Аналіз на сифіліс є одним з найпоширеніших серед лабораторних досліджень. Широко використовуються аналізи на сифіліс при проведенні профілактичних обстежень. За допомогою мікроскопії виявляється збудник сифілісу -. За допомогою серологічних реакцій підтверджується діагноз сифілісу, встановлюється діагноз прихованого сифілісу, проводиться контроль ефективності лікування, визначається излеченность хворих.

Діагноз сифілісу встановлюється на підставі клінічних даних, виявленні збудників сифілісу в зразках матеріалу і підтвердження діагнозу серологічними методами дослідження. Прояви сифілісу численні і різноманітні, через що хвороба виявляється лікарями різних спеціальностей. Диференціальна діагностика первинного сифілісу проводиться з цілим рядом захворювань.

Мал. 1. На фото первинне прояв сифілісу - твердий шанкр.

Антитіла до бліда трепонема і серологічна діагностика

При зараження сифілісом в організмі хворого утворюються антитіла. Серологічна діагностика допомагає лікареві вивчати динаміку утворення антитіл в організмі хворого на сифіліс в початкових стадіях захворювання, в період лікування і після його закінчення, вирішити питання рецидив захворювання у хворого або повторне зараження (реінфекція), поставити діагноз сифілісу при масових медичних умовах.

Антитіла до бліда трепонема IgM

Першими після зараження починають вироблятися антитіла IgM. Вони починають виявлятися за допомогою серологічних реакцій вже з другого тижня після зараження. На 6 - 9 тижнях захворювання їх кількість стає максимальним. Якщо хворий не лікувався, то антитіла зникають через півроку. Антитіла IgM зникають через 1 - 2 міс. після, через 3 - 6 міс. - після лікування пізнього сифілісу. Якщо реєструється їх зростання, то це служить або говорить про повторному зараженні. Молекули IgM великі і через плаценту до плоду не переходять.

Антитіла до бліда трепонема IgG

Антитіла імуноглобуліни IgG з'являються в кінці першого місяця (на 4-му тижні) від моменту зараження. Їх титр вище, ніж титр IgM. IgG зберігаються після лікування досить тривалий час.

неспецифічні антитіла

Існує безліч серологічних реакцій. Це пояснюється антигенної множинністю блідих трепонем. У сироватці крові хворої людини на різних стадіях сифілісу крім специфічних утворюються ті чи інші неспецифічні антитіла - аглютиніни, комплементсвязивающіе, иммобилизинов, антитіла, що викликають імунну флюоресценцію, преціпітіни і ін. Серологічні реакції з виявлення неспецифічних антитіл мають відносну специфічність тому, щоб уникнути діагностичних помилок, слід користуватися не одним, а комплексом серологічних реакцій (КСР).

Хибно позитивні аналізи на сифіліс

Відмінною особливістю нетрепонемних тестів є отримання хибнопозитивних реакцій. Антитіла-реагіни, які виробляються в крові людини проти кардіоліпінового антигену, реєструються не тільки при сифілісі, але і при інших захворюваннях: коллагенозах, гепатитах, захворюваннях нирок, тиреотоксикозі, онкозахворюваннях, при інфекційних захворюваннях (лепра, туберкульоз, бруцельоз, малярія, висипний тиф , скарлатина), при вагітності і місячних циклах, при прийомі жирної їжі та алкоголю. Відзначено, що з віком кількість хибнопозитивних реакцій зростає.

Мал. 2. На фото первинний сифіліс у жінок.

Лабораторна діагностика сифілісу з застосуванням серологічних реакцій

Серологічні тести на сифіліс підрозділяються на трепонемні і нетрепонемні.

1. нетрепонемних тести

В якості антигену в цій групі тестів використовується кардіоліпіновий антиген. Ліпідні антигени збудників сифілісу найчисленніші. Вони складають 1/3 сухої маси клітини. За допомогою нетрепонемних тестів виявляються антитіла-реагіни, які виробляються проти кардіоліпінового антигену. У цю групу входить реакція зв'язування комплементу (РСКкард), реакція мікропреципітації (РМП), реакція швидкого визначення реагинов плазми (RPR) і ін. За допомогою нетрепонемних тестів проводиться первинний скринінг на сифіліс (обстеження груп населення), а можливість отримання результатів в кількісному варіанті дозволяє використовувати ці тести з метою контролю ефективності лікування. Позитивні результати нетрепонемних тестів повинні підтверджуватися трепонемная тестами. Відмінною особливістю нетрепонемних тестів є отримання хибнопозитивних реакцій.

2. Трепонемні тести

У трепонемним тестах використовуються антигени трепонемная походження, виділені з культури блідих трепонем. З їх допомогою підтверджуються позитивні результати нетрепонемних тестів. До групи входять: РСКтреп - реакція зв'язування комплементу, РІФ - реакція імунофлюоресценції і її модифікації, РІТ, ІБТ - реакція іммобілізації блідих трепонем, РПГА - реакція пасивної гемаглютинації, ІФА - імуноферментний аналіз.

3. Тести на сифіліс з використанням рекомбінантних антигенів

Антигени для даної групи тестів отримують генно-інженерним шляхом і використовують в реакціях - РПГА та ІФА, в аналізах иммуноблоттинга (ІБ) і Імунохроматографічний аналізі.

Мал. 3. Для діагностики сифілісу використовується комплекс серологічних тестів.

Діагностика сифілісу з застосуванням нетрепонемних тестів

Для виявлення сифілісу використовуються нетрепонемні тести або комплекс серологічних реакцій (КСР). Серологічна діагностика застосуються з 5-го тижня від моменту зараження або з 2-3 тижні після появи. Антитіла виявляються практично у всіх хворих зі свіжим первинним,. Серологічні реакції позитивні у 70 - 80% хворих з, в 50 - 60% випадків у хворих третинним сифілісом.

Серологічні реакції з застосуванням нетрепонемних тестів можуть давати хибнопозитивні результати.

Мал. 4. Забір крові для проведення аналізу на сифіліс.

Реакція зв'язування комплементу (РСК кард, КСК з КА, реакція Вассермана)

Реакція Вассермана (RW, РВ), винайдена А. Вассерманом понад 100 років тому, сьогодні зазнала безліч змін, однак, як данина традиції, зберегла свою назву по теперішній час. Реакція зв'язування комплементу з застосуванням кардіоліпінового антигену призначена не тільки для виявлення антитіл, але і виконується в кількісному варіанті - з різними розведеннями сироватки, що дозволяє використовувати її для контролю ефективності лікування. Низька чутливість і специфічність, отримання хибнопозитивних результатів - негативні сторони даного виду дослідження.

