biyokimyasal özellikler cinsin çoğunlukla tipik Salmonella. Ayırt edici özellikler şunlardır: S. Typhi'nin fermantasyonu sırasında gaz oluşumunun olmaması, S. Paratyphi A'nın hidrojen sülfür ve dekarboksilat lisin üretememesi.

Epidemiyoloji.Tifo ateşi ve paratifo ateşi antroponozlardır, yani. sadece insanlarda hastalığa neden olur. Enfeksiyon kaynağı, patojeni dışkı, idrar, tükürük ile dış ortama salgılayan hasta veya bakteri taşıyıcısıdır. Bu enfeksiyonların etken maddeleri diğer salmonellalar gibi dış ortamda dirençlidir, toprakta ve suda kalıcıdır. S. Typhi ekilmemiş bir forma dönüşebilir. Üremeleri için uygun ortam, gıda maddeleri(süt, ekşi krema, süzme peynir, kıyma, jöle). Patojen, şu anda önemli bir rol oynayan su ile beslenme ve temas-ev yolları ile bulaşır. Enfeksiyöz doz yaklaşık 1000 hücredir. İnsanların bu enfeksiyonlara karşı doğal duyarlılığı yüksektir.

Patogenez ve klinik tablo. bir kez ince bağırsak, tifo ve paratifoid patojenler mukoza zarını istila ettiğinde

efektör proteinleri ТТСС-1 kullanarak, Peyer yamalarında enfeksiyonun birincil odağını oluşturur. Submukozadaki ozmotik basıncın bağırsak lümeninden daha düşük olduğuna dikkat edilmelidir. Bu, patojenin antifagositik aktivitesini artıran ve submukoza hücreleri tarafından pro-inflamatuar doku aracılarının salınımını baskılayan Vi-antijenin yoğun sentezini destekler. Bunun sonucu, enfeksiyonun ilk aşamalarında inflamatuar diyare gelişiminin olmaması ve makrofajlarda mikropların yoğun çoğalması, Peyer yamalarının iltihaplanmasına ve lenfadenit gelişimine yol açarak mezenterik bariyer fonksiyonunun ihlaline neden olur. Lenf düğümleri ve Salmonella'nın kan dolaşımına nüfuz etmesi, bakteriyemi ile sonuçlanır. Bu, 10-14 gün süren kuluçka döneminin sonuna denk gelir. Tüm ateşli döneme eşlik eden bakteriyemi sırasında, kan akışı ile tifo ve paratifoid ateşin etken maddeleri vücuda yayılır, parankimal organların retiküloendotelyal elemanlarına yerleşir: karaciğer, dalak, akciğerler ve ayrıca kemik iliğinde, makrofajlarda çoğaldıkları yerdir. Kupffer'in karaciğer hücrelerinden Salmonella, içine yayıldıkları safra kanalları yoluyla safra kesesine girer ve burada çoğalırlar. içinde biriken safra kesesi, Salmonella iltihaplanmaya neden olur ve ince bağırsağı safra akışıyla yeniden enfekte eder. Peyer yamalarına Salmonella'nın yeniden sokulması, bunlarda Arthus fenomeni gibi hipererjik inflamasyonun gelişmesine, bunların nekrozuna ve ülserasyonuna yol açar. bağırsak kanaması ve bağırsak duvarının delinmesi. Tifo ateşi ve paratifo ateşinin etken maddelerinin fagositik hücrelerde hayatta kalma ve çoğalma kabiliyeti, ikincisinin fonksiyonel yetersizliği ile bakteri taşıyıcılarının oluşumuna yol açar. Salmonella ayrıca safra kesesinde uzun süre kalabilmekte, uzun süre dışkıyla atılmakta ve çevreyi kontamine etmektedir. Hastalığın 2. haftasının sonunda önce idrarla, ardından anne sütüyle patojen vücuttan atılmaya başlar. İshal, hastalığın 2. haftasının sonunda veya 3. haftasının başında başlar ve bu andan itibaren patojenler dışkıdan ekilir.

ÖZEL MİKROBİYOLOJİ

Normal mikroflorayı inceleme yöntemleri

Normal mikroflorayı incelemek için iki yöntem kullanılır; bakteriyoskopik ve bakteriyolojik.

