Nel Medioevo furono fatti ripetuti tentativi di trasfondere il sangue dagli animali all'uomo e da uomo a uomo. Tuttavia, quasi tutti sono finiti tragicamente. La prima trasfusione riuscita di sangue umano alla vittima fu fatta nel 1667 dal dottor Denis. Le cause delle gravi complicazioni derivanti dalle trasfusioni di sangue furono stabilite per la prima volta nel 1901 da Karl Landsteiner. Ha mescolato gocce di sangue di varie persone e ha scoperto che in alcuni casi si verifica l'adesione degli eritrociti - agglutinazione e conseguente emolisi. Sulla base dei suoi esperimenti, Landsteiner ha concluso che ci sono proteine ​​agglutinogene negli eritrociti che contribuiscono al loro incollaggio. Ha identificato 2 agglutinogeni A e B. In base alla loro assenza o presenza nei globuli rossi, ha suddiviso il sangue in gruppi I, II e III. Nel 1903, il suo allievo Adriano Sturli scoprì il gruppo sanguigno IV. Successivamente, nel plasma sanguigno sono state trovate proteine ​​che interagiscono con gli agglutinogeni e causano l'adesione dei globuli rossi. Si chiamavano agglutinine a e b. È ora stabilito che la glicoproteina della membrana eritrocitaria, la glicoforina, ha proprietà antigeniche. Le agglutinine sono immunoglobuline M e G, ad es. g-globuline. Agglutinogeno A e agglutinina a, così come agglutinogeno B e agglutinina b sono chiamati uguali. Quando interagiscono, si verifica l'incollatura dell'eritrocito. Pertanto, solo agglutinogeni e agglutinine dissimili sono presenti nel sangue umano. Nel sangue delle agglutinine neonate n. Tuttavia, i componenti alimentari, sostanze prodotte dalla microflora intestinale, contribuiscono alla sintesi di agglutinine che non sono presenti negli eritrociti di una determinata persona.

I gruppi sanguigni del sistema ABO sono indicati con numeri romani e il nome duplicato dell'antigene:

I (0) - non ci sono agglutinogeni negli eritrociti, ma il plasma contiene agglutinine a e b.

II (A) - agglutinogeni A e agglutinine b.

III (B) - agglutinogeni B e agglutinine a.

IV (AB) - negli agglutinogeni degli eritrociti A e B, le agglutinine plasmatiche sono assenti.

Allo stato attuale, è stato trovato che c'è un debole antigene H negli eritrociti del gruppo I. Agglutinogeni A sono suddivisi in sottotipi A1 e A2. Il primo sottotipo si trova nell'80% delle persone e ha proprietà antigeniche più pronunciate. Non si verificano reazioni trasfusionali tra il sangue di questi sottogruppi.

L'ereditarietà del gruppo sanguigno viene effettuata dai geni A, B e O. Nei cromosomi umani ce ne sono 2. I geni A e B sono dominanti. Pertanto, per i genitori con gruppi sanguigni II e III, il bambino può avere uno qualsiasi dei 4 gruppi.

3.OA + OB = VO

Nel 1940, K. Landsteiner e I. Wiener scoprirono un altro agglutinogeno negli eritrociti. È stato trovato per la prima volta nel sangue delle scimmie Rhesus. Pertanto, sono stati chiamati fattore Rh.

Attualmente è consentita solo la trasfusione di sangue con un solo gruppo attraverso il sistema ABO. Per determinare l'affiliazione di gruppo, una goccia di sangue del test viene miscelata su una diapositiva con una goccia di sieri standard dei gruppi I, II e III. Questo metodo determina le proprietà antigeniche dei globuli rossi. Se non si è verificata agglutinazione in nessuno dei sieri, quindi non ci sono agglutinogeni negli eritrociti. Questo è il sangue del primo gruppo. Quando si osserva agglutinazione con sieri dei gruppi I e III, allora gli eritrociti del sangue del test contengono agglutinogeno A. Cioè, Questo è il sangue del gruppo II. L'agglutinazione di eritrociti con sieri dei gruppi I e II indica che contengono agglutinogeno B e questo sangue del gruppo III. Se c'è agglutinazione in tutti i sieri, allora gli eritrociti contengono entrambi gli antigeni A e B. Ie gruppo di sangue IV. È consigliabile condurre uno studio con il gruppo di siero IV. Più precisamente, il gruppo sanguigno può essere determinato utilizzando globuli rossi standard dei gruppi I, II, III e IV. Per fare questo, vengono mescolati con il siero del sangue del test e determinano il contenuto di agglutinine in esso. L'affiliazione del sangue Rhesus viene determinata mescolandola con siero contenente agglutinine rhesus.