Суть реакції Вассермана полягає в наступному: антигени, які застосовуються при постановці реакції Вассермана, в разі наявності антитіл до збудників сифілісу в крові людини за допомогою компліменту зв'язуються з ними і випадають в осад. Інтенсивність реакції позначають знаком (+). Реакція може бути негативною (-) - відсутність осаду, сумнівною (невеликий осад або +), слабоположительной (++), позитивною (+++) і різко позитивною (++++).

Більш чутливою є видозмінена реакція Вассермана - реакція Колмера. З її допомогою виявляються антитіла в сироватках, де реакція Вассермана дала негативний результат.

При різко позитивних реакціях проводиться кількісне визначення реагинов, для чого використовується сироватка в розведеннях від 1:10 до 1: 320, що дозволяє використовувати даний вид дослідження для контролю ефективності лікування. Наприклад, зниження титру антитіл і подальша їх серонегатівація (отримання негативних результатів), говорить про успішне лікуванні захворювання.

Мал. 5. Аналіз крові на сифіліс - реакція Вассермана.

Мікрореакція преципитации (МРП)

Мікрореакція преципитации застосовується для масових обстежень окремих груп населення, діагностики сифілісу і контролю над ефективністю лікування. Для проведення даного виду дослідження необхідно невеликої кількості досліджуваного матеріалу. В основі микрореакции преципитации лежить імунологічна реакція антиген-антитіло. У разі наявності антитіл в сироватці крові обстежуваного комплекс антиген-антитіло випадає в осад з утворенням пластівців. Реакція проводиться в лунках спеціальної скляної пластини. Оцінюється за інтенсивністю випав осаду і величиною пластівців в (+) як реакція Вассермана. При обстеженні вагітних, донорів та для контролю ефективності лікування не застосовується. VDRL і RPR є різновидами мікрореакцій.

Мал. 6. Вид реакції преципітації в краплі на склі.

Мал. 7. Аналіз крові на сифіліс - реакція мікропреципітації.

Мал. 8. Набір для проведення реакції швидкого визначення реагинов плазми (Тест на сифіліс RPR).

Всі позитивні тести, отримані при проведенні неспецифічних серологічних реакцій, вимагають підтвердження специфічними реакціями - трепонемная тестами.

Діагностика сифілісу з застосуванням трепонемним тестів

При проведенні трепонемним тестів використовуються антигени трепонемная походження. Їх негативною стороною є неможливість використання для контролю ефективності проведеного лікування, отримання позитивних результатів при спірохетозах і невенеричного трепонематозов і отримання хибнопозитивних результатів при онкологічних захворюваннях, лепрі, деякою ендокринної патології. Такі тести, як РПГА, ІФА і РИФ залишаються позитивними багато років після лікування сифілісу, а в деяких випадках і довічно.

ІБТ і РИФ є більш специфічними з усіх серологічних реакцій, що застосовуються для діагностики сифілісу. Вони дозволяють розрізняти хибнопозитивні реакції, виявляти пізні форми сифілісу, що протікають з негативними реакціями. За допомогою ІБТ розпізнаються хибнопозитивні реакції у вагітних, коли необхідно вирішити питання про інфікованість дитини.

Реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ, РІТ)

Суть реакції полягає в тому, що антитіла, що знаходяться в сироватці крові хворого, обездвиживают блідітрепонеми. Негативною вважається реакція при іммобілізації до 20% збудників, слабоположітельная - 21 - 50%, позитивна - 50 - 100%. ІБТ іноді дає псевдопозитивні результати. Тест складний і трудомісткий, однак, є незамінним при проведенні диференціальної діагностики прихованих форм захворювання і хибнопозитивних результатів серологічних реакцій, в тому числі у вагітних. ІБТ дає 100% позитивний результат при вторинному, ранньому і пізньому сифілісі, в 94 - 100% випадків - при інших формах сифілісу.

Реакція імунофлюоресценції (РІФ)

Суть реакції полягає в тому, що блідітрепонеми (антигени), з'єднані з антитілами, міченими флюорохромами, видають в люмінесцентному мікроскопі жовто-зелене свічення. Результат оцінюється знаком (+). За допомогою РІФ виявляються імуноглобуліни класу А. Реакція імунофлюоресценції стає позитивною раніше, ніж реакція Вассермана. Вона завжди позитивна при вторинному і латентному сифілісі, в 95 - 100% випадків позитивна при третинному і вродженому сифілісі. Техніка проведення даного виду дослідження простіше, ніж у ІБТ, але замінити РИФ на РІБТ неможливо, так дана реакція поступається РІБТ по специфічності. РИФ-10 (модифікація РИФ) більш чутлива, РІФ-200 і РІФ-абс більш специфічні.

Мал. 9. Аналіз крові на сифіліс - реакція імунофлюоресценції (РІФ).

Реакція імунної прилипання блідих трепонем (РІПБТ)

Суть реакції полягає в тому, що сенсибілізовані сироваткою хворого блідітрепонеми в присутності комплементу прилипають до поверхні еритроцитів. Отримані комплекси при цетрофугірованіі випадають в осад. Чутливість даного тесту і специфічність близькі до РІФ і РІБТ.

Імуноферментний аналіз на сифіліс (ІФА)

За допомогою ІФА визначаються імуноглобуліни класу М і G. Методика IgM - ІФА може бути використана в якості скринінгового і підтверджуючого тесту. Чутливість ІФА і його специфічність аналогічні РИФ. При сифілісі ІФА дає позитивні результати з третього місяця інфікування і досить довго (іноді все життя) залишається позитивним.

Мал. 10. Імуноферментний аналізатор.

Реакція пасивної (непрямий) гемаглютинації (РПГА)

РПГА заснована на здатності еритроцитів, на яких адсорбовані антигени блідої трепонеми, в присутності сироватки хворого склеиваться (гемагглютинация). РПГА застосовується для діагностики всіх форм сифілісу, в тому числі прихованого. При застосуванні високої якості антигену даний вид серологічної реакції перевищує всі інші тести по специфічності і чутливості.

Мал. 11. РПГА застосовується для діагностики всіх форм сифілісу.

Мал. 12. Аналіз на сифіліс - реакція пасивної (непрямий) гемаглютинації (схема).

Мал. 13. Вид перевернутого парасольки, що займає все дно пробірки, свідчить про позитивну реакцію. У разі, коли еритроцити осідають стовпчиком ( «гудзик») в центрі дна пробірки говорять про негативну реакцію.

Мал. 14. Тест РПГА в лабораторних умовах.

