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एक सीरोलॉजिकल परीक्षा क्या है। परजीवी रोगों के निदान में सीरोलॉजिकल रिसर्च विधियों। संक्रामक रोगों के निदान के सीरोलॉजिकल तरीके

सिफलिस पर विश्लेषण प्रयोगशाला अध्ययन के बीच सबसे आम है। निवारक परीक्षाओं के दौरान सिफलिस पर विश्लेषण व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। माइक्रोस्कोपी की मदद से, सिफलिस के कारक एजेंट का पता चला है। सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं की मदद से, सिफलिस की निदान की पुष्टि की जाती है, छुपा सिफलिस का निदान स्थापित किया गया है, उपचार की प्रभावशीलता की निगरानी की जाती है, रोगियों की योग्यता निर्धारित होती है।

सिफलिस का निदान नैदानिक \u200b\u200bडेटा, सामग्री के नमूने में सिफलिस रोगजनकों का पता लगाने और सीरोलॉजिकल रिसर्च विधियों द्वारा निदान की पुष्टि करने के आधार पर स्थापित किया गया है। सिफिलिस के अभिव्यक्ति कई और विविध हैं, इस बारे में कि विभिन्न विशिष्टताओं के डॉक्टरों द्वारा बीमारी का पता लगाया जाता है। प्राथमिक सिफलिस का विभेदक निदान कई बीमारियों के साथ किया जाता है।

अंजीर। 1. तस्वीर में, सिफिलिस का प्राथमिक अभिव्यक्ति ठोस शंकर है।

पीला ट्रेप्लेम और सीनिक डायग्नोस्टिक्स के लिए एंटीबॉडी

रोगी के शरीर में सिफलिस से संक्रमित होने पर, एंटीबॉडी बनते हैं। सीरोलॉजिकल निदान चिकित्सक को रोग के प्रारंभिक चरणों में रोग के प्रारंभिक चरणों में रोगी के प्रारंभिक चरणों में और इसके पूरा होने के बाद रोगी के शरीर में एंटीबॉडी गठन की गतिशीलता का अध्ययन करने में मदद करता है, रोगी में बीमारी की पुनरावृत्ति के मुद्दे को हल करने के लिए या बड़े पैमाने पर चिकित्सा स्थितियों के साथ सिफिलिस का निदान करने के लिए पुन: संक्रमण (पुनर्निर्माण)।

पीला ट्रेप्लेम आईजीएम के लिए एंटीबॉडी

संक्रमण के बाद पहली बार आईजीएम एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू होता है। वे संक्रमण के बाद दूसरे सप्ताह से सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का पता लगाना शुरू कर देते हैं। बीमारी के 6 - 9 सप्ताह तक, उनकी संख्या अधिकतम हो जाती है। यदि रोगी का इलाज नहीं किया गया था, तो छह महीने के बाद एंटीबॉडी गायब हो जाती है। 1 - 2 महीने के बाद आईजीएम एंटीबॉडी गायब हो जाती है। 3 - 6 महीने के बाद के बाद। - देर से सिफलिस के इलाज के बाद। यदि उनकी वृद्धि दर्ज की जाती है, तो यह बार-बार संक्रमण के बारे में कार्य करता है या बात करता है। आईजीएम अणु बड़े हैं और भ्रूण के लिए प्लेसेंटा के माध्यम से नहीं जाते हैं।

पीला ट्रेप्लेम आईजीजी के लिए एंटीबॉडी

आईजीजी इम्यूनोग्लोबुलिन एंटीबॉडी पहले महीने के अंत में (चौथे सप्ताह में) संक्रमण के क्षण से दिखाई देते हैं। उनका टिटर आईजीएम टिटर से अधिक है। आईजीजी को पर्याप्त रूप से लंबे समय तक इलाज के बाद बचाया जाता है।

गैर विशिष्ट एंटीबॉडी

कई सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं हैं। यह पीला ट्रेपून की एंटीजनिक \u200b\u200bबहुतायत द्वारा समझाया गया है। सिफलिस के विभिन्न चरणों में रोगी के बीमार व्यक्ति के सीरम में, विशिष्ट, कुछ गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी के अलावा - agglutinins, पूरक बाध्यकारी, immobilizins, एंटीबॉडी जो प्रतिरक्षा फ्लोरोसेंस, precipitines, आदि का कारण बनता है। निरर्थक एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं सापेक्ष विशिष्टता है इसलिए नैदानिक \u200b\u200bत्रुटियों से बचने के लिए, एक का उपयोग करना आवश्यक नहीं है, लेकिन सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं (सीईआर) का एक जटिल है।

सिफलिस पर गलत सकारात्मक परीक्षण

एक विशिष्ट विशेषता निर्बाध परीक्षण झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाएं प्राप्त कर रहे हैं। कार्डियोलीपिन एंटीजन के खिलाफ मानव रक्त में उत्पादित प्रतिक्रियाशील एंटीबॉडी न केवल सिफलिस में दर्ज की जाती हैं, बल्कि अन्य बीमारियों के साथ भी होती हैं: कोमल, हेपेटाइटिस, गुर्दे की बीमारियां, थिरोटॉक्सिसोसिस, कैंसर, संक्रामक रोगों में (कुप्रवाह, तपेदिक, ब्रुकेलोसिस, मलेरिया, कच्चे टाइट, स्कार्लाटिना), गर्भावस्था और मासिक चक्रों के दौरान, तेल के भोजन और शराब लेते समय। यह ध्यान दिया जाता है कि उम्र के साथ, झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाओं की संख्या बढ़ जाती है।

अंजीर। 2. महिलाओं में फोटो प्राथमिक सिफलिस में।

सिरोलिक प्रतिक्रियाओं के उपयोग के साथ सिफलिस के प्रयोगशाला निदान

सिफलिस पर सीरोलॉजिकल टेस्ट को ट्रेपरम और अनियोजित में बांटा गया है।

1. परीक्षण ढूँढना

परीक्षणों के इस समूह में एक एंटीजन के रूप में, एक कार्डियोलिपिन एंटीजन का उपयोग किया जाता है। सिफलिस रोगजनकों के लिपिड एंटीजन सबसे अधिक हैं। वे सेल के सूखे द्रव्यमान का 1/3 बनाते हैं। एंटीबॉडी प्रतिक्रियाशील गैर-नवीकरणीय परीक्षणों का उपयोग करके पता लगाए जाते हैं, जो कार्डियोलिपिन एंटीजन के खिलाफ उत्पादित होते हैं। इस समूह में पूरक बाध्यकारी प्रतिक्रिया (आरएसकेयार्ड), माइक्रोप्रोकापाथ (आरएमपी) की प्रतिक्रिया, प्लाज्मा प्रतिक्रिया (आरपीआर) और अन्य के तेजी से दृढ़ संकल्प की प्रतिक्रिया शामिल है। अनावश्यक परीक्षणों की मदद से, प्राथमिक स्क्रीनिंग सिफलिस पर की जाती है ( आबादी के समूहों का सर्वेक्षण), और मात्रात्मक संस्करण में परिणाम प्राप्त करने की संभावना आपको उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए इन परीक्षणों का उपयोग करने की अनुमति देती है। गैर-परिष्कृत परीक्षणों के सकारात्मक परिणामों को Treponium परीक्षण द्वारा पुष्टि की जानी चाहिए। गैर-परिष्कृत परीक्षणों की एक विशिष्ट विशेषता झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाएं प्राप्त करना है।

2. TREPONNE परीक्षण

ट्रोनवेन टेस्ट में, पीला ट्रेपोनिया की संस्कृति से अलग ट्रेपरम मूल की एंटीजन का उपयोग किया जाता है। उनकी मदद से, अनपेक्षित परीक्षणों के सकारात्मक परिणाम की पुष्टि की जाती है। समूह में शामिल हैं: RSKtrad - पूरक, चट्टान की प्रतिक्रिया, चट्टान की प्रतिक्रिया - immunofluorescence की प्रतिक्रिया और इसके संशोधन, rit, ribt - पीला Treponia के immobilization की प्रतिक्रिया, आरपीजीए निष्क्रिय hemagglutination की प्रतिक्रिया है, आईएफए एक immuno है -मुनिमल विश्लेषण।

3. Syphilis recombinant Antigens का उपयोग कर परीक्षण

इस परीक्षण समूह के लिए एंटीजन आनुवंशिक रूप से इंजीनियरिंग द्वारा प्राप्त किए जाते हैं और प्रतिक्रियाओं में उपयोग किए जाते हैं - आरपीजीए और आईएफए, इम्यूनोब्लोटिंग (आईबी) और इम्यूनोफ्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण विश्लेषण में।

अंजीर। 3. सिफिलिस का निदान करने के लिए, सीरोलॉजिकल परीक्षणों का एक परिसर का उपयोग किया जाता है।

अनावश्यक परीक्षणों के उपयोग के साथ सिफलिस का निदान

सिफलिस, अप्रकाशित परीक्षणों या सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं (सीईआर) के एक परिसर का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। सीरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स 5 वें सप्ताह से संक्रमण के पल से या उपस्थिति के 2-3 सप्ताह तक लागू किया जाएगा। एंटीबॉडी को लगभग सभी रोगियों से ताजा प्राथमिक के साथ पता चला है ,. तृतीयक छुपा सिफलिस वाले मरीजों में 50 - 60% मामलों में 70 - 80% रोगियों में सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं सकारात्मक हैं।

गैर-परिष्कृत परीक्षणों के उपयोग के साथ सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं झूठी सकारात्मक परिणाम दे सकती हैं।

अंजीर। 4. सिफलिस का विश्लेषण करने के लिए रक्त बाड़।

पूरक बाध्यकारी प्रतिक्रिया (आरकेके कार्ड, केएसके सी सीए, वासरमैन प्रतिक्रिया)

वासर्मन की प्रतिक्रिया (आरडब्ल्यू, आरवी), ए। वासरमैन द्वारा 100 साल पहले की खोज की गई है, हालांकि, परंपरा के लिए श्रद्धांजलि के रूप में, कई बदलाव हुए हैं, ने अपना नाम वर्तमान में रखा है। कार्डियोलिपिन एंटीजन के उपयोग के साथ पूरक बाध्यकारी प्रतिक्रिया न केवल एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए डिज़ाइन की गई है, बल्कि एक मात्रात्मक संस्करण में भी प्रदर्शन की गई है - विभिन्न सीरम dilutions के साथ, जो इसे उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए उपयोग करने की अनुमति देता है। कम संवेदनशीलता और विशिष्टता, झूठी सकारात्मक परिणाम प्राप्त करना - इस प्रकार के अध्ययन के नकारात्मक पक्ष।