Bakteriyoskopik yöntem. Çok sayıda farklı mikroorganizma türünün (ağız boşluğu, bağırsaklar, vajina) yaşadığı insan vücudunun biyotopları için büyük bağımsız öneme sahiptir. Mikrofloranın bileşimi hakkında genel bir fikir edinmenizi sağlar (bir formdaki gram / + veya gram / - bakterilerin baskınlığı - koklar, diplokoklar, streptokoklar, basiller, basiller, streptokoklar, fusiform bakteriler, varlığı mantarların vb.) yanı sıra besin ortamında yetiştirilemeyen mikroorganizmaları tanımlamak için. Bakteriyolojik yöntem. Biyotoplar için kullanılır geniş bir yelpazede mikroorganizmalar (ağız boşluğu, bağırsaklar, vajina) bakteriyoskopi verileri dikkate alınarak yapılır.

Bakteriyolojik araştırmanın temel ilkeleri:

a) kalitatif (tür bileşimi) ve kantitatif kullanımı

(farklı türlerin nicel oranı) mikrofloranın değerlendirilmesi; 6) ön zenginleştirme olmadan malzemenin birincil ekimi, çünkü

zenginleştirme, türlerin niceliksel oranlarını ihlal eder; c) çok sayıda farklı besin ortamının kullanılması, seçim

yetiştirme koşulları (aerobik, anaerobik, CO2 atmosferi, vb.). Araştırma için materyal alma yöntemleri:

1. Doğal dışkı elde etmek (tükürük, idrar vb.).

2. Çoğaltma yöntemi; a) agar ortamının yüzeyine baskılar, b) gazlı bez-agar plakalarına baskılar.

3. Nemli bir çubukla yıkama yöntemi.

4. Aspirasyon yöntemi (interdental boşluklardan, dişeti ceplerinden, üst ve orta bölümlerden) solunum sistemi, filtrelerde aspirasyon).

5. Sondaların bağırsağa sokulması.

6. Uygulama yöntemi - belirli bir alanın kağıt veya bez plakaları kullanılarak mikroorganizmaların uzaklaştırılması.

Pneumococcus (Streptococcus pneumoniae) gram pozitif bir mızrak şeklinde diplokoktur, polisakkarit kapsülü vardır. pH 7.6'da (%5 kanlı agar) protein içeren besiyerinde yetiştirilir, a-hemolizli küçük (orta) düzleştirilmiş koloniler oluşturur. Hava CO ile doyurulduğunda daha iyi büyür. K-antijen tipine göre 84 varyantı vardır. Kimyasallara karşı hassas ve fiziksel faktörler, özellikle safra tuzlarına (lizis), optochine, NaCl'ye. Pnömokokların patojenite faktörleri arasında bir kapsül, hiyalüronidaz, nöraminidaz, IgA ekzoproteaz, O-pnömolizin, lökosidin bulunur. Beyaz fareler için patojenik. Pnömokok akut ve kronik hastalıklar solunum yolu (sinüzit, bronşit, pnömoni), menenjit, sepsis, iltihaplı hastalıklar, sürünen kornea ülseri. Malzeme teşhis araştırması pnömokok enfeksiyonu formuna bağlı olarak alın: örneğin, pnömoni ile - balgam, sepsis ile - kan, pürülan bir hastalık ile - irin, orta kulak iltihabı ile - kulak kanalından akıntı vb. Etiyotropik tedaviye başlamadan önce materyalin alınması önemlidir.

Antikorları saptamak için serum incelenir.

Amacıyla laboratuvar teşhisi aşağıdaki yöntemleri uygulayın.

BEN. Ekspres yöntemleri(patolojik materyalde patojenin tespiti):

1. Mikroskobik muayene - smear Gram boyama ile patolojik materyalden. Gram pozitif kapsüler diplokokların tespiti.

2. "Kapsülün şişmesi" reaksiyonunda kapsül antijeninin belirlenmesi (Neifeld'e göre - çok değerlikli anti-kapsül serum varlığında kapsülün boyutunda bir artış olgusu). Sonuncusu, test malzemesinin bulaşmasına uygulanır; Faz kontrast mikroskobu kullanarak muhasebe.

3. Serum veya beyin omurilik sıvısında antijen tespiti (RSK, lateks aglütinasyon, karşı immünoelektroforez). Ekspres yöntemler genellikle gösterge niteliğindedir, çünkü:

a) her zaman pnömokok tespiti etiyolojik rolünü göstermez (genellikle taşıma);

b) Etiyotropik tedavinin başlangıcında patojen tespit edilmez.