Inoltre, per evitare errori nel determinare il gruppo sanguigno e

la presenza di antigene D, applicare un test diretto. È anche necessario rilevare l'incompatibilità del sangue a causa di altri segni antigenici. Un test diretto viene effettuato mescolando gli eritrociti del donatore con il siero del ricevente a 37 ° C. Con risultati negativi, le prime porzioni del sangue vengono versate in modo frazionario.

Algoritmo di azioni nel determinare il gruppo sanguigno e il fattore Rh
quando una donna entra in un ospedale per maternità

Rilevazione del gruppo sanguigno del sistema AB0 con anticorpi monoclonali

preparare:

• vetro secco (tipo a piastra) per la determinazione del gruppo sanguigno;
• cicloni anti-A ( colore rosa) e anti-B (blu);
• due pipette per raccogliere i cicloni dalle fiale;
• due bastoncini di vetro per miscelare il sangue del paziente con i cicloni;
• una siringa monouso (5-10 ml) con un ago per prelevare il sangue dalla vena del paziente;
• in un vassoio sterile mettere 3 palline inumidite con alcool, 2-3 salviettine sterili;
• elastico per la puntura endovenosa;
• provetta per centrifuga a secco, sulla quale il rivelatore di vetro indica chiaramente il nome del paziente;
• uno spazio vuoto è un riferimento a un laboratorio in cui un gruppo sanguigno, l'affiliazione RH è rideterminato da un medico di laboratorio, il sigillo è timbrato e firmato

Osservando tutte le regole per le punture endovenose, fare il sangue dalla vena del paziente (almeno 5 ml).

• I policloni anti-A e anti-B vengono applicati alla piastra o alla piastra in una grande goccia (0,1) sotto le apposite iscrizioni: anti-A e anti-B.
• Accanto alle gocce di anticorpi, il sangue del test viene applicato in una piccola goccia (0,01 ml).
• Dopo aver miscelato i reagenti e il sangue con diverse bacchette di vetro per anti-A e anti-B in un rapporto di 1:10, la reazione di agglutinazione viene osservata per 2,5 minuti.
• Leggere i risultati dopo 5 minuti mentre si agitano le gocce. (da 3 a 5 minuti)
• Il risultato è valutato da un medico. La valutazione dei risultati della reazione di agglutinazione con i colliconi anti-A e anti-B è presentata nella tabella, che include anche i risultati della determinazione delle agglutinine sieriche (plasma) dei donatori utilizzando globuli rossi standard.

Al fine di escludere l'autoagglutinazione, che può essere osservata nel sangue del cordone ombelicale dei neonati, nel caso di stabilire il gruppo sanguigno AB (IV), è necessario condurre uno studio di controllo: miscelare una goccia (0,1 ml) di una soluzione isotonica di cloruro di sodio con una piccola goccia (0,01 ml) del test il sangue. La reazione di agglutinazione dovrebbe essere ASSENTE.

A.Compilare con cura tutte le colonne del modulo - riferimento al laboratorio per determinare il gruppo sanguigno e l'affiliazione RH con la firma del medico.

V.  Consegna un referto in bianco e una provetta con il sangue del paziente al laboratorio per un'attenta determinazione del gruppo sanguigno e del paziente.

Determinazione del fattore Rh mediante il reagente monoclonale (Zoliklon anti-D Super)

Una grande goccia di reagente (circa 0,1 ml) viene applicata alla piastra. Una piccola goccia (0,01-0,05 ml) del sangue del test viene posta accanto ad essa e il sangue viene miscelato con il reagente. La reazione di agglutinazione inizia a svilupparsi dopo 10-15 secondi, un'agglutinazione pronunciata si verifica dopo 30-60 secondi. (Rh positivo, nessuna agglutinazione - Rh negativo). I risultati della reazione prendono in considerazione dopo 3 minuti.