वासरमैन प्रतिक्रिया का सार निम्नानुसार है: एंटीजन, जो वासरमैन प्रतिक्रिया के निर्माण में उपयोग किया जाता है, मानव रक्त में सिफलिस के क्षय के कार्यक एजेंटों को एंटीबॉडी की उपस्थिति के मामले में, एक प्रशंसा के माध्यम से, संबंधित हैं उन्हें और तलछट में गिरना। प्रतिक्रिया तीव्रता को संकेत (+) द्वारा इंगित किया जाता है। प्रतिक्रिया नकारात्मक हो सकती है (-) - प्रक्षेपण की अनुपस्थिति, एक संदिग्ध (छोटा तलछट या +), कमजोर सकारात्मक (++), सकारात्मक (+++) और तेजी से सकारात्मक (++++)।

एक अधिक संवेदनशील वासरमैन की संशोधित प्रतिक्रिया - कॉलम की प्रतिक्रिया। इसके साथ, यह सीरम में एंटीबॉडी द्वारा पता लगाया जाता है, जहां वासरमैन की प्रतिक्रिया ने नकारात्मक परिणाम दिया था।

तेजी से सकारात्मक प्रतिक्रियाओं के साथ, प्रतिक्रियाओं का मात्रात्मक निर्धारण किया जाता है, जिसके लिए सीरम का उपयोग 1:10 से 1: 320 तक dilutions में किया जाता है, जिससे उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए इस प्रकार के शोध का उपयोग करना संभव हो जाता है। उदाहरण के लिए, एंटीबॉडी में कमी और बाद में सर्नेगेटिवेशन (नकारात्मक परिणाम प्राप्त करना), बीमारी का एक सफल इलाज इंगित करता है।

अंजीर। 5. सिफलिस पर रक्त परीक्षण वासरमैन की प्रतिक्रिया है।

वर्षा का माइक्रोरेक्टमेंट (एमआरपी)

वर्षा का माइक्रोरेक्टमेंट व्यक्तिगत आबादी की सामूहिक परीक्षाओं, सिफलिस का निदान और उपचार की प्रभावशीलता पर नियंत्रण के लिए प्रयोग किया जाता है। इस प्रकार के अध्ययन को पूरा करने के लिए यह आवश्यक है छोटी संख्या अध्ययन के तहत सामग्री। वर्षा का माइक्रोरेक्टमेंट एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया एंटीजन एंटीबॉडी पर आधारित है। सीरम में एंटीबॉडी की उपस्थिति के मामले में, एंटीजन एंटीबॉडी का सर्वेक्षण परिसर फ्लेक्स के गठन के साथ एक प्रक्षेपण में पड़ता है। प्रतिक्रिया एक विशेष ग्लास प्लेट के कुओं में की जाती है। यह उत्परिवर्तन की तीव्रता और वासरमैन की प्रतिक्रिया के रूप में (+) में फ्लेक्स की परिमाण का अनुमान है। गर्भवती महिलाओं, दाताओं और उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए लागू नहीं होता है। वीडीआरएल और आरपीआर माइक्रोरेक्ट की किस्में हैं।

अंजीर। 6. कांच पर एक बूंद में वर्षा प्रतिक्रिया का प्रकार।

अंजीर। 7. सिफलिस पर रक्त परीक्षण माइक्रोप्रोपैक्टिशन प्रतिक्रिया है।

अंजीर। 8. प्लाज्मा प्रतिक्रियाओं के तेजी से दृढ़ संकल्प की प्रतिक्रिया के लिए एक सेट (सिफलिस आरपीआर के लिए परीक्षण)।

गैर-विशिष्ट सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के दौरान प्राप्त सभी सकारात्मक परीक्षणों को विशिष्ट प्रतिक्रियाओं के साथ पुष्टि की आवश्यकता होती है - TREPALONE परीक्षण।

Tronewhen परीक्षण के उपयोग के साथ सिफिलिस का निदान

Tronewhen परीक्षण आयोजित करते समय, Treponem उत्पत्ति के एंटीजन का उपयोग किया जाता है। उनके नकारात्मक पक्ष उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करने के लिए उपयोग की असंभवता है, स्पिरोकेटिक्स और गैर-आरामदायक ट्रेपेनेमेटोसिस के दौरान सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने और झूठी सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए सकारात्मक परिणाम प्राप्त करना ओन्कोलॉजिकल रोग, लापरवाही, कुछ अंतःस्रावी रोगविज्ञान। आरपीजीए, आईएफए और रीफ जैसे परीक्षण सिफिलिस इलाज के बाद कई वर्षों तक सकारात्मक रहते हैं, और कुछ मामलों और जीवन में।

रिबेट और रीफ सिफलिस का निदान करने के लिए उपयोग की जाने वाली सभी सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं से अधिक विशिष्ट हैं। वे आपको झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाओं को अलग करने की अनुमति देते हैं, नकारात्मक प्रतिक्रियाओं के साथ बहने वाले सिफिलिस के देर के रूपों की पहचान करते हैं। रिबेट की मदद से, गर्भवती महिलाओं में झूठी सकारात्मक प्रतिक्रियाएं मान्यता प्राप्त होती हैं जब बाल संक्रमण के मुद्दे को हल करने के लिए आवश्यक होता है।

पीला ट्रेपोनिया (रिबेट, आरआईटी) के immobilization की प्रतिक्रिया

प्रतिक्रिया का सार यह है कि रोगी के सीरम में एंटीबॉडी पीले ट्रेपोनम्स द्वारा immobilized हैं। एक नकारात्मक को प्रतिक्रिया माना जाता है जब 20% कारक एजेंटों, कमजोर बिस्तर - 21 - 50%, सकारात्मक - 50 - 100% तक immobilization। रिबेट कभी-कभी गलत सकारात्मक परिणाम देता है। परीक्षण जटिल और समय लेने वाला है, हालांकि, संचालन करते समय अनिवार्य है क्रमानुसार रोग का निदान गर्भवती महिलाओं सहित रोगी के छिपे हुए रूपों और गंभीर प्रतिक्रियाओं के झूठे सकारात्मक परिणाम। रिबेट माध्यमिक, प्रारंभिक और बाद के सिफलिस के साथ 100% सकारात्मक परिणाम देता है, 94 - 100% मामलों में - सिफलिस के अन्य रूपों के साथ।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस रिएक्शन (रीफ)

प्रतिक्रिया का सार इस तथ्य में निहित है कि पीला प्लथर्स (एंटीजन), फ्लोरोकोरोक्रोमास लेबल वाले एंटीबॉडी से जुड़े, एक लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप पीले-हरे रंग की चमक में प्रकाशित होते हैं। परिणाम का आकलन चिह्न (+) द्वारा किया जाता है। कक्षा ए के रीफ, इम्यूनोग्लोबुलिन का उपयोग करना। Immunofluorescence प्रतिक्रिया वासरमैन की प्रतिक्रिया से पहले सकारात्मक हो जाती है। यह माध्यमिक और गुप्त सिफिलिस में हमेशा सकारात्मक होता है, 95 - 100% मामलों में तृतीयक और जन्मजात सिफलिस के साथ सकारात्मक होता है। इस प्रकार के अध्ययन करने की तकनीक रिबेट की तुलना में सरल है, लेकिन रीफ को पसलियों को प्रतिस्थापित करना असंभव है, इसलिए यह प्रतिक्रिया विशिष्टता पर रिबेट से कम है। रीफ -10 (रीफ संशोधन) अधिक संवेदनशील है, आरआईएफ -200 और आरआईएफ-एबीएस अधिक विशिष्ट हैं।

अंजीर। 9. सिफलिस पर रक्त परीक्षण इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया (रीफ) है।

पीला ट्रेपोनम (आरआईपीबीटी) की प्रतिरक्षा चिपकने की प्रतिक्रिया

प्रतिक्रिया का सार इस तथ्य में निहित है कि पूरक की उपस्थिति में पीईआर ट्रेपोनम संवेदनशील सीरम को एरिथ्रोसाइट्स की सतह का पालन किया जाता है। Tserucketing के लिए प्राप्त परिसरों तलछट में गिर जाते हैं। इस परीक्षण की संवेदनशीलता और विशिष्टता रीफ और रिबेट के करीब है।

सिफलिस पर इम्यूनो-इम्यूनिमल विश्लेषण (आईएफए)

आईएफए का उपयोग, कक्षा एम और जी के इम्यूनोग्लोबुलिन्स का उपयोग करना। आईजीएम विधि को स्क्रीनिंग और पुष्टि की पुष्टि के रूप में निर्धारित किया जाता है। एलिसा और इसकी विशिष्टता की संवेदनशीलता चट्टान के समान है। जब सिफिलिस, आईएफए संक्रमण के तीसरे महीने से सकारात्मक परिणाम देता है और काफी लंबा समय (कभी-कभी सभी जीवन) सकारात्मक रहता है।

अंजीर। 10. इम्यूनो एंजाइम विश्लेषक।

निष्क्रिय प्रतिक्रिया (अप्रत्यक्ष) हेमग्लथिनेशन (आरपीजीए)

आरपीजीए एरिथ्रोसाइट्स की क्षमता पर आधारित है, जिस पर पीला ट्रेपोनेमा की एंटीजन को adsorbed किया जाता है, एक रोगी के सीरम की उपस्थिति में चिपकने के लिए (हेमगग्लुटिनेशन)। आरपीजीए का उपयोग छुपा सहित सभी प्रकार के सिफिलिस का निदान करने के लिए किया जाता है। जब लागू किया गया उच्च गुणवत्ता एंटीजन इस प्रकार की सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया विशिष्टता और संवेदनशीलता पर अन्य सभी परीक्षणों से अधिक है।

अंजीर। 11. आरपीजीए का उपयोग सिफिलिस के सभी रूपों का निदान करने के लिए किया जाता है।

अंजीर। 12. सिफिलिस पर विश्लेषण एक निष्क्रिय प्रतिक्रिया (अप्रत्यक्ष) हेमग्लूटिनेशन (योजना) है।

अंजीर। 13. एक उलटा छतरी का प्रकार परीक्षण ट्यूब के सभी नीचे पर कब्जा कर रहा है एक सकारात्मक प्रतिक्रिया इंगित करता है। इस मामले में जब टेस्ट ट्यूब के केंद्र में एरिथ्रोसाइट्स को कॉलम ("बटन") द्वारा तय किया जाता है, तो वे नकारात्मक प्रतिक्रिया की बात करते हैं।