II. Kültürel (bakteriyolojik) yöntem:

1. Aşama. Materyal (numune alma anından itibaren en geç 1-2 saat içinde) %5 kanlı agar üzerine aşılanır, 37 °C sıcaklıkta 20-24 saat boyunca bir mum (CO2) ile bir desikatörde yetiştirilir;

2. aşama. a-hemoliz veren seçilmiş şüpheli koloniler, mikroskobik (Gram boyama, kapsül başına), peynir altı suyu suyuna elendi;

Sahne 3. Kültürün saflığını belirleyin (Gram boyama). Tanımlama, morfolojik, serolojik (p. Çok değerlikli anti-kapsül serumu ile cam üzerinde aglutinasyon), kültürel, biyolojik özellikler ile gerçekleştirilir. Sonuncusu, %10 safra suyu (lizis), farelerin intraperitoneal enfeksiyonu (ölüm) içinde optokinli (büyüme yok) bir ortam üzerine ekim yoluyla gerçekleştirilir. Gerekirse (örneğin, pnömoni ile), pnömokokların etiyolojik önemi kanıtlanır (özellikle CFU / ml belirlenir). Antibiyotik duyarlılığı da belirlenir. Kültür yöntemi, erken, doğru, duyarlı olduğu ve yeterli bir etiyotropik tedavi seçmenize izin verdiği için önde gelen tanı yöntemidir.

III. serolojik yöntem: RNIF (oto suşları ile), RSK ve RIGA (referans pnömokok suşları ile) kullanılarak kan serumunda anti-kapsüler antikorların ve dinamiklerinin belirlenmesi. Daha sık kullanılır kronik formlar ah enfeksiyon. Yöntemin uygulanması, sonucun elde edilmesinin sonraki şartları ve hazır teşhis eksikliği ile sınırlıdır.

IV. Biyolojik yöntem: beyaz farelerin test materyali (genellikle balgam) ile intraperitoneal enfeksiyonu. Ölü fareler açılır, yaymalar yapılır, baskılar, kan ve organlar kanlı agar üzerine aşılanır, ardından patojenin tanımlanması yapılır. Yöntem yardımcıdır, zahmetle sınırlıdır, fareler için patojenik olan diğer mikroorganizma türlerinin materyalindeki varlığı, farelerin bazı pnömokok serovarlarına karşı düşük duyarlılığı.

Çoğu durumda pnömokok pnömonisi S. pneumoniae içeren tükürüğün aspirasyonundan sonra gelişir. Sonra pnömokok bakterileri nüfuz etmek alt bölümler solunum sistemi. Koruyucu drenaj mekanizmalarının bozulması - öksürük dürtüsü ve mukosiliyer klirens - esastır. Güçlü inflamatuar sızıntıların oluşumuna, bozulmuş akciğer dokusu homeostazı eşlik eder. En virülan serovar 3'e sahip enfeksiyonlara akciğer parankiminde boşluk oluşumu eşlik edebilir.

Pnömokokların birincil odak noktasından plevral boşluğa ve perikardiyuma nüfuz edebilir veya hematojen olarak yayılabilir ve menenjit, endokardit ve eklem lezyonlarına neden olabilir.

Pnömokokların patojenik faktörleri

ana faktörler pnömokok patojenitesi kapsülü ve C maddesini düşünün.

Pnömokok kapsülü- virülansın ana faktörü. Bakterileri fagositlerin mikrobisidal potansiyelinden ve opsoninlerin etkisinden korur. Kapsüllenmemiş pnömokok türleri pratik olarak avirülenttir, nadiren bulunurlar. Antipnömokok AT havuzunun çoğu AT ila AG kapsülleridir.

C maddesi pnömokok- kolin içeren ve spesifik olarak C-reaktif protein ile etkileşime giren hücre duvarının teikoik asidi. Böyle bir yanıtın sonucu, tamamlayıcı kaskadın aktivasyonu ve akut inflamasyon fazının aracılarının salınmasıdır. Akciğer dokusunda birikimleri, polimorfonükleer fagositlerin göçünü uyarır.

