेप्टोकोकी होते हैं जो मनुष्यों के लिए गैर-रोगजनक होते हैं, लेकिन इस समूह में एंटरोकोकी शामिल है, जो मनुष्यों और जानवरों के आंतों के मार्ग के निवासी हैं। अन्य अंगों में जाकर, वे कारण भड़काऊ प्रक्रियाएं: कोलेसिस्टिटिस, पाइलिटिस, आदि। इस प्रकार, उन्हें सशर्त रूप से रोगजनक रोगाणुओं के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है।

सीरोलॉजिकल समूहों में से एक के लिए पृथक संस्कृतियों का संबंध समूह सीरा के साथ वर्षा प्रतिक्रिया का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है। सीरोलॉजिकल प्रकारों को निर्धारित करने के लिए, टाइप-विशिष्ट सीरा के साथ एक समूहन प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है।

स्ट्रेप्टोकोकी पर्यावरण में काफी प्रतिरोधी हैं। 60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर, वे 30 मिनट के बाद मर जाते हैं।

सूखे मवाद और कफ में ये महीनों तक बने रहते हैं। कीटाणुनाशकों की सामान्य सांद्रता उन्हें 15-20 मिनट में नष्ट कर देती है। एंटरोकॉसी बहुत अधिक स्थिर होते हैं, कीटाणुरहित समाधान 50-60 मिनट के बाद ही उन्हें मार देते हैं।

पशु संवेदनशीलता... रोगजनक स्ट्रेप्टोकोकी के प्रति संवेदनशील पशु, घोड़े, कुत्ते, पक्षी। प्रयोगशाला के जानवरों में खरगोश और सफेद चूहे संवेदनशील होते हैं। हालांकि, मनुष्यों के लिए स्ट्रेप्टोकोकी रोगजनक हमेशा प्रयोगात्मक जानवरों के लिए रोगजनक नहीं होते हैं।

संक्रमण के स्रोत... लोग (बीमार और वाहक), कम अक्सर जानवर या संक्रमित खाद्य पदार्थ।

संचरण मार्ग... हवाई और हवाई धूल, कभी-कभी भोजन, संपर्क और घरेलू संभव है।

रोग बहिर्जात संक्रमण के साथ-साथ अंतर्जात रूप से भी हो सकते हैं - जब सशर्त रूप से रोगजनक स्ट्रेप्टोकोकी जो ग्रसनी, नासोफरीनक्स और योनि के श्लेष्म झिल्ली पर रहते हैं, सक्रिय होते हैं। शरीर के प्रतिरोध में कमी (ठंडा करना, भुखमरी, अधिक काम करना, आदि) से स्व-संक्रमण की घटना हो सकती है।

स्ट्रेप्टोकोकल संक्रमणों के रोगजनन में पूर्व-संवेदीकरण का बहुत महत्व है - स्ट्रेप्टोकोकल एटियलजि की पिछली बीमारी के परिणामस्वरूप।

जब स्ट्रेप्टोकोकी रक्तप्रवाह में प्रवेश करता है, तो वे एक कठिन सेप्टिक प्रक्रिया का कारण बनते हैं।

मनुष्यों में रोगअधिक बार सीरोलॉजिकल ग्रुप ए के β-हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकी का कारण बनता है। वे रोगजनक एंजाइमों का उत्पादन करते हैं: हयालूरोनिडेस, फाइब्रिनोलिसिन (स्ट्रेप्टोकिनेज), डीऑक्सीराइबोन्यूक्लाइज, आदि। इसके अलावा, स्ट्रेप्टोकोकी में एक कैप्सूल, एम-प्रोटीन होता है, जिसमें एंटीफैगोसाइटिक गुण होते हैं।

स्ट्रेप्टोकोकी मनुष्यों में विभिन्न तीव्र और जीर्ण संक्रमण का कारण बनता है, दोनों मवाद और गैर-दमनकारी के गठन के साथ, नैदानिक ​​​​प्रस्तुति और रोगजनन में भिन्न होते हैं। दमनकारी - कफ, फोड़े, घाव के संक्रमण, गैर-दमनकारी - तीव्र संक्रमणऊपरी श्वांस नलकी, विसर्प, लाल रंग का बुखार, गठिया, आदि।