अंजीर। 14. प्रयोगशाला स्थितियों में आरपीजीए का परीक्षण करें।

माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स

सीरोलॉजिकल निदान के साथ, पीला ट्रेपोनिया (माइक्रोबायोलॉजिकल डायग्नोस्टिक्स) का पता लगाने की विधि एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है, खासतौर पर सर्नेजिव सिफलिस की अवधि के दौरान, जब रक्त में कोई एंटीबॉडी नहीं होती है, लेकिन पहले से ही ताजा प्राथमिक सिफलिस के पहले अभिव्यक्तियां हैं (ठोस शंकर)।

अध्ययन के लिए जैविक सामग्री ठोस अल्सर (चैंको) की सतह से अलग हो जाती है, जो पुस्टलिंग सिफलिड की सामग्री, मॉकिंग और इरोजिव पैप्यूल की सामग्री होती है, जो संक्रमित होती हैं लसीकापर्व, पीआरआर - रक्त के लिए, शराब और amniotic तरल पदार्थ।

सिफलिस रोगजनकों का पता लगाने के लिए सबसे अच्छी पद्धति माइक्रोस्कोप के अंधेरे क्षेत्र में जैविक सामग्री का अध्ययन है। यह तकनीक आपको संरचना और आंदोलन की विशेषताओं को सीखने के लिए एक जीवित स्थिति में पीला ट्रेपोनम्स को देखने की अनुमति देती है, सैप्रोफाइट्स से रोगजनक रोगजनकों को अलग करती है।

अंजीर। 15. सिफलिस पर विश्लेषण - डार्क-गैस माइक्रोस्कोपी।

अंजीर। 16. शुष्क स्मीयर का अध्ययन करते समय, पेंटिंग का उपयोग रोमनोव्स्की जिमजिया पर किया जाता है। पीला treponams गुलाबी रंग में चित्रित किया जाता है, अन्य सभी प्रकार के spirochete - बैंगनी में।

अंधेरे क्षेत्र में माइक्रोस्कोपी के दौरान पीला ट्रेपून का पता लगाने सिफलिस के अंतिम निदान का पूर्ण मानदंड है।

अंजीर। 17. बैक्टीरिया का पता लगाने के लिए, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया लागू होती है (रीफ) - एक ट्रेपान परीक्षण। फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल वाले एक विशिष्ट सीरम के साथ एक यौगिक के साथ विशिष्ट एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स, लुमेनसेंट माइक्रोस्कोप के प्रकाश में हरे रंग के रंग के साथ बैक्टीरिया की चमक देता है।

अंजीर। 18. सिफिलिस रोगजनक लेवैडाइटिस (चांदी की प्रजनन) की विधि के अनुसार तैयार स्मीयर में अच्छी तरह से दिखाई दे रहे हैं। संक्रमित ऊतकों की पीले रंग की कोशिकाओं की पृष्ठभूमि के खिलाफ काले रंग के पीले ट्रेपोनम्स।

अंजीर। 20. पीला ट्रेपोनम की कॉलोनी की तस्वीर में। बैक्टीरिया की संस्कृति कठिन है। वे व्यावहारिक रूप से कृत्रिम पोषण मीडिया पर नहीं बढ़ते हैं। घुड़सवार और सीरम खरगोश युक्त वातावरण पर, उपनिवेश 3 - 9 दिनों के लिए दिखाई देते हैं।

सिफलिस पर पीसीआर

प्रभावी और वादा आज एक बहुलक श्रृंखला प्रतिक्रिया करने का तरीका है। सिफिलिस पर पीसीआर आपको कई घंटों तक परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है, और बीमारी के कम से कम कुछ कारक एजेंट डायग्नोस्टिक्स के लिए इकट्ठे सामग्री में मौजूद हो सकते हैं।

अंजीर। 21. सिफलिस पर पीसीआर आपको डीएनए या पीले ट्रेपून के अपने टुकड़े का पता लगाने की अनुमति देता है।

अध्ययन की इस विधि की संवेदनशीलता जैविक सामग्री में पीला ट्रेपून की उपस्थिति पर निर्भर करती है और 98.6% तक पहुंच जाती है। इस परीक्षण की विशिष्टता काफी हद तक निदान के दौरान प्रवर्धन के लिए लक्ष्य की सही पसंद पर निर्भर करती है और 100% तक पहुंच जाती है।

साथ ही, सिफलिस और पीसीआर के निदान के लिए प्रत्यक्ष तरीकों की संवेदनशीलता और विशिष्टता की अपर्याप्त रूप से अध्ययन की तुलनात्मक विशेषताओं के कारण, रोग के निदान के लिए रूसी संघ में परीक्षा की इस विधि को अभी तक अनुमति नहीं है।

सिफलिस पर पीसीआर को केवल कुछ मामलों में, जन्मजात सिफलिस, न्यूरोसिमिफ़िलिस के निदान के लिए एक अतिरिक्त विधि के रूप में, एचआईवी रोगियों में सीफिलिस के कठिनाइयों के निदान के साथ एक अतिरिक्त विधि के रूप में।

अंजीर। 22. पीसीआर के उपयोग के साथ पीले ट्रेप्लेमा डीएनए की पहचान या तो व्यवहार्य बैक्टीरिया की उपस्थिति, या मृतकों के अवशेषों की उपस्थिति, लेकिन गुणसूत्र डीएनए के व्यक्तिगत वर्गों की अतिरिक्त प्रतियां शामिल हैं।

क्षेत्रीय विधि के आधार पर प्रतिक्रियाओं के संयोजन का प्रतिनिधित्व करता है एंटीजन एंटीबॉडी की बातचीत (एजी-एटी) और संक्रामक बीमारियों, या वास्तव में माइक्रोबियल एंटीजनों के कार्यक्षेत्रों के एंटीबॉडी के जीव के सीरम और अन्य तरल पदार्थों की पहचान करने का लक्ष्य रखा गया। सीरोलॉजिकल विधि उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता द्वारा विशेषता है। इस विधि की अधिकांश प्रतिक्रियाएं एक नियम के रूप में प्रयोगशालाओं की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए उपलब्ध और लेखांकन में सरल हैं, सुरक्षित, आर्थिक, मानकीकरण हैं। सेवा मेरे नुकसान सीरोलॉजिकल विधि को जिम्मेदार ठहराया जा सकता है: 1) परिणाम की अप्रत्यक्ष प्रकृति, जब रोग की ईटियोलॉजी का निर्णय रोगजनक के आवंटन पर नहीं किया जाता है, बल्कि कारक एजेंट पर उत्तर (प्रतिरक्षा) जीव पर; 2) रोगी के शरीर में माता-पिता के हस्तक्षेप की आवश्यकता; 3) ज्यादातर मामलों में, निदान के स्वर्गीय फॉर्मूलेशन, जो एक मानवीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की प्राकृतिक गतिशीलता द्वारा समझाया जाता है; 4) वर्तमान संक्रमण के लिए (पहले पीड़ित बीमारी या टीकाकरण के परिणामस्वरूप) एनीटिक को अपनाने की क्षमता। माइक्रोबियल एंटीजन का निर्धारण करते समय, तीसरे और चौथे नुकसान अनुपस्थित हैं, लेकिन विभिन्न सूक्ष्मजीवों के एंटीजनों के संचलन की विशेषताओं को ध्यान में रखना आवश्यक है और इन सुविधाओं को अध्ययन के लिए सामग्री लेने की संभावना के साथ संबंधित है।

सीरोलॉजिकल विधि के चरण:

1) ले लो अनुसंधान के लिए सामग्री। ज्यादातर मामलों में, सामग्री है सीरम रक्त। यह रक्त के एक गुच्छा के गठन के बाद प्राप्त किया जाता है, मानक तकनीक के अनुसार रक्त को सख्ती से असंतुलित परिस्थितियों में लिया जाना चाहिए,

2) किसी दिए गए मामले के लिए सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया की पसंद अध्ययन, इच्छित बीमारी, बीमारी का चरण, अध्ययन के लिए सामग्री, प्रतिक्रिया की संवेदनशीलता, किसी विशेष प्रयोगशाला की क्षमताओं पर निर्भर करती है। पहचानने के लिए, साथ ही उच्च रक्तचाप, agglutination प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है ( रा)निष्क्रिय हेमग्लुटिनेशन ( आरपीजीए)), इम्यूनोफ्लोरेसेंस (रीफ), हेमग्लथिनेशन ब्रेकिंग ( आरटीएचए), वाज्ञा, स्थापन, पूरक बाध्यकारी प्रतिक्रिया (आरएसके), आदि

3) सीरोलॉजिकल रिएक्शन का विवरण,

4) संक्रमण के सीरोलॉजिकल मार्करों की उपस्थिति को निर्धारित करने के लिए एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया का पंजीकरण।

सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं की एक किस्म कई द्वारा विशेषता है सामान्य लक्षण:

1) चूंकि किसी भी सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं और एजी इंटरैक्शन प्रतिक्रियाएं होती हैं, सभी मामलों में अध्ययन के तहत सब्सट्रेट में उपस्थिति स्थापित करने के लिए, प्रसिद्ध मानक कॉर्पस्क्यूलर या घुलनशील एजी का एक सेट कहा जाता है, जिसे बुलाया जाता है निदान। बदले में, एजी की उपस्थिति को स्थापित करने के लिए एक सेट की आवश्यकता है प्रतिरक्षा नैदानिक \u200b\u200bसीरम

2) एजी और एटी की बातचीत केवल इलेक्ट्रोलाइट की उपस्थिति में की जाती है, जिसे आमतौर पर सोडियम क्लोराइड या बफर मिश्रण के आइसोटोनिक समाधान का उपयोग किया जाता है, सिस्टम का पीएच लगभग 7 होना चाहिए,

3) एजी-कॉम्प्लेक्स के गठन के लिए, ऊष्मायन अवधि विशेष तापमान स्थितियों (+4 डिग्री सेल्सियस से 37 डिग्री सेल्सियस तक) की आवश्यकता होती है। एक विशिष्ट प्रतिरक्षा परिसर का गठन जल्दी ही होता है; एक साधारण आंख की घटना (agglutination, lysis, आदि) के लिए दृश्यमान - धीरे-धीरे, कुछ घंटों या एक दिन के बाद,

4) सीरोलॉजिकल रिएक्शन (एंटीजन और एंटीबॉडी) के दोनों घटक बराबर अनुपात में मौजूद होना चाहिए। किसी भी घटक की अधिकता एजी-जटिल के गठन को अवरुद्ध करती है और झूठी नकारात्मक परिणामों में योगदान देती है।

सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के लिए लेखांकन दृष्टि से, कभी-कभी एक आवर्धक ग्लास के साथ किया जाता है। सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया के रखरखाव का सार बाध्यकारी उच्च रक्तचाप की घटना के निर्धारण और एजी-जटिल के गठन पर कम हो जाता है। दृष्टि से, एजी-ऑन कॉम्प्लेक्स का गठन दो मुख्य घटनाओं - agglutination और वर्षा के साथ है। उनके बीच मतभेद उनके लिए विशिष्ट एंटीजन और एंटीबॉडी की विशेषताओं द्वारा निर्धारित किए जाते हैं। साथ ही, ऐसे लोग भी हैं जो गैर-संगत के संश्लेषण को प्रेरित करते हैं, इस मामले में एजी-ऑन कॉम्प्लेक्स का गठन एग्लूटिनेशन की एक घटना और न ही वर्षा की घटना, बल्कि इसके गठन की पहचान के साथ नहीं है एजी-ऑन कॉम्प्लेक्स को विशेष टैग के साथ प्रतिक्रिया के नैदानिक \u200b\u200bघटक के लेबलिंग की आवश्यकता होती है या डायग्नोस्टिक एंटीजन को एक और कुल राज्य में स्थानांतरित करने की आवश्यकता होती है।

प्रतिक्रिया का आकलन करने में, 3 मुख्य मानदंडों का उपयोग किया जाता है: 1) प्रतिक्रिया की उपस्थिति और तीव्रता (प्लस, आदि में); 2) डायग्नोस्टिक टिटर, 3) बीमारी के दौरान 4 गुना या उससे अधिक के ट्यूटर्स में वृद्धि। प्रतिक्रिया दृश्य घटनाओं या इम्यूनोकेमिकल मार्कर के बाध्यकारी पर सेट की गई है। सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया की तीव्रता का अनुमान लगाने के लिए, सिद्धांत 4 "+" (तालिका 7) का उपयोग किया जाता है।

तालिका 7।

Agglutination और वर्षा प्रतिक्रियाओं के लिए 4 "+" सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं के लिए सर्वेक्षण प्रणाली

सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया के परिणामों के मात्रात्मक प्रतिनिधित्व के लिए, एंटीबॉडी या एंटीजन टाइटर्स की अवधारणा का उपयोग किया जाता है। (या टाइटुर एजी) पर तीर को निर्धारित करने के लिए, एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया डालना आवश्यक है, सीरम dilutions या अन्य सामग्री (रोलिंग) की एक श्रृंखला तैयार करना आवश्यक है। सीरम dilutions खाना पकाने के दौरान, एक इलेक्ट्रोलाइट समाधान का उपयोग किया जाता है (अक्सर आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड)। प्रजनन चरण (टाइट्रेशन) इलेक्ट्रोलाइट समाधान की मात्रा और रक्त सीरम की मात्रा के अनुपात के अनुपात द्वारा दिया जाता है। उदाहरण के लिए, लगातार dilutions के साथ, इलेक्ट्रोलाइट और रक्त सीरम समाधान के बराबर मात्रा और मट्ठा 1 ट्यूब में 2 गुना एक चरण में मिश्रित होते हैं, सीरम की मात्रा का 1 वॉल्यूम इलेक्ट्रोलाइट समाधान की चौथी मात्रा में जोड़ा जाता है, एक चरण में 10 गुना - 9 से 9 इलेक्ट्रोलाइट समाधान की मात्रा को रक्त सीरम (तालिका 8) की 1 मात्रा जोड़ा जाता है।

डायग्नोस्टिक्स की सीरोलॉजिकल विधि अनुसंधान के 2 दिशाओं के आवेदन के लिए प्रदान करती है: सेरोडायग्नोस्टिक्स (सीरम परीक्षण में विशिष्ट एंटीबॉडी की पहचान) और सेरॉयड्स (समर्पित रोगजनक के एंटीजनिक \u200b\u200bगुणों का निर्धारण (समर्पित रोगजनक के एंटीजनिक \u200b\u200bगुणों का निर्धारण) अपने प्रकार और प्रकार स्थापित करने के लिए)।

सेरोडायग्नोसिस में, लेबल वाले एंटीजन या एंटीबॉडी का उपयोग करके agglutination, वर्षा, lysis, rsk, प्रतिक्रिया की प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है। इन प्रतिक्रियाओं के घटक हैं: सर्वेक्षण किए गए रोगियों और मानक एंटीजनिक \u200b\u200bदवाओं का रक्त सीरम। अध्ययन का उद्देश्य परीक्षण सीरम में संक्रामक बीमारियों के कारक एजेंटों के लिए एंटीबॉडी टाइटर्स की परिभाषा है।

विशिष्ट एंटीबॉडी के उच्च खिताब की पहचान विशेष रूप से यदि वे तथाकथित "डायग्नोस्टिक" टाइमर के स्तर तक पहुंचते हैं, तो इच्छित निदान की पुष्टि करता है। युग्मित सीरम के अध्ययन को बहुत महत्व दिया जाता है जब रोग की शुरुआत में लिया गया सीरम (3-9 वें दिन) और रोग के 7 वें - 10 वीं दिन को प्राप्त करने के लिए एक साथ शीर्षक दिया जाता है। डायग्नोस्टिक वैल्यू में एंटीबॉडी टाइटर्स में 4 गुना वृद्धि हुई है।

सेरोइड्स के मामले में, अक्सर दूसरों की तुलना में ग्लास पर agglutination की प्रतिक्रिया का उपयोग करते हैं। प्रतिक्रिया घटकों: उगाया शुद्ध संस्कृति रोग (एंटीजन) और मानक नैदानिक \u200b\u200bप्रतिरक्षा खरगोश सीरम (एंटीबॉडी) का कारक एजेंट।

सीरोलॉजिकल विधि का लाभ - सादगी, उपलब्धता, उच्च संवेदनशीलता, विशिष्टता, एक्सप्रेस।

नुकसान: महंगी मानक तैयारियों और उपकरणों की आवश्यकता।

एलर्जी-विधि

यह विधि यह शरीर की संवेदनशीलता की पहचान एक या किसी अन्य संक्रामक एजेंट के लिए प्रदान करता है, जिसमें एक बड़ा नैदानिक \u200b\u200bमूल्य होता है। यह ज्ञात है कि कुछ संक्रामक बीमारियों का कोर्स धीमी-प्रकार अतिसंवेदनशीलता के गठन के साथ होता है। इस संबंध में, एलर्जी की छोटी खुराक वाले ऐसे मरीजों के इंट्रैक्यूनशील प्रशासन को एलर्जी के साथ फिर से मुठभेड़ के कारण शरीर से उचित प्रतिक्रिया होती है। प्रतिक्रिया मंदी के प्रकार के साथ आगे बढ़ती है, और 48-72 घंटों के बाद एलर्जी प्रशासन के स्थान पर, लालिमा प्रकट होती है, सूजन, कभी-कभी घुसपैठ (सकारात्मक प्रतिक्रिया)। यदि शरीर संवेदनशील नहीं है, तो इंट्राडर्मल प्रशासन शरीर (नकारात्मक प्रतिक्रिया) से कोई प्रतिक्रिया नहीं देगा। उद्योग ने त्वचा-एलर्जी के नमूने के लिए विशेष दवाओं का उत्पादन किया: ट्यूबरकुलिन, डाइसेंटरिन, ब्रूसेलिन, ट्यूलरिन इत्यादि।

एलर्जी विधि विशेष रूप से उन मामलों में महत्वपूर्ण है जहां संक्रामक बीमारी के कारक एजेंट का पता लगाना मुश्किल है या असंभव है (उदाहरण के लिए, जब लापरवाही) या जब इसमें बहुत समय लगता है (उदाहरण के लिए, ब्रूकोलोसिस)। ट्यूबरकुलिन के साथ नमूना न केवल नैदानिक \u200b\u200bउद्देश्य के साथ अभ्यास में प्रयोग किया जाता है, बल्कि बीसीजी टीका के बच्चों के संशोधन के समय के साथ-साथ सामूहिक विरोधी तपेदिक प्रतिरक्षा का अध्ययन करने के लिए भी निर्धारित किया जाता है।

एक एलर्जी संबंधी विधि के लाभ - इसकी सादगी, सटीकता, अभिव्यक्ति।

हानि - सीमित आवेदन, क्योंकि सभी संक्रामक बीमारियों से दूर एक धीमी प्रकार के प्रकार की अतिसंवेदनशीलता का गठन किया जाता है।

निदान में सीरिक प्रतिक्रियाएं

संक्रामक रोग

वर्तमान में, इम्यूनोलॉजिकल शोध विधियों का व्यापक रूप से संक्रामक और गैर-विनोदी बीमारियों के प्रयोगशाला निदान के लिए उपयोग किया जाता है।

एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच बातचीत की प्रतिक्रियाओं को सीरोलॉजिकल (सीरम - सीरम, लोगो - सिद्धांत) कहा जाता है।

सभी सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का सार परिसर के गठन के साथ इसी तरह के एंटीजन और एंटीबॉडी के एक विशिष्ट संयोजन में शामिल है। एक प्रतिरक्षा अनुपालन (होमोलॉजी) - मुख्य घटक - एंटीजन और एंटीबॉडी होने पर सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया संभव है। इम्यूनोलॉजिकल विशिष्टता का आधार एंटीजन और एंटीबॉडी की संरचनात्मक पूरकता है।

एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच बातचीत की प्रक्रिया दो चरणों में होती है - विशिष्ट और गैर-विशिष्ट। पहला चरण जल्दी से विकास कर रहा है। इसमें एंटीबॉडी के सक्रिय केंद्र का एक विशिष्ट संबंध शामिल है जिसमें संबंधित (homologous) एंटीजन के निर्धारक समूहों के साथ। बाद के चरण धीरे-धीरे विकसित हो रहा है, निरर्थक है - यह बाहरी अभिव्यक्ति एंटीजन एंटीबॉडी प्रतिक्रियाएं (गुच्छे, क्लाउडिंग माध्यम, आदि का नुकसान)

सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं दो लक्ष्यों के साथ लागू होती हैं:

1) ज्ञात एंटीजन (सेरोडायग्नोस्टिक्स) की मदद से परीक्षण सीरम में एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए;