Pnömokoklar (eşanlamlı: Pneumococcus Talamon - Frankel, Streptococcus lanceolatus Pasteur, Micrococcus pneumoniae, Diplococcus pneumoniae Frankel, Streptococcus pneumoniae) insan pnömonisinde salgılanan mızrak şeklinde diplokoklardır. 1881 yılında L. Pasteur tarafından ve bağımsız olarak ABD'de G. M. Sternberg tarafından keşfedilmiştir. Pnömokokların insan pnömonisi ile etiyolojik ilişkisi 1884 yılında Frenkel ve Weichselbaum (A. Frankel, A. Weichselbaum) tarafından kurulmuştur.

İnsan veya hayvan vücudundan izole edilen pnömokoklar, çiftler halinde düzenlenmiş oval veya mızrak şeklinde koklardır; Gram'a göre pozitif boyandı, yaklaşık 1 mikron. Her çift, eozin boyaması [T.J. Mackie, J.E. McCartney] ile saptanabilen kalın bir kapsül ile çevrilidir. Pnömokoklar genellikle yapay kültür ortamında zincirler şeklinde büyürler. Pnömokoktaki zincir genellikle piyojenik streptokoktan daha kısadır. Kültürlerde pnömokoklar daha az mızrak şeklinde ve daha yuvarlak, hareketsiz ve spor oluşturmazlar. Pnömokoktaki kapsül, kan, kan serumu veya asit sıvısının eklendiği besleyici ortam üzerinde büyürken, hayvan ve insan eksüdalarından elde edilen preparatlarda açıkça görülebilir, ancak sıradan besleyici ortamlarda büyürken zayıf bir şekilde görünür. Pnömokoklar aeroblar veya fakültatif anaeroblardır, sıradan anilin boyalarla kolayca boyanır ve eski kültürlerde gram negatif olmalarına rağmen Gram pozitiftir.

Konvansiyonel besin ortamında pnömokokların büyümesi zayıftır, ancak besin ortamına glikoz (%0,1), kan, serum veya asit sıvısı eklendiğinde önemli ölçüde iyileşir. Pnömokoklar %5-10 karbondioksit içeren bir atmosferde iyi gelişirler. Büyüme için optimum sıcaklık 37°, maksimum 42°, minimum 25°'dir. Pnömokoklar, besin ortamının pH'ındaki değişikliklere duyarlıdır; optimum pH 7.8, asitlik limiti 6.5 ve alkalinite 8.3'tür. Pnömokoklar besleyici agar üzerinde büyürler, 1 mm çapında, narin, yarı saydam, birbirleriyle birleşmeyen çiy damlalarına benzeyen küçük koloniler oluştururlar. Özel besleyici ortamdaki pnömokok kolonileri, örneğin kanlı agar (%5) üzerinde, küçük, nemli, şeffaf, kenarları iyi belirlenmiş, a-hemoliz gösteriyor, buna benzer yeşilimsi renksiz bir alanla çevrili görünüyor. yeşil streptokok (Streptococcus viridans) olduğunda gözlenir.

Renkli besin ortamlarında büyürken, pnömokoklar karbonhidratları asit oluşumuyla, ancak gaz oluşumu olmadan fermente eder. İnülinin fermantasyonu, pnömokokların önemli bir özelliğidir (yeşil streptokok, inülini parçalama yeteneğine sahip değildir). Pnömokoklar, safra tuzlarının etkisi altında hızla otoliz olma kabiliyetini gösterir. Safra veya safra tuzları, onu streptokoktan da ayıran pnömokokları çözer.

Pnömokoklar, kinin ve bazı türevlerinin bakterisidal etkisine diğer birçok mikroorganizmadan daha duyarlıdır. Örneğin, optokin (etilhidrokuprein), pnömokokları 1: 500.000 konsantrasyonda ve streptokokları 1: 5000 konsantrasyonda öldürür.

Pnömokoklar, geleneksel besin ortamlarında saklandığında virülansını hızla kaybeder, ancak pnömokok septisemisinden ölen beyaz bir farenin vakumla kurutulmuş dalağında soğukta aylarca kalabilir. Beyaz fareler ve tavşanlar pnömokoklara karşı en duyarlıdır, kobaylar duyarsızdır ve kediler, köpekler, tavuklar ve güvercinler oldukça dirençlidir. Pnömokok gerçek bir toksin üretmez, ancak koyun, kobay ve insan eritrositlerinin yanı sıra hiyalüronidaz, lencasidin ve nekrotizan bir maddeye karşı aktif olan hemolizinler oluşturur. Pnömokokların virülansı, belirtilen toksik oluşumlara değil, karşılık gelen tipteki pnömokoklarda bulunan belirli bir çözünür maddenin varlığına bağlıdır.