स्ट्रेप्टोकोकी अक्सर इन्फ्लूएंजा, खसरा, काली खांसी और अन्य बीमारियों के साथ माध्यमिक संक्रमण का कारण बनता है और अक्सर घाव के संक्रमण को जटिल करता है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता... इसकी प्रकृति से, प्रतिरक्षा एंटीटॉक्सिक और जीवाणुरोधी है। संक्रामक के बाद रोगाणुरोधी प्रतिरक्षा कमजोर होती है। यह स्ट्रेप्टोकोकी की कमजोर इम्युनोजेनेसिटी और बड़ी संख्या में सेरोवर के कारण है जो क्रॉस-इम्यूनिटी नहीं देते हैं। इसके अलावा, स्ट्रेप्टोकोकल रोगों के साथ, शरीर को एलर्जी होती है, जो पुनरावृत्ति की प्रवृत्ति की व्याख्या करती है।

प्रोफिलैक्सिस... शरीर के समग्र प्रतिरोध को मजबूत करने, स्वच्छता और स्वच्छ उपायों के लिए कम। विशिष्ट प्रोफिलैक्सिस विकसित नहीं किया गया है।

इलाज... एंटीबायोटिक्स का उपयोग किया जाता है। अधिक बार वे पेनिसिलिन का उपयोग करते हैं, जिसके लिए स्ट्रेप्टोकोकी ने प्रतिरोध हासिल नहीं किया है, साथ ही एरिथ्रोमाइसिन और टेट्रासाइक्लिन भी।

आमवाती हृदय रोग के एटियलजि में स्ट्रेप्टोकोकस का मूल्य... आमवाती हृदय रोग के रोगजनन का पर्याप्त अध्ययन नहीं किया गया है। लेकिन कई तथ्य इस बीमारी के विकास में स्ट्रेप्टोकोकस की भूमिका के पक्ष में बोलते हैं:

1. आमवाती हृदय रोग के रोगियों में B- कंठ से बोया जाता है हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकस.

2. गठिया अक्सर गले में खराश, टॉन्सिलिटिस, ग्रसनीशोथ, शरीर को संवेदनशील बनाने के बाद होता है।

3. एंटीस्ट्रेप्टोलिसिन, एंटीस्ट्रेप्टोहयालूरोनिडेस - स्ट्रेप्टोकोकल एंजाइम के प्रति एंटीबॉडी, रोगियों के रक्त सीरम में विषाक्त पदार्थ पाए जाते हैं।

4. स्ट्रेप्टोकोकस की भूमिका की एक अप्रत्यक्ष पुष्टि पेनिसिलिन के साथ सफल उपचार है।

हाल ही में, आमवाती हृदय रोग के पुराने रूपों के उद्भव में, स्ट्रेप्टोकोकस के एल-रूपों को महत्व दिया गया है।

आमवाती हृदय रोग की रोकथाम को स्ट्रेप्टोकोकल रोगों की रोकथाम के लिए कम किया जाता है (उदाहरण के लिए, वसंत और शरद ऋतु में, पेनिसिलिन प्रशासन का एक रोगनिरोधी पाठ्यक्रम किया जाता है)। जीवाणुरोधी दवाओं - पेनिसिलिन के उपयोग से उपचार कम हो जाता है।

स्कार्लेट ज्वर के एटियलजि में स्ट्रेप्टोकोकस का मूल्य... जीएन गेब्रीचेव्स्की (1902) ने सबसे पहले सुझाव दिया था कि हेमोलिटिक स्ट्रेप्टोकोकस स्कार्लेट ज्वर का प्रेरक एजेंट है। लेकिन चूंकि अन्य बीमारियों में स्रावित स्ट्रेप्टोकोकी स्कार्लेट ज्वर के प्रेरक एजेंटों से अलग नहीं था, इसलिए यह राय सभी के द्वारा साझा नहीं की गई थी। अब यह स्थापित किया गया है कि स्कार्लेट ज्वर समूह ए स्ट्रेप्टोकोकी के कारण होता है, जो एक एरिथ्रोजेनिक विष उत्पन्न करता है।

जो लोग बीमार हो गए हैं, उनमें प्रतिरक्षा विकसित होती है - लगातार, एंटीटॉक्सिक। इसका तनाव डिक प्रतिक्रिया के मंचन द्वारा निर्धारित किया जाता है - एक एरिथ्रोजेनिक विष का इंट्राडर्मल इंजेक्शन। जो लोग बीमार नहीं हैं, उनमें इंजेक्शन स्थल के आसपास हाइपरमिया और एडिमा विकसित हो जाती है, जिसे एक सकारात्मक प्रतिक्रिया (रक्त सीरम में एंटीटॉक्सिन की अनुपस्थिति) के रूप में जाना जाता है। जो लोग ठीक हो गए हैं, उनमें ऐसी कोई प्रतिक्रिया नहीं होती है, क्योंकि उनमें बनने वाला एंटीटॉक्सिन एरिथ्रोजेनिक टॉक्सिन को बेअसर कर देता है।