2) ज्ञात सेरा (सेरॉयड) का उपयोग करके एक अज्ञात एंटीजन स्थापित करने के लिए।

माइक्रोबायोलॉजिकल स्टडीज में एक अज्ञात एंटीजन की परिभाषा एक सामान्य, प्रजातियों, सर्वेक्षण से आवंटित रोगजनकों की नमूना सहायक स्थापित करने के लिए की जाती है। ऐसे मामलों में, प्रतिक्रिया के दो मुख्य घटकों में से (एंटीबॉडी, एंटीजन), एक एंटीजन अज्ञात है, प्रतिक्रिया स्पष्ट रूप से ज्ञात एंटीबॉडी के साथ की जानी चाहिए। इस मामले में, एंटीजन अध्ययन के तहत परीक्षण सामग्री से अलग सूक्ष्मजीवों की एक शुद्ध संस्कृति है। प्रतिरक्षा नैदानिक \u200b\u200bसीरम का उपयोग प्रसिद्ध एंटीबॉडी के रूप में किया जाता है। उत्तरार्द्ध जानवरों के रक्त (अक्सर खरगोश) से प्राप्त होता है जो संबंधित जीवाणु एंटीजन के साथ पूर्व-टीकाकरण होता है। प्रतिरक्षा सेरम में होना चाहिए ऊँचा स्तर विशिष्ट एंटीबॉडी।

इसके अलावा, विभिन्न गैर-जीवाणु एंटीजनों को निर्धारित करने के लिए सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जा सकता है: जोड़े के चयन के लिए रक्त समूह, ऊतक एंटीजन, ट्यूमर स्थापित करने के लिए - प्राप्तकर्ता जब अंगों और ऊतकों के प्रत्यारोपण, आदि।

रक्त सीरम में एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जा सकता है। ऐसे मामलों में, एक प्रसिद्ध एंटीजन (डायग्नोस्टिकम) की आवश्यकता होती है। जीवित या मारे गए सूक्ष्म जीवों का निलंबन, उनके निष्कर्ष या इन्सुलेटेड रासायनिक अंशों को एंटीजन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

वर्तमान में स्वास्थ्य अभ्यास में उपयोग की जाने वाली कई सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं एक ऐसी घटना में भिन्न होती हैं जो एंटीजन और एंटीबॉडी के कनेक्शन का पता लगाती हैं। प्रतिक्रिया का दृश्य अभिव्यक्ति अलग-अलग होगी, इस पर निर्भर करता है कि किस तकनीक का उपयोग किया जाता है, किस भौतिक स्थिति में एंटीजन या प्रतिरक्षा सीरम का उपयोग किया जाता है, चाहे पूरकता प्रतिक्रिया में शामिल हो। उदाहरण के लिए, यदि एक कॉर्पस्क्यूलर एंटीजन का उपयोग किया जाता है, तो एग्लूटिनेशन की घटना कण बंधन (एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया) की घटना है। चूंकि कॉर्पस्क्यूलर एंटीजन में एक कण अपेक्षाकृत बड़ा आकार होता है, इसलिए एक दृश्यमान फ्लैकी प्रक्षेपण होता है। यदि प्रतिक्रिया में एक घुलनशील एंटीजन का उपयोग किया जाता है, तो एक बढ़िया दानेदार प्रक्षेपण देखा जाता है - एक प्रक्षेपण (वर्षा प्रतिक्रिया)। यदि, जीवाणु एंटीजन्स और प्रतिरक्षा सीरम की बातचीत की प्रतिक्रिया में, दोनों पूरक पेश किए जाते हैं, जीवाणुवाद (जीवाणु एंटीजनों को भंग करना) या एरिथ्रोसाइट्स के लिसिस (जब उन्हें एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है)। फ्लोरोक्रोम, एंजाइम या रेडियोसोट्रॉप के साथ लेबल किए गए प्रतिरक्षा सेरा की सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं में आवेदन, आपको इसी घटना (चमक, रंग परिवर्तन या रेडियोसोटोप टैग की गतिविधि) के अनुसार एंटीबॉडी के साथ एंटीजनों की विशिष्ट बाध्यकारी स्थापित करने की अनुमति देता है।

विशिष्टता और संवेदनशीलता के रूप में इस तरह के मानदंडों का उपयोग सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है। विशिष्टता केवल homologous एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया करने के लिए एंटीजन की क्षमता है। संवेदनशीलता - एंटीजन और एंटीबॉडी की न्यूनतम मात्रा के साथ विशिष्ट बातचीत की क्षमता।

दीर्घवृत्तीय प्रतिक्रिया

एग्लूटिनेशन (आरए) प्रतिक्रिया एंटीबॉडी के साथ एंटीजनों की एक विशिष्ट बातचीत है, जो सीरम एंटीबॉडी के प्रभाव में ग्लूइंग एंटीजन में व्यक्त की जाती है और इलेक्ट्रोलाइट की उपस्थिति में उन्हें प्रच्छापित करती है। यह प्रस्तावित सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं में से पहला था।

एग्लूटिनेशन की प्रतिक्रिया की विशेषता यह है कि कोशिकाओं या अन्य कॉर्पस्क्यूलर कणों को इसके फॉर्मूलेशन के दौरान एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है। प्रतिक्रिया कॉर्पस्क्यूलर एंटीजनों की क्षमता पर आधारित है, विशेष रूप से कनेक्ट करने के लिए, प्रतिरक्षा सेरा के समरूप एंटीबॉडी के साथ अनाज, फ्लेक्स, गांठ के रूप में तलछट के गठन के साथ। प्रतिक्रिया केवल इलेक्ट्रोलाइट्स की उपस्थिति में गुजरती है। प्रतिक्रिया में उपयोग किए जाने वाले एंटीजन को एग्लूटिनोजेन्स, एंटीबॉडी - एग्लूटिनिन कहा जाता है, और एग्लूटिनेट द्वारा गठित एक प्रक्षेपण कहा जाता है।

एग्लूटिनेशन की प्रतिक्रिया में एक एंटीजन के रूप में, जीवित फसलों का निलंबन सोडियम क्लोराइड के आइसोटोनिक समाधान या औपचारिक, शराब या हीटिंग, साथ ही साथ लाल रक्त कोशिकाओं, ल्यूकोसाइट्स या अन्य कोशिकाओं द्वारा मारे गए माइक्रोबेश का उपयोग किया जा सकता है।

एंटीबॉडी का स्रोत ज्ञात agglutinating सीरम है, जो जानवरों के सर्वेक्षण के संबंधित एंटीजन, या सीरम के साथ जानवरों को टीकाकरण करके प्राप्त किया जाता है।

मौजूद विभिन्न तरीके Agglutination की प्रतिक्रिया डालना। इनमें से सबसे अधिक लागू: ग्लास पर एक संकेत प्रतिक्रिया, ट्यूबों में तैनात agglutination, hemagglutination प्रतिक्रियाओं और अप्रत्यक्ष hemagglutination (आरएनजी)।


इसी तरह की जानकारी।


सीरोलॉजिकल स्टडी (टेस्ट)प्रयोगशाला विधियों रोगी की जैविक सामग्री में एंटीबॉडी या एंटीजन की पहचान के आधार पर अध्ययन। अक्सर, रक्त का उपयोग विश्लेषण के लिए किया जाता है, कम अक्सर - मूत्र, लार, purulent डिस्कनेक्ट या ऊतक नमूने बायोप्सी के दौरान लिया जाता है।

आवेदन क्षेत्र

  • रक्त प्रकार की परिभाषा।
  • विशिष्ट ट्यूमर प्रोटीन की पहचान - ऑनकोकर्स (उदाहरण के लिए, डिम्बग्रंथि के संदिग्ध कैंसर में, प्रोस्टेट ग्रंथि, मूत्राशय, पेट, आदि)।
  • वायरल, बैक्टीरिया, फंगल, प्रोटोजोगोल संक्रमण (एचआईवी, सिफिलिस, टोक्सोप्लाज्मोसिस, क्लैमिडिया, रूबेला, हर्पस, जेलमिंथ, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस, आदि) का निदान।
  • मामूली सांद्रता में अध्ययन बायोमटेरियल में निहित हार्मोन, एंजाइम और दवाओं का निर्धारण (10-10 ग्राम / एल से कम)।

सीरोलॉजिकल टेस्ट की विधि का सार

सीरोलॉजिकल टेस्ट फॉर्मूलेशन की तकनीक में भिन्न होते हैं, लेकिन वे सभी उपयुक्त एंटीबॉडी के साथ एंटीजन (विदेशी यौगिकों) की बातचीत का परिणाम हैं। अध्ययन में लगातार दो चरण होते हैं। पहले चरण को प्रतिरक्षा परिसरों (सकारात्मक प्रतिक्रिया) के गठन के साथ एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच बातचीत की विशेषता है। दूसरे चरण में, बाहरी संकेत इन सबसे परिसरों की उपस्थिति की पुष्टि करते हुए दिखाई देते हैं (प्रतिक्रिया के प्रकार के आधार पर, यह परीक्षण समाधान को बादल दे सकता है, इसके रंग में बदलाव, गुच्छे का नुकसान, आदि)। दृश्यमान भौतिक घटना की अनुपस्थिति को नकारात्मक परीक्षा परिणाम माना जाता है।

सीरोलॉजिकल स्टडीज के लिए तैयारी

अनुसंधान के प्रकार पर निर्भर करता है। प्रक्रिया को लिखते समय विशिष्ट विश्लेषण की विशेषताओं को चिकित्सा विशेषज्ञ को बताना चाहिए।

आप "स्पेक्ट्रम" क्लिनिक में आवश्यक सीरोलॉजिकल टेस्ट को सौंप सकते हैं। हम यूरोपीय मानकों पर काम कर रहे सर्वश्रेष्ठ महानगरीय प्रयोगशालाओं में विश्लेषण करते हैं, जो तेजी से और विश्वसनीय परिणामों की गारंटी के रूप में कार्य करता है। हमारे डॉक्टर निष्कर्ष को समझने में मदद करेंगे और आगे के निदान के लिए सिफारिशें देंगे।

सीरोलॉजिकल स्टडीज (लैट। सीरम सीरम + ग्रीक। लोगो सिद्धांत) - इम्यूनोलॉजी के तरीके जो सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का उपयोग करके एंटीजन या एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए मानव रक्त या जानवरों के विशिष्ट गुणों का अध्ययन करते हैं।

एस। और। यह पिछली शताब्दी के अंत में पाया गया था, यह पाया गया कि एंटीजन के साथ एंटीजन का यौगिक (एंटीजन - एंटीबॉडी प्रतिक्रिया देखें) के साथ घटनाओं के कई सुलभ दृश्य अवलोकन - agglutination (देखें), वर्षा (देखें) ) या lysis। विशिष्ट एंटीजन मान्यता (देखें) या एंटीबॉडी (देखें) की संभावना, यदि इनमें से एक घटकों में से एक है।

18 9 7 में, एफ। विद्याल ने कहा कि पेट के टाइफोइड के साथ रक्त सीरम रोगी चुनिंदा रूप से पेट के बैक्टीरिया को पीड़ित करते हैं और इसलिए यह प्रतिक्रिया (विडल प्रतिक्रिया देखें) प्रयोगशाला में लागू की जा सकती है। पेट Typhoid के निदान। उसी वर्ष, यह दिखाया गया था कि संबंधित प्रतिरक्षा सीरम फॉर्म फ्लेक्स, या प्रक्षेपण के साथ संयुक्त होने पर प्लेग, पेट और कोलेरा बैक्टीरिया की फसलों के छिद्रण।