Pnömokoklar birkaç antijen içerir. Mikrobiyal hücrenin derinliklerinde, türe özgüllük ile ilişkili bir nükleoprotein bileşeni vardır. Yüzeye daha yakın olan, türe özgü bir polisakkarittir (C-antijen) - tüm pnömokoklarda immünolojik olarak özdeş olan somatik bir antijen. Hemolitik streptokokların M-antijenine benzer tipe özgü bir protein (M-antijen) de mikrobiyal hücrenin yüzeyine yakın bir yerde bulunur. Yüzeysel kapsül tamamen veya kısmen her pnömokok tipine özgü bir polisakkaritten oluşur ve canlı bir mikropun virülansı ile yakından ilişkilidir. Bu antijen - bir polisakkarit hapten veya spesifik çözünür madde (SSS) - tipe özgüdür ve immünolojik pnömokok tiplerini ayırt etmeye hizmet eder.

Her türün ayrı bir antijenik yapısı ve virülansı vardır. Pnömonide salgılanan pnömokoklar, immünolojik reaksiyonlar temelinde tip I, I, III ve IV'e ayrılır. Tip IV pnömokoklar immünolojik olarak heterojendir. Bu tip, ilk üç tipe ait olmayan tüm pnömokokları içerir. Bir zamanlar pnömokok tiplendirmesi, pnömoni seroterapisinin spesifik serum ile etkisinin patojen tipi ile doğru orantılı olması nedeniyle önemliydi.

Pnömokokların mikrobiyolojik teşhisi, yapay besin ortamında pnömokokların mikroskobik incelemesi ve izolasyonundan oluşur. Pnömokok tipi şu şekilde belirlenir: kapsüllerin şişmesi reaksiyonu, cam üzerinde mikroaglutinasyon reaksiyonu (Seibin yöntemi) ve makroskopik aglütinasyonun reaksiyonu. Herhangi bir nedenle beyaz bir fare kullanılamıyorsa, balgam veya diğer patolojik materyal, glikozlu bir kan suyuna aşılanır ve daha sonra aynı immünolojik reaksiyonlarda bir antijen olarak kullanılır.

Pnömokoklar, ağız ve üst solunum yollarının mukoza zarlarında insan ortamından daha sık bulunur. Pnömokoklar bulaşıyor havadaki damlacıklar tarafından... Tip IV pnömokoklar, tip I, II ve III'ten çok daha yaygındır. Son zamanlarda pnömonide pnömokokların tohumlanma oranı keskin bir şekilde azalırken, stafilokokların tohumlanma oranı önemli ölçüde artmıştır. Pnömokokların tohumlanma oranında önemli bir düşüş ve dolayısıyla etiyolojik ajanlar olarak değerlerinde bir azalma ile E. coli, enterokoklar, proteus ve diğer mikroorganizmalar daha büyük miktarlarda salınmaya başladı.

Pnömokoklara karşı kazanılmış bağışıklık, açıkça, bu antijene karşı antikorlar biçimindeki tepki ile direnç arasında açık bir korelasyonun kurulduğu bağışıklama üzerine kapsüler antijen ile ilişkilidir. Ayrıca bkz. Bakteriler.

Streptococcus cinsi şunları içerir: Streptococcus pyogenes (hemolitik) ve Streptococcus pneumoniae (pneumococcus). İlk kez, streptokoklar Billroth (1874), L. Pasteur (1879) tarafından keşfedildi. E. Rosenbach (1884) tarafından incelenmiştir.

Streptococcus pyogenes (hemolitik)

morfoloji... Streptokoklar küresel koklardır. Her kokların çapı ortalama 0,6-1 mikrondur, ancak polimorfizm ile karakterize edilirler: kesinlikle küresel ve oval olan küçük ve büyük koklar vardır. Streptokoklar, bir düzlemde bölünmelerinin sonucu olan bir zincir halinde düzenlenmiştir. Zincirlerin uzunluğu farklıdır. Yoğun bir besin ortamında, zincirler genellikle kısa, sıvı olanlarda - uzun. Streptokoklar hareketsizdir, sporları yoktur (bkz. Şekil 4) Taze izole edilmiş kültürler bazen bir kapsül oluşturur. Ultra ince bölümlerde, altında üç katmanlı bir hücre duvarı ve üç katmanlı bir sitoplazmik membran bulunan bir mikrokapsül görünür. Gram pozitif.