Лабораторна діагностика

Поряд з серологічної діагностикою методика виявлення блідих трепонем (мікробіологічна діагностика) грає важливу роль, особливо в період серонегативного сифілісу, коли ще в крові відсутні антитіла, але вже є перші прояви свіжого первинного сифілісу (твердий шанкр).

Біологічним матеріалом для дослідження служить виділення з поверхні твердих виразок (шанкров), вміст пустульозних сифилидов, мокли і ерозивних папул, пунктати інфікованих лімфатичних вузлів, ліквор і амніотична рідина, для проведення ПЛР - кров.

Найкращою методикою виявлення збудників сифілісу є дослідження біологічного матеріалу в темному полі мікроскопа. Дана методика дозволяє побачити блідітрепонеми в живому стані вивчити її особливості будови і руху, відрізнити патогенні збудники від сапрофітів.

Мал. 15. Аналіз на сифіліс - темнопольная мікроскопія.

Мал. 16. При вивченні сухих мазків використовується забарвлення за Романовським-Гімзою. Блідітрепонеми фарбуються при цьому в рожевий колір, всі інші види спірохет - в фіолетовий.

Виявлення блідих трепонем при мікроскопії в темному полі - абсолютний критерій остаточної діагностики сифілісу.

Мал. 17. Для виявлення бактерій застосовується реакція імунофлюоресценції (РІФ) - трепонемний тест. Специфічний комплекс антиген антитіло при з'єднанні зі специфічною сироваткою, міченої флюорохромом, в світлі люмінесцентного мікроскопа дає світіння бактерій зеленим кольором.

Мал. 18. Збудники сифілісу добре проглядаються в мазках, приготовлених за методикою Левадіті (імпрегнація сріблом). Блідітрепонеми темного кольору на тлі жовтого забарвлення клітин інфікованих тканин.

Мал. 20. На фото колонії блідих трепонем. Отримати культуру бактерій важко. Вони практично не ростуть на штучних поживних середовищах. На середовищах, що містять кінську і кролячу сироватки, колонії з'являються на 3 - 9 добу.

ПЛР на сифіліс

Ефективним і перспективним сьогодні є методика проведення полімеразної ланцюгової реакції. ПЛР на сифіліс дозволяє отримати результат протягом кількох годин, а в зібраному для діагностики матеріалі може бути присутнім хоча б кілька збудників захворювання.

Мал. 21. ПЛР на сифіліс дозволяє виявити ДНК або її фрагменти блідих трепонем.

Чутливість даного методу дослідження залежить від наявності в біологічному матеріалі блідих трепонем і досягає 98,6%. Специфічність даного тесту багато в чому залежить від правильного вибору мішені для ампліфікації при проведенні діагностики і досягає 100%.

Разом з тим, у зв'язку з недостатньо вивченою порівняльної характеристики чутливості і специфічності прямих методів діагностики сифілісу і ПЛР, даний метод обстеження в РФ для діагностики захворювання поки не вирішено.

ПЛР на сифіліс дозволено проводити лише в деяких випадках, як додатковий метод діагностики вродженого сифілісу, нейросифілісу, при ускладненнях проведення діагностики сифілісу з використанням серологічних методів дослідження у ВІЛ-хворих.

Мал. 22. Виявлення ДНК блідої трепонеми із застосуванням ПЛР говорить або про наявність життєздатних бактерій, або про залишки загиблих, але містять здатних до утворення додаткових копій окремих ділянок хромосомної ДНК.

серологічний метод являє собою сукупність реакцій, заснованих на взаємодії антиген-антитіло (Аг-Ат) і спрямованих на виявлення в сироватці крові та інших рідинах організму антитіл до антигенів збудників інфекційних хвороб, або власне мікробних антигенів. Серологічний метод характеризується високою чутливістю і специфічністю. Більшість реакцій цього методу прості в проведенні та облік, доступні широкому колу лабораторій, як правило, безпечні, економічні, піддаються стандартизації. До недоліків серологічного методу можна віднести: 1) непрямий характер результату, коли про етіологію хвороби судять не по виділенню збудника, а з відповіді (імунної) організму на збудник; 2) необхідність парентерального втручання в організм хворого; 3) в більшості випадків пізню постановку діагнозу, що пояснюється природною динамікою гуморального імунної відповіді; 4) можливість прийняти анамнестические Ат (як результат раніше перенесеного захворювання або вакцинації) за Ат до поточної інфекції. При визначенні мікробних антигенів 3-й і 4-й недоліки відсутні, але необхідно враховувати особливості циркуляції антигенів різних мікробів і співвідносити ці особливості з можливістю взяття матеріалу для дослідження.

Етапи серологічного методу:

1) взяття матеріалів для дослідження. У більшості випадків матеріалом є сироватка крові. Її отримують після утворення згустку крові, кров слід забирати в строго асептичних умовах за стандартною методикою,

2) вибір серологічної реакції для даного випадку залежить від мети дослідження, передбачуваного захворювання, фази хвороби, матеріалу для дослідження, чутливості реакції, можливостей конкретної лабораторії. Для виявлення Ат, а також Аг використовують реакції аглютинації ( РА), Пасивної гемаглютинації ( РПГА)), Імунофлюоресценції (РІФ), Гальмування гемаглютинації ( РГГА), преципитации, флоккуляции, Реакцію зв'язування комплементу (РСК) і ін.

3) постановка серологічної реакції,

4) реєстрація серологічної реакції з метою визначення присутності серологічних маркерів інфекції.

Різноманітним серологічним реакціям властиво кілька загальних характеристик:

1) так як будь-які серологічні реакції є реакціями взаємодії Ат і Аг, то у всіх випадках для встановлення присутності Ат в досліджуваному субстраті необхідний набір відомих стандартних корпускулярних або розчинних Аг, званих діагностикумами. У свою чергу, для встановлення присутності Аг потрібен набір імунних діагностичних сироваток,

2) взаємодія Аг і Ат здійснюється тільки в присутності електроліту, в якості якого зазвичай використовують ізотонічний розчин хлориду натрію або буферні суміші, рН системи повинен бути близько 7,

3) для утворення комплексу Аг-Ат потрібен період інкубації при особливих температурних умовах (від +4 ° С до 37 ° С). Освіта специфічного імунного комплексу відбувається швидко; видимого неозброєним оком феномена (аглютинації, лізису і ін.) - повільно, через кілька годин або навіть діб,

4) обидва компонента серологічної реакції (антиген і антитіла) повинні бути присутніми в еквівалентному співвідношенні. Надлишок будь-якого з компонентів блокує утворення комплексу Аг-Ат і сприяє помилково негативних результатів.