प्रोफिलैक्सिस... अलगाव, अस्पताल में भर्ती। संपर्क, कमजोर बच्चों को गामा ग्लोब्युलिन का इंजेक्शन लगाया जाता है। विशिष्ट प्रोफिलैक्सिस विकसित नहीं किया गया है।

इलाज... पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन का उपयोग किया जाता है। गंभीर मामलों में, एंटीटॉक्सिक सीरम प्रशासित किया जाता है।

अध्ययन का उद्देश्य: स्ट्रेप्टोकोकस की पहचान और इसके सेरोवर का निर्धारण।

अनुसंधान के लिए सामग्री

1. ग्रसनी से बलगम (टॉन्सिलिटिस, स्कार्लेट ज्वर)।

2. त्वचा के प्रभावित क्षेत्र (एरिज़िपेलस, स्ट्रेप्टोडर्मा) से स्क्रैपिंग।

3. मवाद (फोड़ा)।

4. मूत्र (नेफ्रैटिस)।

5. रक्त (संदिग्ध पूति; अन्तर्हृद्शोथ)।

बुनियादी शोध विधियां

1. बैक्टीरियोलॉजिकल।

2. सूक्ष्मदर्शी।

अनुसंधान प्रगति

शोध का दूसरा दिन

कपों को ओवन से निकालें और निरीक्षण करें। यदि संदिग्ध कॉलोनियां हैं, तो उनमें से कुछ से स्मीयर बनाए जाते हैं, ग्राम के अनुसार दाग और सूक्ष्मदर्शी। यदि स्मीयर में स्ट्रेप्टोकोकी पाए जाते हैं, तो शेष कॉलोनी के हिस्से को शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए सीरम अगर पर ट्यूबों में और ट्यूबों में रक्त के साथ शोरबा पर उपसंस्कृत किया जाता है। दिन के अंत तक, ब्रोथ या अगर से 5-6 घंटे की संस्कृति को मार्टिन ब्रोथ पर 0.25% ग्लूकोज के साथ लेंसफील्ड वर्षा प्रतिक्रिया में सीरोलॉजिकल समूह निर्धारित करने के लिए उपसंस्कृत किया जाता है। टेस्ट ट्यूब और शीशियों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है और अगले दिन तक छोड़ दिया जाता है।

शोध का तीसरा दिन

थर्मोस्टेट से फसलों को हटा दिया जाता है, तिरछी अगर पर संस्कृति की शुद्धता की जांच की जाती है, स्मीयर बनाए जाते हैं, ग्राम दाग और सूक्ष्मदर्शी होते हैं। स्ट्रेप्टोकोकस की एक शुद्ध संस्कृति की उपस्थिति में, जीस मीडिया (लैक्टोज, ग्लूकोज, माल्टोस, सुक्रोज और मैनिटोल), दूध, जिलेटिन, 40% पित्त पर टीका लगाया जाता है और थर्मोस्टैट में रखा जाता है।

मार्टिन शोरबा ब्राउज़ करें। विशिष्ट वृद्धि की उपस्थिति में, सीरोलॉजिकल समूह को निर्धारित करने के लिए एक लेंसफील्ड वर्षा प्रतिक्रिया की जाती है।

लेंसफील्ड वर्षा प्रतिक्रिया सेटअप... मार्टिन शोरबा पर उगाई जाने वाली दैनिक संस्कृति को कई अपकेंद्रित्र ट्यूबों में डाला जाता है, 10-15 मिनट (3000 आरपीएम) के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है।

सतह पर तैरनेवाला एक कीटाणुनाशक समाधान के साथ एक जार में डाला जाता है, और अवक्षेप को बाँझ आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ डाला जाता है और फिर से सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। सभी अपकेंद्रित्र ट्यूबों से एकत्रित तलछट में 0.2% हाइड्रोक्लोरिक एसिड का 0.4 मिलीलीटर जोड़ा जाता है। फिर परखनली को पानी के स्नान में रखा जाता है और कभी-कभी हिलाते हुए 15 मिनट तक उबाला जाता है। उबलने के बाद, परिणामस्वरूप निलंबन फिर से सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। एंटीजन को फिर सतह पर तैरनेवाला में निकाला जाता है, जिसे एक साफ ट्यूब में डाला जाता है और पीएच 7.0-7.2 के 0.2% सोडियम हाइड्रॉक्साइड समाधान के साथ बेअसर कर दिया जाता है। ब्रोमोथिमोल नीला (0.01 मिली 0.04% घोल) एक संकेतक के रूप में जोड़ा जाता है। इस प्रतिक्रिया के साथ, रंग भूसे के पीले से नीले रंग में बदल जाता है।