yetiştirme... Streptokoklar fakültatif anaeroblardır. 37 °C sıcaklıkta ve 7.6-7.8 pH değerinde büyürler. Yetiştirilmeleri için en uygun ortam, kan veya kan serumu içeren ortamlardır. Katı besin ortamında, streptokok kolonileri küçük, düz, bulutlu, grimsi renklidir. Kanlı agarda bazı streptokok türleri hemoliz oluşturur. β-hemolitik streptokoklar açık bir hemoliz bölgesi oluşturur, a-hemolitik streptokoklar küçük yeşilimsi bir bölge oluşturur (hemoglobinin methemoglobine geçişinin sonucu). Hemoliz vermeyen streptokoklar vardır.

Streptokoklar, et suyu şeffaf kalırken, parietal ve altta ince taneli tortu oluşumu ile şeker suyunda büyür.

enzimatik özellikler... Streptokoklar sakkarolitik özelliklere sahiptir. Asit oluşturmak için glikoz, laktoz, sukroz, mannitol (her zaman değil) ve maltozu parçalarlar. Proteolitik özellikleri zayıf bir şekilde ifade edilir. Sütü keserler, jelatini sıvılaştırmazlar.

toksin oluşumu... Streptokoklar bir dizi ekzotoksin oluşturur: 1) streptolisinler - eritrositleri yok eder (O-streptolisin kardiyotoksik etkiye sahiptir); 2) lökosidin - lökositleri yok eder (yüksek derecede öldürücü suşlardan oluşur); 3) eritrojenik (kızıl ateş) toksin - kızıl hastalığının klinik tablosunu belirler - zehirlenme, vasküler reaksiyonlar, döküntü, vb. Eritrojenik toksinin sentezi profaj tarafından belirlenir; 4) sitotoksinler - glomerülonefrite neden olma yeteneğine sahiptir.

Streptokoklarda çeşitli antijenler bulunmuştur. Hücrenin sitoplazması, tüm streptokoklar için aynı olan, spesifik bir nükleoprotein yapısına sahip bir antijen içerir. Protein tipi antijenler hücre duvarının yüzeyinde bulunur. Streptokokların hücre duvarında bir polisakkarit grubu antijeni bulundu.

Polisakkarit grubuna özgü antijen fraksiyonunun bileşimine göre, tüm streptokoklar, büyük Latin harfleri A, B, C, D, vb. İle S'ye göre gösterilen gruplara ayrılır. Gruplara ek olarak, streptokoklar serolojik tiplere ayrılır. Arap rakamları ile gösterilir.

A Grubu 70 tip içerir. Bu grup, neden olan çoğu streptokokları içerir. çeşitli hastalıklar insanlarda. B Grubu, esas olarak insanlar için fırsatçı olan streptokokları içerir. C Grubu, insanlar ve hayvanlar için patojenik olan streptokokları içerir. D Grubu, insanlar için patojenik olmayan streptokoklardan oluşur, ancak bu grup, insan ve hayvanların bağırsak yollarının sakinleri olan enterokokları içerir. Diğer organlara girerek, neden olurlar inflamatuar süreçler: kolesistit, piyelit vb. Bu nedenle fırsatçı mikroplar olarak sınıflandırılabilirler.

İzole edilen kültürlerin serolojik gruplardan birine ait olup olmadığı, grup serumları ile çökeltme reaksiyonu kullanılarak belirlenir. Serolojik tipleri belirlemek için, tipe özgü serumlarla bir aglütinasyon reaksiyonu kullanılır.

Streptokoklar çevreye oldukça dirençlidir. 60 ° C sıcaklıkta 30 dakika sonra ölürler.

Kurutulmuş irin ve balgamda aylarca kalırlar. Dezenfektanların olağan konsantrasyonları onları 15-20 dakika içinde yok eder. Enterokoklar çok daha stabildir, dezenfekte edici solüsyonlar onları ancak 50-60 dakika sonra öldürür.

Hayvan duyarlılığı... Patojenik streptokoklara duyarlı sığırlar, atlar, köpekler, kuşlar. Laboratuvar hayvanları arasında tavşanlar ve beyaz fareler hassastır. Bununla birlikte, insanlar için patojenik olan streptokoklar, deney hayvanları için her zaman patojenik değildir.