Облік серологічних реакцій здійснюють візуально, іноді за допомогою лупи. Суть обліку серологічної реакції зводиться до визначення феномена зв'язування Аг і Ат за освітою комплексу Аг-Ат. Візуально освіту комплексу Аг-Ат супроводжується двома основними феноменами - агглютинацией і преципітацією. Відмінності між ними визначаються особливостями антигенів і антитіл, специфічних до них. У той же час, серед мікробних антигенів присутні і такі, які індукують синтез непреціпітірующіх, освіту комплексу Аг-Ат у даному випадку не супроводжується ні феноменом аглютинації, ні феноменом преципитации, а виявлення факту утворення комплексу Аг-Ат вимагає маркування діагностичного компонента реакції спеціальними позначками , або перекладу діагностичного антигену в інший агрегатний стан.

При оцінці реакції застосовують 3 головні критерії: 1) наявність і інтенсивність реакції (у плюсах і ін.); 2) діагностичний титр, 3) наростання титру Ат в перебіг хвороби в 4 рази і більше. Наявність реакції встановлюють за візуальними феноменам або щодо зв'язування імунохімічного маркера. Для оцінки інтенсивності серологічної реакції використовують принцип 4 "+" (табл.7).

Таблиця 7.

Система оцінки серологічних реакцій по 4 "+" для реакцій аглютинації і преципітації

Для кількісного представлення результатів серологічної реакції застосовують поняття титру антитіл або антигенів. Для визначення тиру Ат (або титру Аг) необхідно поставити серологическую реакцію, приготувавши ряд розведень сироватки крові або іншого матеріалу (растітровать). При приготуванні розведень сироватки крові використовують розчин електроліту (найчастіше изотонической розчин хлориду натрію). Крок розведення (титрування) задається співвідношенням обсягу розчину електроліту і обсягу сироватки крові. Наприклад, при послідовних розведеннях з кроком в 2 рази в 1-й пробірці змішуються рівні об'єми розчину електроліту і сироватки крові, при кроці в 5 разів до 4-м об'ємним частинах розчину електроліту додають 1 обсяг сироватки, при кроці в 10 разів - до 9 обсягами розчину електроліту додають 1 обсяг сироватки крові (табл.8).

Серологічний метод діагностики передбачає застосування 2 напрямків досліджень: серодиагностики (виявлення специфічних антитіл в сироватці крові обстежуваних) і сероідентіфікація (визначення антигенних властивостей виділеного збудника з метою встановлення його виду і типу).

При серодіагностики застосовуються реакції аглютинації, преципітації, лізису, РСК, реакції з використанням мічених антигенів або антитіл. Компонентами цих реакцій є: сироватки крові обстежуваних хворих і стандартні антигенні препарати. Метою досліджень є визначення титрів антитіл до збудників інфекційних захворювань в досліджуваних сироватках.

Виявлення високих титрів специфічних антитіл особливо якщо вони досягають рівня так званих «діагностичних» титрів, підтверджує передбачуваний діагноз. Велике значення надається дослідження парних сироваток, коли одночасно титруються сироватки взяті на самому початку захворювання (3-4ий день) і сироватки, отримані на 7-й - 10-й день захворювання. Діагностичне значення має 4-кратне наростання титрів антитіл.

При сероідентіфікаціі частіше інших використовується реакція аглютинації на склі. Компоненти реакції: вирощена чиста культура збудника захворювання (антиген) і стандартні діагностичні імунні кролячі сироватки (антитіла).

Гідність серологічного методу - простота, доступність, висока чутливість, специфічність, експресному.

недоліки: необхідність дорогих стандартних препаратів і апаратури.

алергологічний метод

Даний метод передбачає виявлення сенсибілізації організму до того чи іншого інфекційного агента, що має велике діагностичне значення. Відомо, що протягом деяких інфекційних захворювань супроводжується формуванням гіперчутливості уповільненої типу. У зв'язку з цим внутрішньошкірне введення таким хворим малих доз алергену викликає відповідну реакцію з боку організму, викликану повторної зустріччю з алергеном. Реакція протікає по сповільненого типу, і на місці введення алергену через 48-72 години з'являється почервоніння, припухлість, іноді - інфільтрат (позитивна реакція). Якщо організм не сенсибилизирован, внутрішньошкірне введення не викличе ніякої реакції з боку організму (негативна реакція). Промисловістю випускаються спеціальні препарати для проведення шкірно-алергічних проб: туберкулін, дізентерін, бруцеллін, тулярином і ін.

Алергологічний метод має особливо велике значення в тих випадках, коли виявлення збудника інфекційного захворювання ускладнене або ж неможливо (наприклад, при лепрі) або коли для цього потрібно багато часу (наприклад, при бруцельозі). Проба з туберкуліном використовується на практиці не тільки з діагностичною метою, але і для визначення термінів ревакцинації дітей вакциною БЦЖ, а також для вивчення колективного протитуберкульозного імунітету.

Переваги алергологічного методу - його простота, достовірність, експресному.

недолік - обмеженість застосування, так як далеко не при всіх інфекційних захворюваннях формується гіперчутливість уповільненого типу.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦІЇ В ДІАГНОСТИЦІ

інфекційних захворювань

В даний час імунологічні методи дослідження широко застосовуються для лабораторної діагностики інфекційних і неінфекційних захворювань.

Реакції взаємодії між антигенами і антитілами називаються серологічними (serum - сироватка, logos - вчення).

Суть всіх серологічних реакцій полягає в специфічному поєднанні антигенів і відповідних їм антитіл з утворенням комплексу. Серологічна реакція можлива, якщо є імунологічне відповідність (гомологичность) - головних компонентів - антигенів і антитіл. В основі імунологічної специфічності лежить структурна компліментарність антигену і антитіла.

Процес взаємодії антигенів і антитіл відбувається у дві фази - специфічну і неспецифічну. Перша фаза розвивається швидко. Вона складається із специфічного з'єднання активного центру антитіла з детермінантності групами відповідного (гомологичного) антигену. Більш повільно розвивається наступна фаза, неспецифічна - це зовнішній прояв реакції антиген-антитіло (випадання пластівців, помутніння середовища і т. Д.)

Серологічні реакції застосовуються з двома цілями:

1) для виявлення антитіл в досліджуваній сироватці за допомогою відомих антигенів (серодиагностика);

2) для встановлення невідомого антигена за допомогою відомих сироваток (сероідентіфікація).