वर्षा प्रतिक्रिया किसी भी प्रोटीन एंटीजन के पता लगाने के लिए उपयुक्त थी। 1900-1901 में। के। Landstuyner ने पाया कि लोगों के एरिथ्रोसाइट्स में दो अलग-अलग एंटीजन (ए और बी) हैं, और सीरम दो एग्ग्लुटिनिन (ए और पी) में, जो रक्त समूहों को निर्धारित करने के लिए हेमग्लूशन प्रतिक्रिया के उपयोग में योगदान देता है (देखें)।

रक्त समूह और रे कारक को निर्धारित करने के लिए agglutination की प्रतिक्रिया हेमोट्रानफस और ऊतक प्रत्यारोपण के साथ, Obstetric अभ्यास में उपयोग किया जाता है। आरएचईएसवी कारक (देखें) के खिलाफ एंटीबॉडी अपूर्ण एंटीबॉडी हैं, इसलिए वे रेसस पॉजिटिव एरिथ्रोसाइट्स के साथ सीधी प्रतिक्रिया करने में सक्षम नहीं हैं, इसलिए, उनके पहचान के लिए, कंबा प्रतिक्रिया का उपयोग अपूर्ण एंटीबॉडी के पता लगाने के आधार पर (कुंबस प्रतिक्रिया देखें) एंटी-ग्लोबुलिन सेरा का उपयोग करना। रक्त सीरम को प्रसिद्ध विशिष्टता के एरिथ्रोसाइट्स में जोड़ा गया था, और आईजीजी (अप्रत्यक्ष कुम्बी प्रतिक्रिया) के खिलाफ इस एंटीहोग्लोबुलिन सीरम के बाद। टेस्ट सीरम के अपूर्ण एंटीबॉडी के फैब टुकड़े लाल रक्त कोशिकाओं में शामिल हों, और आईजीजी के खिलाफ एंटीबॉडी इन एंटीबॉडी के मुक्त एफसी टुकड़ों से जुड़ी हुई हैं, और लाल रक्त कोशिकाओं का एग्लटन होता है। हेमोलिटिक एनीमिया के निदान के लिए, ऐसे रोगियों के शरीर में कुम्बा प्रत्यक्ष प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है, एरिथ्रोसाइट्स आरएच के खिलाफ एंटीबॉडी परिसंचरण रक्त से जुड़े होते हैं। उन्हें पहचानने के लिए, आईजीजी के खिलाफ एंटीबॉडी रोगी में ली गई एरिथमोसाइट्स में जोड़े जाते हैं। लाल रक्त कोशिकाओं के agglutination की उपस्थिति बीमारी के निदान की पुष्टि करता है।

हेमग्लथिनेशन की गिरावट प्रतिक्रिया - आरटीएचए (हेमग्लूटिनेशन देखें) एरिथ्रोसाइट वायरस के प्रतिरक्षा सीरम हेमग्लिनेशन (ब्रेकिंग) को रोकने की घटना पर आधारित है। वायरल हेमग्लूटिनेशन की घटना एक सेरोल नहीं है। प्रतिक्रिया एरिथ्रोसाइट रिसेप्टर्स के साथ वायरस के संयोजन के परिणामस्वरूप होती है, हालांकि, आरएचटीए एंटीवायरल एंटीबॉडी की पहचान और टाइट्रेट करने के लिए उपयोग की जाने वाली एक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया है। आरटीएचए इन्फ्लूएंजा, खसरा, रूबेला, महामारी पेरोटाइटिस, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस और अन्य वायरल संक्रमण के सेरोडायग्नोसिस का मुख्य तरीका है, कारक एजेंटों को घंटियां हेमग्लूटिनिंग गुण हैं।

निष्क्रिय, या अप्रत्यक्ष, हेमगग्लुनेशन की प्रतिक्रिया, यह एरिथ्रोसाइट्स या तटस्थ सिंथेटिक विशेषताओं (उदाहरण के लिए, लेटेक्स कण) या एंटीबॉडी की सतह पर, एंटीजन (बैक्टीरियल, वायरल, ऊतक) या एंटीबॉडी (बॉयडेन प्रतिक्रिया देखें) की सतह पर उपयोग करती है। उनमें से agglutination तब होता है जब उपयुक्त सेरा या एंटीजन जोड़े जाते हैं। एरिथ्रोसाइट्स एंटीजन के साथ संवेदी को एंटीजनिक \u200b\u200bएरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम कहा जाता है और एंटीबॉडी की पहचान और टाइट्रेट करने के लिए उपयोग किया जाता है। एंटीबॉडी द्वारा संवेदी एरिथ्रोसाइट्स को इम्यूनोग्लोबुलिन एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम कहा जाता है (देखें) और एंटीजन का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है:

निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया का उपयोग बैक्टीरिया (पेटी टाइफोइड्स और पैराथी, डाइसेंटरी, ब्रूसेलोसिस, प्लेग, कोलेरा, इत्यादि) के कारण बीमारियों का निदान करने के लिए किया जाता है, सरल (मलेरिया) और वायरस (फ्लू, एडेनोवायरल संक्रमण, टिक-पृथ्वी एन्सेफलाइटिस, क्रिमियन हेमोरेजिक बुखार, आदि)। संवेदनशीलता द्वारा निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन की प्रतिक्रिया अलासिरल रोगों (देखें) में वायरस को अलग करने की विधि से कम नहीं है, विशेष रूप से लिम्फोसाइटिक चोरियोमेनिंट के दौरान। निकाले गए अंगों के निलंबन के साथ निष्क्रिय हेमग्लुनेशन की प्रतिक्रिया में लिम्फोसाइटिक चोरियोमेनिटिसिस के वायरस एंटीजन का पता लगाया जाता है, निकाले गए अंगों के निलंबन के साथ दस हजार गुना तलाक हुआ। निष्क्रिय हेमग्लुलेशन की प्रतिक्रिया में सैल्मोनेलोसिस के साथ, बैक्टीरिया मल के 1 ग्राम में कई सौ माइक्रोबियल निकायों की एकाग्रता पर निर्धारित किया जाता है, डैसेंटेरिक बैक्टीरिया में खाद्य उत्पाद 1 ग्राम में कम से कम 500 माइक्रोबियल निकायों की सामग्री के साथ प्राप्त किया।

निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया का उपयोग सोवियत संघ में वायरल हेपेटाइटिस वी के निदान और रोकथाम में किया जाता है। तीव्र हेपेटाइटिस बी वाले रोगियों के रक्त में एचबीएस एंटीजन (ऑस्ट्रेलियाई एंटीजन) का पता लगाने के लिए डायग्नोस्टिक्स द्वारा किया जाता है, जो एरिथ्रोसाइट्स है एचबीएस एंटीजन के खिलाफ बकरी इम्यूनोग्लोबुलिन द्वारा संवेदनशील मुर्गियां। डायग्नोस्टिकम की एक बूंद जांच किए गए लोगों के रक्त सीरम की बराबर मात्रा से जुड़ा हुआ है, और यदि एचबीएस-एंटीजन इसमें मौजूद है, तोगुतिणी होती है। प्रतिक्रिया 1.5 एनजी / मिलीलीटर एचबीएस एंटीजन को पकड़ने में सक्षम है। एचबीएस एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए, उन पर एक एचबीएस एंटीजन के साथ एरिथ्रोसाइट्स रोगियों के खून से अलग होते हैं। निष्क्रिय हेमग्लुटिनेशन की प्रतिक्रिया का उपयोग रोगी की दवाओं और हार्मोन को बढ़ती संवेदनशीलता की पहचान करने के लिए भी किया जाता है, उदाहरण के लिए, पेनिसिलिन या इंसुलिन। इस मामले में, मानव रक्त समूह की लाल रक्त कोशिकाओं को दवा द्वारा संवेदनशील किया जाता है और तब रोगी के सीरम में agglutinins की पहचान करने के लिए उपयोग किया जाता है।

गर्भावस्था स्थापित करने के लिए मूत्र में गोनाडोट्रोपिक हार्मोन की पहचान करने के लिए निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन की प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है (कोरियोनिक गोनाडोट्रोपिन देखें)। इसके लिए, इस हार्मोन के लिए मानक सीरम अध्ययन मूत्र के साथ सेते हैं। एक हार्मोन-थोडेड हार्मोन के साथ एरिथ्रोसाइट्स के अतिरिक्त जोड़े के साथ, एग्लूटिनेशन नहीं होता है (सकारात्मक प्रतिक्रिया), क्योंकि मूत्र में निहित हार्मोन निहित है जो एंटीबॉडी को परेशान करता है।

वर्षा की घटना के आधार पर प्रतिक्रियाएं

वे विभिन्न प्रकार की एंटीजन और एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए उपयोग किए जाते हैं। उच्च गुणवत्ता वाली प्रतिक्रिया का सबसे सरल उदाहरण ट्यूब में एंटीबॉडी पर एंटीजन लेयरिंग की सीमा पर एक अपारदर्शी वर्षा बैंड का गठन होता है। Agar या agarose के अर्द्ध तरल जैल में वर्षा की प्रतिक्रिया की विभिन्न किस्मों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है (आउटरेलॉन, रेडियल इम्यूनोडिफ़्यूजन विधि, इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरोसिस) के लिए डबल इम्यूनोडिफ़्यूजन विधि, जो एक साथ उच्च गुणवत्ता वाले और मात्रात्मक चरित्र (इम्यूनोडिफ़्यूजन, इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरिसिस को देखते हैं )।