फिर, 0.5 मिली एंटीस्ट्रेप्टोकोकल ग्रुप सेरा, जो खरगोशों के टीकाकरण द्वारा तैयार किया जाता है, को 5 वर्षा ट्यूबों में डाला जाता है (अध्याय 19 देखें)। सीरम ए को पहली टेस्ट ट्यूब में जोड़ा जाता है, सीरम बी दूसरे में है, सीरम सी तीसरे में है, सीरम डी चौथे में है, और 5 वें में आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान (नियंत्रण) है। उसके बाद, एक पाश्चर पिपेट का उपयोग करते हुए, प्राप्त अर्क (एंटीजन) को दीवार के साथ सभी टेस्ट ट्यूबों में सावधानी से रखें।

यदि समजात सीरम वाली परखनली में अभिक्रिया धनात्मक होती है, तो सीरम के साथ अर्क की सीमा पर एक पतली दूधिया-सफेद वलय बनती है (चित्र 38)।

शोध का चौथा दिन

परिणाम दर्ज किए गए हैं (तालिका 25)।

वर्तमान में, डीऑक्सीराइबोन्यूक्लाइज निर्धारित किया जाता है, साथ ही एंटीस्ट्रेप्टोहयालूरोनिडेस, एंटीस्ट्रेप्टोलिसिन-ओ।

परीक्षण प्रश्न

1. आप जानते हैं कि स्ट्रेप्टोकोकी का पता लगाने के लिए प्रयोगशाला अनुसंधान के मुख्य तरीके क्या हैं?

2. लेंसफील्ड अवक्षेपण अभिक्रिया किसके लिए है?

3. इस प्रतिक्रिया का मंचन करते समय प्रतिजन पारदर्शी क्यों होना चाहिए? इस अभिक्रिया के मंचन की तकनीक का वर्णन कीजिए।

अपने शिक्षक से एंटीस्ट्रेप्टोकोकस सीरम ए, बी, सी, डी और आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान प्राप्त करें। वर्षा की प्रतिक्रिया डालें, शिक्षक को परिणाम दिखाएं और स्केच करें।

संस्कृति मीडिया

खून से आगर(अध्याय 7 देखें)।

सीरम अगर(अध्याय 7 देखें)।

जिस बुधवार(सूखा)।

मांस पेप्टोन जिलेटिन (एमपीजी)... 100 मिलीलीटर बीसीएच में 10-15 ग्राम बारीक कटा हुआ जिलेटिन मिलाएं। पानी के स्नान (40-50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर) में धीरे-धीरे गर्म होने पर जिलेटिन सूज जाना चाहिए। पिघला हुआ जिलेटिन में 10% सोडियम कार्बोनेट घोल (बेकिंग सोडा) मिलाया जाता है और पीएच को 7.0 तक समायोजित किया जाता है। फिर तुरंत एक मुड़े हुए फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया गया। छानने का काम धीमा है। प्रक्रिया को तेज करने के लिए, एक गर्म आटोक्लेव में निस्पंदन किया जा सकता है। छना हुआ माध्यम 6-8 मिलीलीटर टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है और निष्फल कर दिया जाता है। बंध्याकरण या तो लगातार 3 दिनों के लिए 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर आंशिक रूप से किया जाता है, या एक साथ एक आटोक्लेव में 20 मिनट के लिए 110 डिग्री सेल्सियस पर किया जाता है। माध्यम को ऊर्ध्वाधर रूप से रखी गई परखनलियों में ठंडा किया जाता है।

दूध की तैयारी... ताजा दूध उबाल लेकर लाया जाता है, एक दिन के लिए ठंडे स्थान पर रखा जाता है, क्रीम से मुक्त किया जाता है, फिर से उबाला जाता है। एक दिन के लिए छोड़ दें और ऊपर की परत को हटा दें। मलाई रहित दूध को रूई की परत के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है, फिर 10% सोडियम कार्बोनेट घोल के साथ पीएच 7.2 पर क्षारीय किया जाता है और 5-6 मिली टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है।