Dopo aver miscelato il reagente con sangue, si raccomanda di non scuotere la piastra immediatamente, ma dopo 20-30 secondi, che consente di sviluppare una più completa agglutinazione di petali grandi durante questo periodo.

Determinazione espressa dei gruppi di sangue ABO e Rhesus utilizzando il kit Erythrotest-GruppoCard

Il set di Eritrotest Group Card (Hematologist LLC, Mosca) è progettato per determinare ABO e Rhesus (RhD) di gruppi sanguigni umani in laboratorio e condizioni di campo. La determinazione viene eseguita nella reazione di emoagglutinazione diretta e non richiede alcun reagente ausiliario e attrezzatura. Il kit include:

• eritrotest-Groupcard card;
• una pipetta con un volume di gocce dosato di circa 0,02 ml;
• scarificatore impacchettato sterile;
• bastone per mescolare il sangue con il reagente.

Nei pozzetti della scheda vengono essiccati reagenti monoclonali anti-A, anti-B, anti-AB e anti-D, che si dissolvono immediatamente quando viene aggiunta acqua. Gli anticorpi monoclonali anti-D rilevano in modo specifico l'antigene RhD indipendentemente dal gruppo ABO. Nell'ultimo pozzo c'è il solvente per la produzione di controlli su autoagglutinazione non specifica.

Il corso della determinazione:

La determinazione viene effettuata in sangue nativo con un conservante, nel sangue senza conservante o sangue prelevato da un dito.

• Aprire il pacchetto ed estrarre la carta, senza toccare i fori con la superficie di lavoro. Inserire i dati del paziente, ad eccezione del gruppo sanguigno.
• Una goccia d'acqua (rubinetto o distillata) viene aggiunta a ciascun pozzetto usando una pipetta attaccata al kit. L'acqua viene applicata alla macchia di reagente essiccato. Non lasciare asciugare le gocce.
• Una piccola goccia di sangue di prova viene introdotta in ciascun pozzetto. Il sangue viene applicato accanto a una goccia di reagente, senza toccarlo per evitare la contaminazione di un reagente con un altro. Per prelevare il sangue da un dito, utilizzare uno scarificatore sterile.
• Miscelare accuratamente il sangue con il reagente con l'aiuto della bacchetta inserita nel kit. In ogni pozzetto, la miscelazione viene eseguita solo con un nuovo stick. L'uso di un bastoncino singolo per la miscelazione in diversi pozzetti non è consentito, poiché porta alla contaminazione dei reagenti e ad una errata determinazione del gruppo sanguigno.
• Agitare immediatamente il piatto. Una leggera agglutinazione si verifica in 10-30 secondi, ma il risultato finale dovrebbe essere considerato dopo 3 minuti, perché nel caso di forme deboli di antigene A, la reazione avviene più tardi e gli agglutinati sono più piccoli.
• Il risultato è valutato visivamente (tabella 18.6). Immettere il risultato della reazione con il reagente appropriato (+ o -) nei quadrati sotto ciascun pozzetto.

  Tabella 18.6. I risultati della reazione nel set di "Erythrotest-Grupokart" e il gruppo sanguigno
  Anti-A	Anti-B	Anti-AB	Anti-O	Sangue
  -	-	-	-	0 (I) Rh - neg.
  -	-	-	+	0 (I) Rh - pos.
  +	-	+	-	A (II) Rh - neg.
  +	-	+	+	A (II) Rh - pos.
  -	+	+	-	In (III) Rh - neg.
  -	+	+	+	In (III) Rh - pos.
  +	+	+	-	AB (IV) Rh - Neg.
  +	+	+	+	AB (IV) Rh - pos.

• Inserisci il gruppo sanguigno. La conclusione sul gruppo sanguigno può essere fatta solo in caso di assenza di reazione nel controllo (ultimo pozzetto).
• Taglia la linea con il buco con il sangue e salva la carta.

La durata di conservazione del set Eritrotest GroupCard è di 2 anni ad una temperatura di 2-8 ° C. Lo stoccaggio è consentito per 1 anno senza frigorifero se la temperatura non supera i 25 ° C. Non è consentito l'immagazzinamento e l'uso di pacchi non sigillati o danneggiati.