एक डबल इम्यूनोडिफ्यूजन बनाने के लिए एक गिलास प्लेट पर एक पिघला हुआ जेल की एक परत डाली और, ठोसकरण के बाद, 1.5-3 मिमी व्यास वाले छेद काट दिए जाते हैं। एक सर्कल में स्थित हथियारों में, अध्ययन के तहत एंटीजनों को रखा जाता है, और एक केंद्रीय कुएं में - ज्ञात विशिष्टता के प्रतिरक्षा सीरम में। एक दूसरे के प्रति विसरित, homologous serums और antigens एक precipitate बनाते हैं। रेडियल इम्यूनोडिफल्यूजन के साथ (मैनसिनी विधि के अनुसार), इम्यून सीरम को अग्रर में पेश किया गया है। कुएं में एक एंटीजन agar के माध्यम से फैलता है, और छेद के चारों ओर प्रतिरक्षा सीरम के साथ वर्षा के परिणामस्वरूप, अपारदर्शी छल्ले बनते हैं, ith का बाहरी व्यास एंटीजन एकाग्रता के आनुपातिक है। आईजीएम और आईजीजी एंटीबॉडी (इम्यूनोग्लोबुलिन देखें) को पहचानने के लिए इन्फ्लूएंजा के निदान में इस प्रतिक्रिया का संशोधन का उपयोग किया जाता है। एक पकड़ एंटीजन agar, और सीरम कुओं में पेश किया जाता है। प्लेटों को तब आईजीएम- या आईजीजी एंटीबॉडी के खिलाफ प्रतिरक्षा सीरम के साथ इलाज किया जाता है, जो एंटीजन के साथ संबंधित एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया की पहचान करने में मदद करता है। विधि आपको एक साथ एंटीबॉडी के शीर्षकों को निर्धारित करने की अनुमति देती है और उन्हें इम्यूनोग्लोबुलिन के एक विशिष्ट वर्ग में संबद्ध करती है।

Immunoelectrophoresis की एक किस्म रेडियोमुनुनोफोरोसिस है। इस मामले में, एंटीजनों के इलेक्ट्रोफोरेटिक पृथक्करण को एक नाली में, जेल में एंटीजनों के आंदोलन के समानांतर में नक्काशीदार, पहली बार एंटीजन-परिभाषित एंटीजनों के खिलाफ रेडियोधर्मी आयोडीन प्रतिरक्षा सीरम के साथ लेबल किया गया, और फिर आईजीजी एंटीबॉडी के खिलाफ प्रतिरक्षा सीरम, के -धनियम एक एंटीजन के साथ परिणामी एंटीबॉडी परिसरों को ठीक करता है। सभी असंबंधित अभिकर्मकों को धोया जाता है, और एंटीजन कॉम्प्लेक्स - एंटीबॉडी को ऑटोरैडियोग्राफी विधि (देखें) द्वारा पता चला है।

पूरक शामिल प्रतिक्रिया। पूरक (देखें) से जुड़े प्रतिक्रियाएं सीएल (सीएलक्यू) के सबकंपोनेंट की क्षमता और फिर प्रतिरक्षा परिसरों में शामिल होने के लिए पूरक के अन्य घटकों की क्षमता पर आधारित होती हैं।

पूर्ण बाध्यकारी प्रतिक्रिया आपको एंटीजन - एंटीबॉडी के साथ पूरक परिसर के निर्धारण की डिग्री के अनुसार एंटीजन या एंटीबॉडी को शीर्षक देने की अनुमति देती है। इस प्रतिक्रिया में दो चरण होते हैं: परीक्षण सीरम (अध्ययन के तहत प्रणाली) के साथ एंटीजन की बातचीत और मेम्ने एरिथ्रोसाइट्स (सूचक प्रणाली) के साथ हेमोलिटिक सीरम की बातचीत। अध्ययन के तहत सिस्टम में सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, पूरक बंधुआ है, और फिर, संवेदनशील एंटीबॉडी जोड़ने पर, हेमोलिसिस नहीं देखा जाता है (पूरक बाध्यकारी प्रतिक्रिया देखें)। प्रतिक्रिया का व्यापक रूप से आंतों के सिफलिस के सेरोडायग्नोसिस (वासरमैन प्रतिक्रिया देखें) और वायरल संक्रमण (वायरोलॉजिकल स्टडीज देखें) के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

साइटोलिसिस। सेलुलर संरचनाओं के खिलाफ एंटीबॉडी इन संरचनाओं को ले जाने वाली कोशिकाओं को भंग करने के लिए पूरक की भागीदारी के साथ कर सकते हैं। हेमोग्लोबिन की रिहाई की डिग्री और तीव्रता का आकलन करना एरिथ्रोसाइट लीसिस आसान है। लिसेस परमाणु कोशिकाओं का मूल्यांकन मृत कोशिकाओं के प्रतिशत की गणना करके किया जाता है, जो मेथिलिन नीले रंग के साथ चित्रित नहीं होते हैं। अक्सर रेडियोधर्मी क्रोम, टू-आरई प्री-रासायनिक रूप से कोशिकाओं से जुड़े होते हैं। नष्ट कोशिकाओं की संख्या अनबाउंड क्रोमियम की मात्रा द्वारा निर्धारित की जाती है, कोशिका lysis द्वारा मुक्त।

एरिथ्रोसाइट्स के रेडियल हेमोलिसिस की प्रतिक्रिया जेल में बह सकती है। राम के एरिथ्रोसाइट्स का निलंबन एक agarose जेल में रखा गया है, वहाँ पूरक जोड़ते हैं; ग्लास पर जमे हुए परत में, छेद हेमोलिटिक सीरम बनाते हैं और लाते हैं। एंटीबॉडी के रेडियल प्रसार के परिणामस्वरूप कुएं के आसपास एक हेमोलिसिस क्षेत्र बन जाएगा। हेमोलिसिस जोन का त्रिज्या बीज टिटर के लिए सीधे आनुपातिक है। यदि आप किसी भी एंटीजन के एरिथ्रोसाइट्स को शर्मिंदा करते हैं, उदाहरण के लिए, इन्फ्लूएंजा वायरस, रूबेला या टिक-बोर्न एन्सेफलाइटिस के ग्लाइकोप्रोटीन हेमग्लुटिनिन, तो आप इन वायरस को प्रतिरक्षा सीरम के साथ हेमोलिसिस घटना को पुन: उत्पन्न कर सकते हैं। जेल में रेडियल हेमोलिसिस की प्रतिक्रिया का उपयोग वायरल संक्रमण के निदान में किया गया है, क्योंकि सीरम अवरोधकों की असंवेदनशीलता, सीरम अवरोधकों की असंवेदनशीलता, धारावाहिक dilutions का उपयोग किए बिना रक्त सीरम शीर्षक की संभावना।

प्रतिरक्षा चिपकाना। एरिथ्रोसाइट्स, प्लेटलेट्स और अन्य रक्त कोशिकाएं पूरक (सी 3) के तीसरे घटक पर सतह रिसेप्टर्स पर होती हैं। यदि इसे उचित प्रतिरक्षा सीरम और पूरक जोड़ने के लिए एंटीजन (बैक्टीरिया, वायरस इत्यादि) में जोड़ा जाता है, तो एंटीजन बनता है - एक एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स पूरक के सी 3 घटक के साथ लेपित होता है। पूरक के सी 3 घटक के कारण प्लेटलेट के साथ मिश्रण करते समय, एंटीजन कॉम्प्लेक्स कोशिकाओं पर घुड़सवार होता है और उन्हें एग्लूटिनेशन (प्रतिरक्षा छड़ी देखें) का कारण बनता है। इस प्रतिक्रिया का उपयोग एचएलए सिस्टम (प्रत्यारोपण की प्रतिरक्षा को देखते हुए) के एंटीजन को निर्धारित करने के लिए किया जाता है और कई वायरल संक्रमण (टिक-बोर्न एन्सेफलाइटिस, डेंगू बुखार) का अध्ययन करते समय, जो इम्यूनोपैथोल के साथ होते हैं। एंटीबॉडी के साथ एक परिसर में वायरस एंटीजन के खून में प्रक्रियाएं और परिसंचरण।

तटस्थ प्रतिक्रिया मैक्रोमोल्युलर या घुलनशील एंटीजन के कुछ विशिष्ट कार्यों को बेअसर करने के एंटीबॉडी क्षमता पर आधारित है, उदाहरण के लिए, एंजाइम गतिविधि, बैक्टीरिया विषाक्त पदार्थ, वायरस रोग। बैक्टीरियोलॉजी में, इस प्रतिक्रिया का उपयोग एंटी-स्टॉकटोलिन्स, एंटी-सुपरस्टॉपिनेज और एंटीस्टाफिलोलिज़िन का पता लगाने के लिए किया जाता है। विषाक्त पदार्थों के तटस्थता की प्रतिक्रिया का अनुमान बीआईओएल द्वारा किया जा सकता है। प्रभाव, इसलिए, उदाहरण के लिए, टाइट्रेट एंटी-वॉ-वाइंटर और एंटीबोटुलिनिक सीरम (टॉक्सिन - एंटीटॉक्सिन प्रतिक्रिया देखें)। जानवरों द्वारा पेश किए गए एक एंटीसिसवाद के साथ विषैले का मिश्रण उनकी मृत्यु को रोकता है। विभिन्न विकल्प वायरोलॉजी में तटस्थ प्रतिक्रिया प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है। उचित एंटीसेरम के साथ वायरस मिश्रण करते समय और इस मिश्रण, जानवरों या सेल संस्कृतियों में परिचय, वायरस की रोगजनकता को बेअसर कर दिया जाता है।

रासायनिक और भौतिक लेबल का उपयोग करके प्रतिक्रियाएं

1 9 42 में कुन्स (ए एन। कोन्स) द्वारा विकसित इम्यूनोफ्लोरेसेंस सेरोल के लिए उपयोग करना है। सीरम के फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल की गई प्रतिक्रियाएं (इम्यूनोफ्लोरेसेंस देखें)। फ्लोरोक्रोमा के साथ लेबल किए गए सीरम एंटीजन के साथ एंटीजन-एंटीबॉडी बनाती है, एंटीबॉडी फ्लोरोक्रोम की चमक को उत्तेजित करने वाली पराबैंगनी किरणों में एक माइक्रोस्कोप के नीचे एक सुलभ अवलोकन बन जाती है। प्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस की प्रतिक्रिया का उपयोग सेलुलर एंटीजनों का अध्ययन करने, संक्रमित कोशिकाओं में एक वायरस का पता लगाने और स्ट्रोक में बैक्टीरिया और रिकेट्सिस का पता लगाने के लिए किया जाता है। इस प्रकार, रेबीज के निदान के लिए, वायरसिया के संदिग्ध जानवरों के मस्तिष्क के प्रिंटों को लुमेनसेंट विरोधी कैंसर सीरम के साथ माना जाता है। तंत्रिका कोशिकाओं के प्रोटोप्लाज्म में सकारात्मक परिणाम के साथ, उज्ज्वल हरे चकल्स मनाए जाते हैं। नाक की नाक श्लेष्म झिल्ली में वायरस एंटीजन की खोज पर, इन्फ्लूएंजा, पराग्रिपा और एडेनोवायरल संक्रमण का तेजी से निदान की स्थापना की गई थी।

अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस विधि अधिक व्यापक रूप से उपयोग की जाती है, एंटीजन कॉम्प्लेक्स की पहचान के आधार पर एंटीबॉडी आईजीजी एंटीबॉडी के खिलाफ लुमेनसेंट इम्यून सीरम का उपयोग करके एंटीबॉडी और न केवल एंटीजनों का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, बल्कि एंटीबॉडी का शीर्षक भी होता है। इस विधि को सेरोडायग्नोसिस, साइटोमगलिप, लसिस बुखार में हरपीज का उपयोग मिला। प्रयोगशाला में एंटीजन युक्त कोशिकाओं के आर ° -20 डिग्री स्टॉक पर संग्रहीत किया जाना चाहिए, उदाहरण के लिए, पतले ग्लास और संक्रमित वेरो कोशिकाओं या चिकन फाइब्रोब्लास्ट्स के स्लाइस पर उगाया जाना चाहिए, एसीटोन के साथ तय किया गया। तैयारी परीक्षण सीरम द्वारा स्तरित की जाती है, दवा को प्रतिरक्षा परिसरों के गठन के लिए एफ 37 डिग्री पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है, और फिर असंबंधित अभिकर्मकों को लॉन्डर करने के बाद, इन परिसरों को मानव ग्लोबुलिन के खिलाफ लेबल वाले लुमेनसेंट सीरम के साथ प्रकट किया जाता है। आईजीएम या आईजीजी एंटीबॉडी के खिलाफ लेबल प्रतिरक्षा सीरम लगाने के लिए, आप एंटीबॉडी के प्रकार को अलग कर सकते हैं और आईजीएम एंटीबॉडी की उपस्थिति से प्रारंभिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का पता लगा सकते हैं।

एंजाइम में - इम्यूनोलॉजिकल विधि एंटीबॉडी का उपयोग एंजाइम, च के साथ संयुग्मित किया जाता है। एआर। हरेन पेरोक्साइड या क्षारीय फॉस्फेटेस। एंटीजन के साथ लेबल वाले सीरम के कनेक्शन का पता लगाने के लिए, पीले-भूरे रंग (पेरोक्साइडस) या पीले-हरे (फॉस्फेटेस) रंग के धुंधली की उपस्थिति के साथ एक एंजाइम द्वारा एक एंजाइम द्वारा एक सब्सट्रेट को एक सब्सट्रेट जोड़ें। एंजाइमों का भी उपयोग करें, न केवल क्रोमोजेनिक, बल्कि एक चमकदार सब्सट्रेट भी विघटित करें। इस मामले में, सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, एक चमक प्रकट होती है। इम्यूनोफ्लोरेसेंस की तरह, एंजिमम्युनोलॉजिकल विधि का उपयोग कोशिकाओं में एंटीजन या एंटीजन युक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी के शीर्षक का पता लगाने के लिए किया जाता है।

एंजाइम इम्यूनोलॉजिकल विधि की सबसे लोकप्रिय विविधता immunosorption है। ठोस वाहक पर, यह सेलूलोज़, polyacrylamide, dextran और विभिन्न प्लास्टिक, Antigen sorbit हो सकता है। अधिकतर वाहक माइक्रोप्रैनिन छेद की सतह है। एक थकाऊ एंटीजन के साथ कुओं में, परीक्षण सीरम पेश किया जाता है, फिर एंटिसरम और सब्सट्रेट एंजाइम द्वारा लेबल किया जाता है। तरल माध्यम के रंग को बदलकर सकारात्मक परिणामों को ध्यान में रखा जाता है। वाहक पर एंटीजन का पता लगाने के लिए, एंटीबॉडी को थकाया जाता है, फिर अध्ययन के तहत सामग्री को छेद में लाया जाता है और एंजाइम एंटीमिक्राबियल सीरम की प्रतिक्रिया दिखायी जाती है।

रेडियोम्युनोलॉजिकल विधि एंटीजन या एंटीबॉडी के रेडियोसोटोप टैग के उपयोग पर आधारित है। यह मूल रूप से रक्त में प्रसारित हार्मोन के स्तर को मापने की एक विशिष्ट विधि के रूप में विकसित किया गया था। परीक्षण प्रणाली एक हार्मोन लेबल वाला हार्मोन (एंटीजन) और एंटी-वोटिंग थी। यदि आप इस तरह के एंटीसेम में वांछित हार्मोन युक्त सामग्री जोड़ते हैं, तो यह एंटीबॉडी के हिस्से को जोड़ देगा, एंटीबॉडी के साथ एक लेबल वाले टिट हार्मोन हार्मोन के बाद के परिचय के साथ, इसकी संख्या नियंत्रण की तुलना में कम हो गई है। परिणाम का मूल्यांकन संबंधित और असंबंधित रेडियोधर्मी टैग के घटता की तुलना करने के लिए किया जाता है। इस प्रकार की विधि को प्रतिस्पर्धी प्रतिक्रिया कहा जाता है। रेडियोमोनोलॉजिकल विधि के अन्य संशोधन भी हैं। रेडियोमामुनोलॉजिकल विधि - एंटीजन और एंटीबॉडी निर्धारित करने के लिए सबसे संवेदनशील विधि हार्मोन निर्धारित करने के लिए उपयोग की जाती है, औषधीय पदार्थ और एंटीबायोटिक्स, जीवाणु, वायरल, रिकेटर, प्रोटोजोअल रोग, रक्त प्रोटीन, ऊतक एंटीजन के निदान के लिए।

चिकित्सा अभ्यास में सीरोलॉजिकल रिसर्च विधियों की तुलनात्मक विशेषताओं और उपयोग

तरीके एस और। संवेदनशीलता और उपयोग की सार्वभौमिकता में सुधार की दिशा में लगातार सुधार हुआ। प्रारंभ में सेरोल। निदान एंटीबॉडी का पता लगाने पर आधारित था। 20 वीं शताब्दी के मध्य में उपस्थिति के साथ। इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रियाएं और निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन, जिसमें अधिक संवेदनशीलता है, न केवल एंटीबॉडी का पता लगाने का अवसर है, बल्कि रोगियों से सामग्री में सीधे एंटीजन भी है। एंजाइम-इम्यूनोलॉजिकल और रेडियोमोनोलॉजिकल विधियों, प्रति संवेदनशीलता 2-3, इम्यूनोफ्लोरेसेंस और निष्क्रिय हेमग्लूटिनेशन से अधिक की प्रक्रिया, बायोल विधियों के पास आ रही है। बैक्टीरिया और वायरस का पता लगाना। एंटीजन और एंटीबॉडी दोनों का पता लगाने के लिए उनके उपयोग का दायरा सैद्धांतिक रूप से सीमित नहीं है।

Serodiagnosis inf। बीमारियां समर्पित या कथित रोगजनक को एंटीबॉडी की उपस्थिति पर आधारित होती हैं, भले ही रोगजनक का पता चला था या नहीं तीव्र अवस्था रोग। बीमारी की शुरुआत में और 2-3 सप्ताह में ली गई रक्त सीरम के जोड़े का अन्वेषण करें। बाद में। दूसरे सीरम में एंटीबॉडी की वृद्धि पहले की तुलना में 4 गुना से कम नहीं होती है। यह भी महत्वपूर्ण है, जो इम्यूनोग्लोबुलिन की कक्षा एंटीबॉडी है। आईजीएम एंटीबॉडी रोग की तीव्र अवधि के अंत में और पुनर्मूल्यांकन के शुरुआती चरण में पाए जाते हैं। आईजीजी एंटीबॉडी पुनर्नवीनीकरण की बाद की अवधि में दिखाई देते हैं और लंबे समय तक प्रसारित करते हैं। यदि गर्भावस्था के पहले त्रैमासिक में एक महिला रूबेला वायरस को आईजीएम एंटीबॉडी का पता लगाती है, तो यह गर्भावस्था में बाधा डालने के आधार के रूप में कार्य करता है, क्योंकि इस अवधि के दौरान, फल \u200b\u200bविशेष रूप से वायरस के प्रति संवेदनशील होता है। विभिन्न inf के साथ। रोगों का चयन सबसे विशिष्ट और सुविधाजनक तरीकों का उपयोग करता है।

रेत। महामारी विज्ञान में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। व्यवस्थित संग्रह और रक्त के नमूने का अध्ययन विभिन्न समूह जनसंख्या हमें रोगजनकों के स्रोत के साथ आबादी के संपर्कों को समझने की अनुमति देती है। रोग। सामूहिक प्रतिरक्षा के स्तर का अध्ययन करने से आप बढ़ते जोखिम समूहों की पहचान करने और टीकाकरण गतिविधियों की योजना बनाने, संक्रमण के भौगोलिक वितरण का अध्ययन करने की अनुमति देता है। रेत। आबादी के विभिन्न आयु वर्गों ने अनुमति दी है, उदाहरण के लिए, कुछ समय के दौरान इन्फ्लूएंजा वायरस के विभिन्न प्रकारों के परिसंचरण को पूर्वदर्शी रूप से प्रकट करते हैं।

रेत। वंशानुगत बीमारियों (देखें) और ऑटोम्यून्यून रोगों के अध्ययन में वे बहुत महत्व रखते हैं और ऊतक और कार्बोफिक एंटीबॉडी की उपस्थिति के साथ, जो इसी लक्ष्य कोशिकाओं के साथ-साथ ट्यूमर एंटीजन का पता लगाने के लिए ऑन्कोलॉजी में भी नष्ट हो जाते हैं। इस प्रकार, यकृत कैंसर की इम्यूनोडिग्नोसिस इम्यूनोडिफल्यूजन और रेडियोमोनोलॉजिकल विधि का उपयोग करके अल्फा-फेटोप्रोटीन और अन्य भ्रूण एंटीजन वाले मरीजों के निर्धारण पर आधारित है।

सेलुलर एंटीजन के ठीक एंटीजनिक \u200b\u200bसंरचना के अध्ययन में विज्ञान की महत्वपूर्ण प्रगति, सिरोल के उपयोग के कारण बैक्टीरिया और वायरस की एंटीजन हासिल की जाती है। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की प्रतिक्रियाएं, जो व्यक्तिगत एंटीजन निर्धारकों के लिए प्राप्त की जा सकती हैं।

ग्रंथसूची: इम्यूनोलॉजी, एड में अनुसंधान के तरीके। I. Lefkovits और Bernis, लेन। अंग्रेजी से, एम।, 1 9 81; इम्यूनोलॉजी, एड के लिए गाइड। ओ ई विजिअलोव और श्री एक्स। खूहझेव, एम।, 1 9 73; क्लिनिकल के लिए गाइड प्रयोगशाला निदान, ईडी। वी वी। मेन्सिकोवा, एम।, 1 9 82; इम्यूनोलॉजी, एड। जे- एफ द्वारा बाच, एन वाई, 1 9 78।

एस। हा। गाइडमोविच।

 


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फ़ीड-छवि। आरएसएस।