बोउलॉन मार्टिन... पेप्टोन मार्टन (हाइड्रोक्लोरिक एसिड के संपर्क में आने वाले सूअर के पेट से कीमा बनाया हुआ मांस) की समान मात्रा को मांस के पानी में मिलाया जाता है। परिणामी मिश्रण को 10 मिनट के लिए उबाला जाता है, पीएच 8.0 में 10% सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल के साथ क्षारीय किया जाता है, सोडियम एसीटेट 0.5 जोड़ा जाता है, फिर से उबाला जाता है और बाँझ व्यंजनों में डाला जाता है। मार्टिन ब्रोथ में 0.25% ग्लूकोज मिलाया जाता है।

बुधवार किट - तारोज़्ज़िक(अध्याय 34 देखें)।

स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया (न्यूमोकोकस)

न्यूमोकोकी का वर्णन सबसे पहले आर. कोच (1871) ने किया था।

आकृति विज्ञान... न्यूमोकोकी डिप्लोकोकी होते हैं जिसमें एक दूसरे का सामना करने वाली कोशिकाओं के किनारे चपटे होते हैं, और विपरीत भुजाएँ लम्बी होती हैं, इसलिए उनके पास एक लैंसोलेट आकार होता है, जो मोमबत्ती की लौ की याद दिलाता है (चित्र 4 देखें)। न्यूमोकोकी का आकार 0.75-0.5 × 0.5-1 माइक्रोन है, वे जोड़े में स्थित हैं। तरल पोषक माध्यम में, वे अक्सर छोटी श्रृंखला बनाते हैं, जो स्ट्रेप्टोकोकी के समान होते हैं। प्रेमोकोकी गतिहीन होते हैं, बीजाणु नहीं होते हैं, शरीर में वे दोनों कोक्सी के चारों ओर एक कैप्सूल बनाते हैं। कैप्सूल में एक गर्मी प्रतिरोधी पदार्थ एंटीफैगिन होता है (जो न्यूमोकोकस को फागोसाइटोसिस और एंटीबॉडी से बचाता है)। कृत्रिम पोषक माध्यम पर बढ़ने पर, न्यूमोकोकी अपना कैप्सूल खो देता है। न्यूमोकोकी ग्राम-पॉजिटिव हैं। पुरानी संस्कृतियों में ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया पाए जाते हैं।

खेती करना... न्यूमोकोकी ऐच्छिक अवायवीय हैं। वे 36-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान और 7.2-7.4 के पीएच पर बढ़ते हैं। वे मीडिया पर मांग कर रहे हैं, क्योंकि वे कई अमीनो एसिड को संश्लेषित नहीं कर सकते हैं, इसलिए वे केवल देशी प्रोटीन (रक्त या सीरम) के अतिरिक्त मीडिया पर बढ़ते हैं। सीरम अगर पर, वे छोटी, नाजुक, बल्कि पारदर्शी कॉलोनियां बनाते हैं। रक्त अग्र पर, गीली हरी-भूरी कालोनियाँ विकसित होती हैं, जो एक हरे क्षेत्र से घिरी होती हैं, जो हीमोग्लोबिन के मेथेमोग्लोबिन में संक्रमण का परिणाम है। न्यूमोकोकी 0.2% ग्लूकोज के साथ पूरक शोरबा में और मट्ठा के साथ शोरबा में अच्छी तरह से विकसित होता है। तरल माध्यम में वृद्धि को फैलाना मैलापन और तल पर धूल भरी तलछट की विशेषता है।

एंजाइमी गुण... न्यूमोकोकी में काफी स्पष्ट saccharolytic गतिविधि है। वे टूटते हैं: एसिड बनाने के लिए लैक्टोज, ग्लूकोज, सुक्रोज, माल्टोज, इनुलिन। मैनिटोल को किण्वित नहीं करता है। उनके प्रोटियोलिटिक गुण खराब रूप से व्यक्त किए जाते हैं: वे दूध को दही करते हैं, वे जिलेटिन को द्रवीभूत नहीं करते हैं, और इंडोल नहीं बनाते हैं। न्यूमोकोकी पित्त में घुल जाता है। इनुलिन का टूटना और पित्त में घुलना महत्वपूर्ण है नैदानिक ​​संकेतस्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया को स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स से अलग करना।