Визначення невідомого антигена при мікробіологічних дослідженнях проводиться з метою встановлення родової, видовий, типовий приналежності збудників, виділених у обстежуваного. У таких випадках з двох основних компонентів реакції (антитіло, антиген) невідомим є антиген, реакція повинна проводитися з свідомо відомими антитілами. При цьому антигеном є чиста культура виділених з досліджуваного матеріалу мікроорганізмів. Як свідомо відомих антитіл застосовуються імунні діагностичні сироватки. Останні отримують з крові тварин (найчастіше кроликів), попередньо імунізованих відповідними бактеріальними антигенами. Імунні сироватки повинні містити високий рівень специфічних антитіл.

Крім цього, серологічні реакції можуть використовуватися для визначення різних небактеріальних антигенів: для встановлення груп крові, тканинних антигенів, пухлин, для підбору пар донор - реципієнт при трансплантації органів і тканин і т. Д.

Серологічні реакції можуть застосовуватися і для виявлення антитіл в сироватці крові. У таких випадках потрібно свідомо відомий антиген (диагностикум). Як антигени можуть бути використані суспензії живих або убитих мікробів, екстракти або ізольовані хімічні фракції з них.

Численні серологічні реакції, що застосовуються в даний час в практиці охорони здоров'я, розрізняються по феномену, виявляє зв'язок антигену і антитіла. Видимий прояв реакції буде різним у залежності від того, яка методика використовується, в якому фізичному стані застосовується антиген або імунна сироватка, чи бере участь в реакції фермент. Наприклад, якщо використовується корпускулярний антиген, має місце феномен аглютинації - склеювання частинок (реакція аглютинації). Оскільки корпускулярні антигени складаються з частинок відносно великого розміру, випадає видимий пластівчастий осад. Якщо ж в реакції застосовується розчинний антиген, спостерігається випадання дрібно зернистого осаду - преципитата (реакція преципітації). У разі, якщо в реакцію взаємодії бактеріальних антигенів і імунної сироватки вводиться і комплемент, відбувається бактеріоліз (розчиненні бактеріальних антигенів) або лізис еритроцитів (коли вони використовуються в якості антигену). Застосування в серологічних реакціях імунних сироваток, мічених флюорохромами, ферментами або радіоізотопами, дозволяє встановити специфічне зв'язування антигенів з антитілами за відповідним феномену (світіння, зміна кольору або активності радіоізотопної мітки).

Для оцінки серологічних реакцій застосовуються такі критерії, як специфічність і чутливість. Специфічність - це здатність антигенів реагувати тільки з гомологічними антитілами. Чутливість - здатність до специфічного взаємодії при мінімальних кількостях антигенів і антитіл.

реакція аглютинації

Реакція аглютинації (РА) - специфічне взаємодія антигенів з антитілами, що виражається в склеюванні антигенів під впливом антитіл сироватки і випаданні їх в осад у присутності електроліту. Була першою із запропонованих серологічних реакцій.

Особливість реакції аглютинації полягає в тому, що в якості антигенів при її постановці використовуються клітини або інші корпускулярні частинки. Реакція заснована на здатності корпускулярних антигенів специфічно з'єднуватися, з гомологічними антитілами імунних сироваток з утворенням осаду у вигляді зерен, пластівців, грудочок. Реакція проходить тільки в присутності електролітів. Антигени, що застосовуються в реакції, називаються агглютиногенами, антитіла - аглютиніни, а що утворюється осад - агглютінати.

В якості антигену в реакції аглютинації можна застосовувати суспензію живих культур в фізіологічному розчині хлориду натрію або мікроби, убиті формаліном, спиртом або прогріванням, а також еритроцити, лейкоцити або інші клітини.

Джерелом антитіл служить відома агглютинируют сироватка, отримана шляхом імунізації тварин відповідними антигенами, або сироватка обстежуваного хворого.

Існують різні способи постановки реакції аглютинації. З них найбільш часто застосовуються: орієнтовна реакція на склі, розгорнута аглютинація в пробірках, реакції гемаглютинації і непрямої гемаглютинації (РНГА).

Схожа інформація.

Серологічні дослідження (тести) - лабораторні методи досліджень, засновані на виявленні антитіл або антигенів в біологічному матеріалі пацієнта. Найчастіше для аналізу використовується кров, рідше - сеча, слина, гнійні виділення або зразки тканин, взяті в ході біопсії.

Галузь застосування

• Визначення групи крові.
• Виявлення специфічних пухлинних білків - онкомаркерів (наприклад, при підозрах на рак яєчників, передміхурової залози, сечового міхура, шлунка та ін.).
• Діагностика вірусних, бактеріальних, грибкових, протозойних інфекцій (ВІЛ, сифілісу, токсоплазмозу, хламідіозу, краснухи, герпесу, гельмінтозів, кліщового енцефаліту і т. Д.).
• Визначення гормонів, ферментів і лікарських препаратів, що містяться в досліджуваному біоматеріалу в мінорних концентраціях (менше 10-10 г / л).

Суть методу серологічні тести

Серологічні тести відрізняються по техніці постановки, проте всі вони є результатом взаємодії антигенів (чужорідних сполук) з відповідними антитілами. Дослідження складається з двох послідовних фаз. Перша фаза характеризується взаємодією між антигенами і антитілами з утворенням імунних комплексів (позитивна реакція). У другій фазі з'являються зовнішні ознаки, що підтверджують наявність цих самих комплексів (в залежності від типу реакції це можуть бути помутніння випробуваного розчину, зміна його кольору, випадання пластівців і т. Д.). Відсутність видимих \u200b\u200bфізичних явищ розцінюється як негативний результат тесту.

Підготовка до серологічним дослідженням

Залежить від виду дослідження. Про особливості здачі конкретного аналізу повинен розповісти медичний фахівець при записі на процедуру.

Здати необхідний серологічний тест ви можете в клініці «Спектра». Ми замовляємо проведення аналізів в кращих столичних лабораторіях, які працюють за європейськими стандартами, що є гарантією отримання швидких і достовірних результатів. Наші лікарі допоможуть розшифрувати висновок і дадуть рекомендації щодо подальшої діагностики.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ДОСЛІДЖЕННЯ (Лат. Serum сироватка + грец. Logos вчення) - методи імунології, які вивчають специфічні властивості крові людини або тварин з метою виявлення антигенів або антитіл за допомогою серологічних реакцій.

Початок С. і. покладено в кінці минулого століття, після того як було встановлено, що з'єднання антигену з антитілом (див. Антиген - антитіло реакція) супроводжується рядом доступних візуальному спостереженню феноменів - агглютинацией (див.), преципітацією (див.) або лизисом. З'явилася можливість специфічного розпізнавання антигенів (див.) Або антитіл (див.), Якщо один з цих компонентів відомий.