रोगजनक कारक... न्यूमोकोकी हाइलूरोनिडेस, फाइब्रिनोलिसिन आदि का उत्पादन करता है।

विष निर्माण... न्यूमोकोकी एंडोटॉक्सिन, हेमोलिसिन, ल्यूकोसिडिन बनाते हैं। न्यूमोकोकी का विषाणु कैप्सूल में एंटीफैगिन की उपस्थिति से भी जुड़ा है।

एंटीजेनिक संरचना और वर्गीकरण... न्यूमोकोकी के साइटोप्लाज्म में एक प्रोटीन एंटीजन होता है जो पूरे समूह के लिए सामान्य होता है, और कैप्सूल में एक पॉलीसेकेराइड एंटीजन होता है। पॉलीसेकेराइड एंटीजन के अनुसार, सभी न्यूमोकोकी को 84 सेरोवर में विभाजित किया जाता है। मनुष्यों के लिए रोगजनकों में, सेरोवर I, II, III सबसे आम हैं।

पर्यावरणीय कारकों के प्रतिरोधी... न्यूमोकोकी अस्थिर सूक्ष्मजीवों के समूह से संबंधित है। 60 डिग्री सेल्सियस का तापमान उन्हें 3-5 मिनट में नष्ट कर देता है। वे कम तापमान और सुखाने के लिए काफी प्रतिरोधी हैं। सूखे थूक में, वे 2 महीने तक व्यवहार्य रहते हैं। पोषक माध्यम पर, वे 5-6 दिनों से अधिक नहीं रहते हैं। इसलिए, खेती के दौरान, हर 2-3 दिनों में पुन: बीज करना आवश्यक है। कीटाणुनाशक के पारंपरिक समाधान: 3% फिनोल, मर्क्यूरिक क्लोराइड 1: 1000 के कमजोर पड़ने पर उन्हें कुछ ही मिनटों में नष्ट कर देते हैं।

न्यूमोकोकी ऑप्टोचिन के प्रति विशेष रूप से संवेदनशील होते हैं, जो उन्हें 1: 100,000 के कमजोर पड़ने पर मार देता है।

पशु संवेदनशीलता... न्यूमोकोकी का प्राकृतिक मेजबान मनुष्य है। हालांकि, न्यूमोकोकी बछड़ों, मेमनों, सूअरों, कुत्तों और बंदरों में बीमारी पैदा कर सकता है। प्रायोगिक जानवरों में से, सफेद चूहे न्यूमोकोकस के प्रति अत्यधिक संवेदनशील होते हैं।

संक्रमण के स्रोत... एक बीमार व्यक्ति और बैक्टीरिया का वाहक।

संचरण मार्ग... हवाई बूंदों, हवाई धूल हो सकता है।

प्रवेश द्वार... ऊपरी श्वसन पथ, आंख और कान की श्लेष्मा झिल्ली।

मनुष्यों में रोग... न्यूमोकोकी विभिन्न स्थानीयकरण की सूजन संबंधी बीमारियों का कारण बन सकता है। न्यूमोकोकी के लिए विशिष्ट हैं:

1) लोबार निमोनिया;

2) रेंगने वाले कॉर्नियल अल्सर;

सबसे आम बीमारी क्रुपस निमोनिया है, जिसमें फेफड़े के एक, कम अक्सर दो या तीन लोब शामिल होते हैं। रोग तीव्र है, साथ में उच्च तापमान, खांसी। यह आमतौर पर गंभीर रूप से समाप्त होता है।

रोग प्रतिरोधक क्षमता... स्थानांतरित बीमारी के बाद, अस्थिर प्रतिरक्षा बनी रहती है, क्योंकि निमोनिया को रिलैप्स की विशेषता होती है।

प्रोफिलैक्सिस... स्वच्छता और निवारक उपायों में कमी। विशिष्ट प्रोफिलैक्सिस विकसित नहीं किया गया है।

इलाज... एंटीबायोटिक्स का उपयोग किया जाता है - पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन, आदि।

परीक्षण प्रश्न

1. न्यूमोकोकी की आकृति विज्ञान। खेती और एंजाइमेटिक गुण।

2. कौन से कारक न्यूमोकोकी की रोगजनकता निर्धारित करते हैं और क्या न्यूमोकोकी को फागोसाइटोसिस से बचाता है?

3. न्यूमोकोकल संक्रमण का मुख्य प्रवेश द्वार क्या है। न्यूमोकोकी किन रोगों का कारण बनता है?

सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा

अध्ययन का उद्देश्य: न्यूमोकोकस का पता लगाना।

अनुसंधान के लिए सामग्री

1. थूक (निमोनिया)।

2. ग्रसनी (गले में खराश) से बलगम।

3. अल्सर (रेंगने वाले कॉर्नियल अल्सर) से वियोज्य।

4. कान से स्राव (ओटिटिस मीडिया)।

5. मवाद (फोड़ा)।

6. फुफ्फुस पंचर (फुफ्फुसशोथ)।

7. रक्त (संदिग्ध सेप्सिस)।

1 (सुबह के थूक को लेना बेहतर होता है (विशिष्ट निमोनिया के साथ, थूक में जंग का रंग होता है)।)

बुनियादी शोध विधियां

1. सूक्ष्म।

2. सूक्ष्मजीवविज्ञानी।

3. जैविक।

अनुसंधान प्रगति

जैविक नमूना... एक बाँझ शोरबा में थोड़ा (3-5 मिलीलीटर थूक) पायसीकृत किया जाता है, इस मिश्रण के 0.5 मिलीलीटर को एक सफेद माउस में इंट्रापेरिटोनियल रूप से इंजेक्ट किया जाता है। 6-8 घंटों के बाद, चूहे रोग के लक्षण दिखाते हैं। इस समय, न्यूमोकोकस पहले से ही एक्सयूडेट में पाया जा सकता है। पेट की गुहा... एक्सयूडेट को एक बाँझ सिरिंज के साथ लिया जाता है। इसमें से स्मीयर्स बनाए जाते हैं, जिन्हें ग्राम और सूक्ष्मदर्शी के अनुसार दाग दिया जाता है। एक शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए, एक्सयूडेट को सीरम अगर पर टीका लगाया जाता है। यदि माउस मर जाता है या बीमार हो जाता है, तो शुद्ध संस्कृति को अलग करने के लिए सीरम अगर पर हृदय से रक्त का टीका लगाया जाता है। फसलों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है।

न्यूमोकोकस के प्रकार का निर्धारण करने के लिए त्वरित विधि(माइक्रोएग्लूटिनेशन रिएक्शन)। एक संक्रमित माउस के उदर गुहा से एक्सयूडेट की 4 बूंदों को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है। टाइप I एग्लूटीनेटिंग सीरम को पहली बूंद में जोड़ा जाता है, टाइप II सीरम को दूसरे में जोड़ा जाता है, टाइप III सीरम को तीसरे में जोड़ा जाता है, और आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान को चौथी बूंद (नियंत्रण) में जोड़ा जाता है।

टाइप I और II सेरा 1:10 के अनुपात में पहले से पतला होता है, और टाइप III सीरम - 1: 5 के अनुपात में होता है। सभी बूंदों को पतला फुकसिन के साथ उभारा, सुखाया, स्थिर और दाग दिया जाता है। यदि परिणाम सकारात्मक है, तो बूंदों में से एक रोगाणुओं (एग्लूटिनेशन) के संचय को दर्शाता है।

शोध का दूसरा दिन

थर्मोस्टैट से फसलों को हटा दिया जाता है, जांच की जाती है और संदिग्ध कॉलोनियों से स्मीयर लिए जाते हैं। यदि स्मीयरों में ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकॉसी है, तो शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने के लिए 2-3 कॉलोनियों को सीरम के साथ तिरछी अगर पर अलग किया जाता है। फसलों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है। स्मीयर शोरबा से बनाए जाते हैं, ग्राम और सूक्ष्मदर्शी के अनुसार दागे जाते हैं।

शोध का तीसरा दिन

थर्मोस्टेट से फसलों को हटा दिया जाता है। संस्कृति की शुद्धता की जाँच की जाती है - स्मीयरों को बनाया जाता है, ग्राम और सूक्ष्म के अनुसार दाग दिया जाता है। यदि पृथक संस्कृति में ग्राम-पॉजिटिव लैंसोलेट डिप्लोकॉसी हैं, तो पृथक संस्कृति को बुवाई द्वारा पहचाना जाता है:

1) जिस मीडिया (लैक्टोज, ग्लूकोज, सुक्रोज, माल्टोज) पर बुवाई सामान्य तरीके से की जाती है - माध्यम में इंजेक्शन द्वारा;

2) इनुलिन वाले माध्यम पर;

3) ऑप्टोचिन वाले माध्यम पर;