У 1897 р Ф. Відаль повідомив, що сироватка крові хворих на черевний тиф вибірково агглютинирует черевнотифозні бактерії і тому ця реакція (див. Відаля реакція) може бути застосована для лаб. діагностики черевного тифу. У тому ж році було показано, що фільтрати культур чумних, черевнотифозних і холерних бактерій при з'єднанні з відповідними імунними сироватками утворюють пластівці, або преципитат.

Реакція преципітації виявилася придатною для виявлення будь-яких білкових антигенів. У 1900-1901 рр. К. Ландштейнер знайшов, що в еритроцитах людей є два різних антигену (А і В), а в сироватках крові два агглютинина (а і Р), що сприяло застосуванню реакції гемаглютинації для визначення груп крові (див.).

Реакція аглютинації для визначення групи крові і резус-фактора застосовується в акушерській практиці, при гемотрансфузіях і трансплантації тканин. Антитіла проти резус-фактора (див.) Являють собою неповні антитіла, вони не здатні до прямої реакції з резус-позитивними еритроцитами, тому для їх виявлення використовують реакцію Кумбса (див. Кумбса реакція), засновану на виявленні неповних антитіл за допомогою антіглобуліновой сироваток. До еритроцитів відомої специфічності додають досліджувану сироватку крові, а слідом за цим антіглобуліновой сироватку проти IgG (непряма реакція Кумбса). Fab-фрагменти неповних антитіл досліджуваної сироватки крові приєднуються до еритроцитів, а до вільних Fc-фрагментами цих антитіл приєднуються антитіла проти IgG, і відбувається аглютинація еритроцитів. Для діагностики гемолітичної анемії використовують пряму реакцію Кумбса, В організмі таких хворих еритроцити з'єднуються з тими, які циркулюють в крові антитілами проти резус-фактора. Щоб їх виявити, до еритроцитів, узятим у хворого, додають антитіла проти IgG. Поява аглютинації еритроцитів підтверджує діагноз хвороби.

Реакція гальмування гемаглютинації - РГГА (див. Гемаглютинації) - заснована на феномені запобігання (гальмуванні) імунною сироваткою гемаглютинації еритроцитів вірусами. Феномен вірусної гемаглютинації не є серол. реакцією і відбувається в результаті з'єднання вірусу з рецепторами еритроцитів, однак РГГА є серологическую реакцію, яка використовується для виявлення та титрування противірусних антитіл. РГГА - основний метод серодиагностики грипу, кору, краснухи, епідемічного паротиту, кліщового енцефаліту та інших вірусних інфекцій, збудники яких брало володіють гемагглютінірующімі властивостями.

Реакція пасивної, або непрямий, гемаглютинації, В ній використовують еритроцити або нейтральні синтетичні хчатеріали (напр., Частки латексу), на поверхні яких брало сорбованих антигени (бактеріальні, вірусні, тканинні) або антитіла (див. Бойд реакція). Аглютинація їх відбувається при додаванні відповідних сироваток або антигенів. Еритроцити, сенсибілізовані антигенами, називають антигенними еритроцитарних діагностикумів і використовують для виявлення та титрування антитіл. Еритроцити, сенсибілізовані антитілами, називають иммуноглобулинового еритроцитарних діагностикумами (див.) І використовують для виявлення антигенів:

Реакція пасивної гемаглютинації застосовується для діагностики захворювань, викликаних бактеріями (черевний тиф і паратифи, дизентерія, бруцельоз, чума, холера та ін.), Найпростішими (малярія) і вірусами (грип, аденовірусні інфекції, кліщовий енцефаліт, кримська геморагічна лихоманка і ін.) . Реакція пасивної гемаглютинації по чутливості не поступається методу виділення вірусу при ареновірусних хворобах (див.), Зокрема при лимфоцитарном хоріоменінгіт. Вірусний антиген лимфоцитарного хоріоменінгіту виявляється у вірусоносіїв (будинкових мишей) в реакції пасивної гемаглютинації з суспензиями витягнутих органів, розведеними в десятки тисяч разів. При сальмонельозі в реакції пасивної гемаглютинації визначаються бактерії при концентрації до декількох сотень мікробних тіл в 1 г фекалій, дизентерійні бактерії в харчових продуктах виявляються при вмісті в 1 г матеріалу не менше 500 мікробних тіл.

Реакція пасивної гемаглютинації використовується в діагностиці і профілактиці вірусного гепатиту В. У Радянському Союзі для виявлення HBs-антигену (див. Австралійський антиген) в крові хворих з гострим гепатитом В проводиться диагностикум, що представляє собою еритроцити курей, сенсибілізовані козячим імуноглобуліном проти HBs-антигену. Краплю диагностикума з'єднують з рівним об'ємом сироватки крові обстежуваних людей, і, якщо в ній присутній HBs-антиген, відбувається аглютинація. Реакція здатна вловити до 1,5 нг / мл HBs-антигену. Для виявлення HBs-антитіл використовують еритроцити з сорбованих на них HBs-антигеном, виділеним з крові хворих. Реакцію пасивної гемаглютинації застосовують також для виявлення підвищеної чутливості хворого до лікарських препаратів і гормонів, напр, пеніциліну або інсуліну. В цьому випадку еритроцити 0 групи крові людини сенсибилизируют лікарською речовиною і потім використовують для виявлення до нього агглютінінов в сироватці крові хворого.

Реакцію пасивної гемаглютинації використовують для виявлення гонадотропного гормону в сечі з метою встановлення вагітності (див. Хоріонічний гонадотропін). Для цього стандартна сироватка до цього гормону інкубується з досліджуваної сечею. При подальшому додаванні еритроцитів з сорбованих на них гормоном аглютинація не настає (позитивну відповідь), т. К. Міститься в сечі гормон нейтралізував агглютинирующие антитіла.

Реакції, засновані на феномені преципітації

Їх використовують для визначення найрізноманітніших антигенів і антитіл. Найпростішим прикладом якісної реакції є утворення непрозорої смуги преципітації на кордоні нашарування антигену на антитіло в пробірці. Широко застосовуються різні різновиди реакції преципітації в напіврідких гелях агару або агарози (метод подвійної імунодифузії по Оухтерлоні, метод радіальної імунодифузії, іммуноелектрофорез), к-які носять одночасно якісний і кількісний характер (див. Іммунодіффузія, Іммуноелектрофорез).