4) पित्त के साथ परीक्षण।

इंसुलिन परीक्षण... अध्ययन के तहत संस्कृति को इनुलिन और लिटमस टिंचर युक्त पोषक माध्यम पर टीका लगाया जाता है, और थर्मोस्टेट में रखा जाता है। 18-24 घंटों के बाद, फसलों को थर्मोस्टेट से हटा दिया जाता है। न्यूमोकोकी की उपस्थिति में, माध्यम लाल हो जाता है (स्ट्रेप्टोकोकी माध्यम की स्थिरता और रंग नहीं बदलता है)।

ऑप्टोचिन के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण... चयनित कल्चर को ऑप्टोक्विन 1:50,000 युक्त 10% ब्लड एगर पर टीका लगाया जाता है। न्यूमोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी के विपरीत, ऑप्टोक्विन युक्त मीडिया पर नहीं बढ़ता है।

पित्त परीक्षण... अध्ययन के तहत शोरबा संस्कृति के 1 मिलीलीटर को एग्लूटिनेशन ट्यूबों में डाला जाता है। उनमें से एक में खरगोश के पित्त की एक बूंद डाली जाती है, दूसरी नली नियंत्रण का काम करती है। दोनों ट्यूबों को थर्मोस्टेट में रखा गया है। 18-24 घंटों के बाद, न्यूमोकोकल लसीका होता है, जो एक बादल शोरबा के स्पष्टीकरण में व्यक्त किया जाता है। नियंत्रण में, निलंबन बादल छाए रहते हैं।

पित्त के नमूने को एक ठोस पोषक माध्यम पर रखा जा सकता है। ऐसा करने के लिए, सूखे पित्त का एक दाना अगर और सीरम के साथ प्लेटों में उगाए गए न्यूमोकोकी की एक कॉलोनी पर लगाया जाता है - कॉलोनी घुल जाती है - यह गायब हो जाती है।

शोध का चौथा दिन

परिणाम दर्ज किए गए हैं (तालिका 26)।

ध्यान दें। k - एसिड के निर्माण के साथ कार्बोहाइड्रेट का टूटना।

वर्तमान में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है सीरोलॉजिकल तरीकेस्ट्रेप्टोकोकल एंटीबॉडी का निर्धारण करने के लिए अध्ययन (आरएसके और आरआईजीए)। फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी का उपयोग करके पृथक संस्कृति के समूह और सेरोवर का निर्धारण किया जाता है।

न्यूमोकोकस के विषाणु का निर्धारण... न्यूमोकोकस की दैनिक शोरबा संस्कृति को 10 -2 से 10 -8 तक 1% पेप्टोन पानी से पतला किया जाता है, प्रत्येक कमजोर पड़ने के 0.5 मिलीलीटर को दो सफेद चूहों में इंजेक्ट किया जाता है। 10 -7 के कमजोर पड़ने पर चूहों की मृत्यु का कारण बनने वाली संस्कृति को विषाणु के रूप में मूल्यांकन किया जाता है, 10 -4 -10 -6 के कमजोर पड़ने पर मध्यम विषैला माना जाता है। एक संस्कृति जो चूहों को नहीं मारती है वह अरुचिकर है।

परीक्षण प्रश्न

1. आप न्यूमोकोकी की शुद्ध संस्कृति को अलग करने के कौन से तरीके जानते हैं?

2. कौन सा जानवर न्यूमोकोकस के लिए अतिसंवेदनशील है?

3. संक्रमित माउस के एक्सयूडेट के साथ क्या प्रतिक्रिया होती है और किस उद्देश्य से?

4. पाइोजेनिक कोक्सी के किन प्रतिनिधियों से न्यूमोकोकस को अलग किया जाना चाहिए और किस परीक्षण द्वारा?

5. न्यूमोकोकी के विषाणु का निर्धारण कैसे करें?

काम

थूक परीक्षण का एक चार्ट बनाएं, जिसमें दिन के अनुसार इसके चरणों का संकेत दिया गया हो।

संस्कृति मीडिया

सीरम अगर(अध्याय 7 देखें)।

मट्ठा शोरबा(अध्याय 7 देखें)।

खून से आगर(अध्याय 7 देखें)।

जिस बुधवार(सूखा)।

इनुलिन नमूना माध्यम... आसुत जल के 200 मिलीलीटर में 10 मिलीलीटर निष्क्रिय गोजातीय सीरम, 18 मिलीलीटर लिटमस टिंचर और 3 ग्राम इनुलिन मिलाएं। लगातार 3 दिनों तक 100 डिग्री सेल्सियस पर बहने वाली भाप के साथ निष्फल। पित्त शोरबा (अध्याय 7 देखें)।