Для постановки подвійний иммунодиффузии наливають шар розтопленого гелю на скляну пластинку і після затвердіння вирізують лунки діаметром 1,5-3 мм. В розташовані по колу лунки поміщають досліджувані антигени, а в центральну лунку - імунну сироватку відомої специфічності. Диффундируя назустріч один одному, гомологічні сироватки і антигени утворюють преципітат. При радіальної імунодифузії (за методом Манчіні) імунну сироватку вносять в агар. Антиген, поміщений в лунки, дифундує через агар, і в результаті преципітації з імунною сироваткою навколо лунок утворюються непрозорі кільця, зовнішній діаметр яких брало пропорційний концентрації антигену. Модифікацію цієї реакції використовують в діагностиці грипу для розпізнавання IgM- і IgG-антитіл (див. Імуноглобуліни). У агар вносять грипозний антиген, а в лунки сироватки крові. Потім пластини обробляють імунними сироватками проти IgM- або IgG-антитіл, що сприяє виявленню реакції відповідних антитіл з антигенами. Метод дозволяє одночасно визначати титри антитіл і приналежність їх до певного класу імуноглобулінів.

Різновидом іммуноелектрофореза є радіоіммунофорез. У цьому випадку після електрофоретичного розділення антигенів в канавку, вирізану паралельно руху антигенів в гелі, наливають спочатку мічену радіоактивним йодом імунну сироватку проти визначених антигенів, а потім імунну сироватку проти IgG-антитіл, к-раю преципітує утворилися комплекси антитіла з антигеном. Все Незв'язана реагенти вимивають, а комплекс антиген - антитіло виявляють методом авторадиографии (див.).

Реакції за участю комплементу. Реакції за участю комплементу (див.) Засновані на здатності субкомпоненту комплементу Cl (Clq) і потім інших компонентів комплементу приєднуватися до імунним комплексам.

Реакція зв'язування комплементу дозволяє титрувати антигени або антитіла за ступенем фіксації комплементу комплексом антиген - антитіло. Ця реакція складається з двох фаз: взаємодії антигену з випробуваної сироваткою крові (досліджувана система) і взаємодії гемолітичної сироватки з баранячими еритроцитами (індикаторна система). При позитивній реакції в досліджуваній системі відбувається зв'язування комплементу, і тоді при додаванні сенсибілізованих антитілами еритроцитів не спостерігається гемолізу (див. Реакція зв'язування комплементу). Реакція широко застосовується для серодиагностики вісцеральногосифілісу (див. Вассермана реакція) і вірусних інфекцій (див. Вірусологічні дослідження).

Цитоліз. Антитіла проти клітинних структур можуть за участю комплементу розчиняти клітини, що несуть ці структури. Лизис еритроцитів легко оцінювати за ступенем і інтенсивності звільнення гемоглобіну. Лизис нуклеарні клітин оцінюють шляхом підрахунку відсотка мертвих клітин, к-які не фарбує метиленовим синім. Часто також використовують радіоактивний хром, к-рий попередньо хімічно пов'язують з клітинами. Число зруйнованих клітин визначають за кількістю незв'язаного хрому, що звільняється при лизисе клітин.

Реакція радіального гемолізу еритроцитів може протікати в гелі. Суспензія еритроцитів барана поміщають в агарозному гель, додавши туди комплемент; в застиглому на склі шарі роблять лунки і вносять в них гемолитическую сироватку. Навколо лунок в результаті радіальної дифузії антитіл буде утворюватися зона гемолізу. Радіус зони гемолізу прямо пропорційний титру сироватки. Якщо сорбировать на еритроцитах будь-якої антиген, напр, глікопротеїновий гемаглютинін вірусу грипу, краснухи або кліщового енцефаліту, то можна відтворити феномен гемолізу імунними сироватками до цих вірусів. Реакція радіального гемолізу в гелі знайшла застосування в діагностиці вірусних інфекцій завдяки простоті постановки, нечутливості до сироватковим інгібіторів, можливості титрувати сироватки крові по діаметру зони гемолізу, не вдаючись до серійним разведениям.

Імунне прилипання. Еритроцити, тромбоцити і інші клітини крові мають на поверхні рецептори до третього компоненту комплементу (C3). Якщо до антигену (бактерії, віруси та ін.) Додати відповідну імунну сироватку і комплемент, то утворюється комплекс антиген - антитіло, покритий C3-компонентом комплементу. При змішуванні з тромбоцитами завдяки C3-компоненту комплементу комплекс антиген - антитіло осяде на клітинах і викличе їх аглютинацію (див. Імунне прилипання). Ця реакція застосовується для визначення антигенів системи HLA (див. Імунітет трансплантаційний) і при вивченні ряду вірусних-інфекції (кліщовий енцефаліт, лихоманка денге), к-які супроводжуються іммунопатол. процесами і циркуляцією в крові вірусних антигенів в комплексі з антитілами.

Реакція нейтралізації заснована на здатності антитіл нейтралізувати нек-риє специфічні функції макромолекулярних або розчинних антигенів, напр, активність ферментів, токсини бактерій, хвороботворність вірусів. У бактеріології ця реакція використовується для виявлення Антистрептолізин, антістрептокінази і антістафілолізінов. Реакцію нейтралізації токсинів можна оцінювати по біол. ефекту, так, напр., титрують антістолбнячние і антіботулініческіе сироватки (див. Токсин - антитоксин реакція). Суміш токсину з антисироватки, введена тваринам, запобігає їх загибель. Різні варіанти реакції нейтралізації застосовують в вірусології. При змішуванні вірусів з відповідною антисироваткою і введенні цієї суміші тваринам або в клітинні культури патогенність вірусів нейтралізується.

Реакції з використанням хімічних і фізичних міток

Імунофлюоресценція, розроблена Кунсом (А. Н. Coons) в 1942 р, полягає в використанні для серол. реакцій мічених флюорохромом сироваток (див. Імунофлюоресценція). Мічена флюорохромом сироватка утворює з антигеном комплекс антиген - антитіло, к-рий стає доступним спостереженню під мікроскопом в ультрафіолетових променях, що збуджують світіння флюорохромами. Реакцію прямої імунофлюоресценції використовують для вивчення клітинних антигенів, виявлення вірусу в заражених клітинах і виявлення бактерій і рикетсій в мазках. Так, для діагностики сказу відбитки шматочків мозку тварин, підозрюваних на вірусоносійство, обробляють люминесцирующей антирабічної сироваткою. При позитивному результаті в протоплазмі нервових клітин спостерігаються грудочки яскраво-зеленого кольору. На виявленні антигенів вірусів в клітинах відбитків зі слизової оболонки носа заснована експрес-діагностика грипу, парагрипу та аденовірусної інфекції.

Більш широко застосовується метод непрямої імунофлюоресценції, заснований на виявленні комплексу антиген - антитіло за допомогою люминесцирующей імунної сироватки проти IgG-антитіл і використовуваний для виявлення не тільки антигенів, але і титрування антитіл. Метод знайшов застосування в серодіагностики герпесу, цітомегаліп, лихоманки Ласса. У лабораторії повинен зберігатися при г ° -20 ° запас препаратів антігенсодержащіх клітин, напр, вирощені на шматочках тонкого скла і заражені вірусом клітини VERO або курячі фібробласти, зафіксовані ацетоном. На препарати нашаровуються досліджувану сироватку крові, поміщають препарат в термостат при f 37 ° для утворення імунних комплексів, а потім після відмивання незв'язаних реагентів виявляють ці комплекси міченої люминесцирующей сироваткою проти глобулінів людини. Застосовуючи мічені імунні сироватки проти IgM-або IgG-антитіл, можна диференціювати тип антитіл і виявляти ранній імунну відповідь за наявністю IgM-антитіл.

У ензим - імунологічному методі застосовують антитіла, кон'юговані з ферментами, гл. обр. пероксидазой хрону або лужною фосфатазою. Щоб виявити з'єднання міченої сироватки з антигеном, додають субстрат, що розкладається приєднаним до сироватці ферментом з появою фарбування в жовто-коричневий (пероксидаза) або жовто-зелений (фосфатаза) колір. Використовують також ферменти, які розкладають не тільки хромогенний, але і люмогенний субстрат. В цьому випадку при позитивній реакції з'являється світіння. Подібно імунофлюоресценції, ензіміммунологіческій метод застосовують для виявлення антигенів в клітинах або титрування антитіл на антігенсодержащіх клітинах.

Найбільш популярним різновидом ензим-імунологічного методу є іммуносорбція. На твердому носії, до-рим можуть бути целюлоза, поліакриламід, декстран і різні пластмаси, сорбують антиген. Найчастіше носієм служитьповерхню лунок мікропанелей. В лунки з сорбованих антигеном вносять досліджувану сироватку крові, потім мічену ферментом антисироватки і субстрат. Позитивні результати враховують по зміні кольору рідкого середовища. Для виявлення антигенів на носій сорбують антитіла, потім вносять в лунки досліджуваний матеріал і проявляють реакцію меченной ферментом антимікробної сироваткою.

Радиоиммунологический метод заснований на застосуванні радіоізотопної мітки антигенів або антитіл. Спочатку він був розроблений як специфічний метод вимірювання рівня циркулюючих в крові гормонів. Тест-системою був мічений ізотопом гормон (антиген) і антисироватка до нього. Якщо до такої антисироватки додати матеріал, що містить шуканий гормон, то він зв'яже частина антитіл, при наступному внесенні міченого титрованного гормону з антитілами зв'яжеться зменшене в порівнянні з контролем його кількість. Результат оцінюють в порівнянні кривих пов'язаної і незв'язаної радіоактивності. Цей різновид методу носить назву конкурентної реакції. Існують і інші модифікації радиоиммунологического методу. Радиоиммунологический метод - найбільш чутливий метод визначення антигенів і антитіл, що використовується для визначення гормонів, лікарських речовин і антибіотиків, для діагностики бактеріальних, вірусних, риккетсіозних, протозойних захворювань, дослідження білків крові, тканинних антигенів.

Порівняльна характеристика та використання методів серологічних досліджень в медичній практиці

Методи С. і. безперервно удосконалюються в напрямі підвищення чутливості і універсальності використання. Спочатку серол. діагностика грунтувалася на виявленні антитіл. З появою в середині 20 ст. реакцій імунофлюоресценції і пасивної гемаглютинації, що володіють більшою чутливістю, з'явилася можливість виявляти не лише антитіла, а й антиген безпосередньо в матеріалі від хворих. Ензим-імунологічний і радіоімунологічний методи, по чутливості на 2-3 порядки перевищують імунофлюоресценція і пасивну гемаглютинацію, наближаються до методів біол. виявлення бактерій і вірусів. Область їх застосування для виявлення як антигенів, так і антитіл теоретично не обмежена.

Серодиагностика інф. хвороб базується на появі антитіл до виділеного або передбачуваного збудника незалежно від того, чи був виявлений збудник в гострій стадії хвороби. Досліджують пари сироваток крові, взятих на початку хвороби і 2-3 тижнів. по тому. Приріст антитіл у другій сироватці крові не менше ніж в 4 рази в порівнянні з першою є діагностично значущим. Має також значення, яким класом імуноглобулінів представлені антитіла. IgM-антитіла виявляють в кінці гострого періоду хвороби і в ранній стадії реконвалесценції. IgG-антитіла з'являються в більш пізні терміни реконвалесценції і циркулюють довго. Якщо у жінки в першому триместрі вагітності виявляють IgM-антитіла до вірусу краснухи, то це є підставою для переривання вагітності, т. К. В цей період плід особливо чутливий до вірусу. При різних інф. хворобах вибірково використовують найбільш специфічні і зручні у виконанні методи.

С. і. широко застосовують в епідеміології. Систематичний збір і дослідження зразків крові різних груп населення дозволяють усвідомити контакти населення з джерелом збудників інф. хвороб. Вивчення рівня колективного імунітету дозволяє виявляти групи підвищеного ризику і планувати прищепні заходи, вивчати географічне поширення інфекцій. С. і. різних вікових груп населення дозволили, напр., ретроспективно виявити циркуляцію різних варіантів вірусу грипу в певні періоди часу.

С. і. мають велике значення у вивченні спадкових хвороб (див.) і аутоімунних хвороб, що супроводжуються появою тканини-і органоспецифічних антитіл, що руйнують відповідні клітини-мішені, а також в онкології для виявлення пухлинних антигенів. Так, іммунодіагностіка раку печінки заснована на визначенні в сироватці крові хворих альфа-фетопротеїну і інших ембріональних антигенів методом иммунодиффузии і радиоиммунологическим методом.

Значний прогрес науки у вивченні тонкої антигенної структури клітинних антигенів, антигенів бактерій і вірусів досягається завдяки застосуванню в серол. реакціях моноклональних антитіл, к-які можна отримувати до окремих детермінант антигену.

Бібліографія: Методи досліджень в імунології, під ред. І. Лефковітса і Б. Перніс, пров. з англ., М., 1981; Керівництво по імунології, під ред. О. Є. В'язова і Ш. X. Ходжаева, М., 1973; Керівництво з клінічної лабораторної діагностики, під ред. В. В. Меньшикова, М., 1982; Immunology, ed. by J.-F. Bach, N. Y., 1978.

С. Я. Гайдамовіч.