Enfeksiyon kaynakları... İnsanlar (hastalar ve taşıyıcılar), daha az sıklıkla hayvanlar veya enfekte gıdalar.

İletim yolları... Havadaki ve havadaki toz, bazen yiyecek, temas ve ev içi olasıdır.

Hastalıklar, ekzojen enfeksiyonun yanı sıra endojen olarak da ortaya çıkabilir - şartlı olarak farinks, nazofarenks ve vajinanın mukoza zarlarında yaşayan patojenik streptokoklar aktive edildiğinde. Vücudun direncinde bir azalma (soğuma, açlık, aşırı çalışma vb.) otoenfeksiyonların oluşmasına neden olabilir.

Önceden duyarlılaştırma, streptokok etiyolojisinin önceki bir hastalığının bir sonucu olarak streptokok enfeksiyonlarının patogenezinde büyük önem taşımaktadır.

Streptokoklar kan dolaşımına girdiklerinde zor bir septik sürece neden olurlar.

İnsanlarda hastalıklar daha sıklıkla serolojik grup A'nın β-hemolitik streptokoklarına neden olurlar. Patojenik enzimler üretirler: hiyalüronidaz, fibrinolizin (streptokinaz), deoksiribonükleaz, vb. Ek olarak, streptokokların antifagositik özelliklere sahip bir M-proteini kapsülü vardır.

Streptokoklar, insanlarda hem irin oluşumuyla hem de süpüratif olmayan, klinik sunum ve patogenezde farklılık gösteren çeşitli akut ve kronik enfeksiyonlara neden olur. Süpüratif - balgam, apseler, yara enfeksiyonları, süpüratif olmayan - akut enfeksiyonlarüst solunum yolları, erizipel, kızıl, romatizma vb.

Streptokoklar sıklıkla grip, kızamık, boğmaca ve diğer hastalıklarla ikincil enfeksiyonlara neden olur ve sıklıkla yara enfeksiyonlarını komplike hale getirir.

bağışıklık... Bağışıklık doğası gereği antitoksik ve antibakteriyeldir. Enfeksiyon sonrası antimikrobiyal bağışıklık zayıftır. Bunun nedeni, streptokokların zayıf immünojenikliği ve çapraz bağışıklık sağlamayan çok sayıda serovardır. Ek olarak, streptokok hastalıkları ile vücut alerjiktir, bu da nüks eğilimini açıklar.

profilaksi... Vücudun genel direncini güçlendiren sıhhi ve hijyenik önlemlere indirgenmiştir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

tedavi... Antibiyotikler kullanılır. Daha sık olarak, streptokokların direnç kazanmadığı penisilin ile eritromisin ve tetrasiklin kullanırlar.

Romatizmal kalp hastalığının etiyolojisinde streptokokların değeri... Romatizmal kalp hastalığının patogenezi yeterince çalışılmamıştır. Ancak bir takım gerçekler, bu hastalığın gelişiminde streptokokların rolü lehinde konuşur:

1. Romatizmal kalp hastalığı olan hastalarda boğazdan B- ekilir. hemolitik streptokok.

2. Romatizma genellikle boğaz ağrısı, bademcik iltihabı, farenjit, vücudu hassaslaştırdıktan sonra ortaya çıkar.

3. Hastaların kan serumunda antistreptolizin, antistreptohyaluronidaz - streptokok enzimlerine karşı antikorlar, toksinler bulunur.

4. Streptokokların rolünün dolaylı olarak doğrulanması, penisilin ile başarılı tedavidir.

Son zamanlarda romatizmal kalp hastalığının kronik formlarının ortaya çıkmasında streptokokların L formlarına önem verilmiştir.

Romatizmal kalp hastalığının alevlenmelerinin önlenmesi, streptokok hastalıklarının önlenmesine indirgenir (örneğin, ilkbahar ve sonbaharda, profilaktik bir penisilin uygulaması gerçekleştirilir). Tedavi, antibakteriyel ilaçların kullanımına indirgenir - penisilin.

Kızıl ateş etiyolojisinde streptokokların değeri... GN Gabrichevsky (1902), hemolitik streptokokların kızıl hastalığının etken maddesi olduğunu öne süren ilk kişiydi. Ancak diğer hastalıklarda salgılanan streptokoklar, kızıl hastalığına neden olan ajanlardan farklı olmadığı için bu görüş herkes tarafından paylaşılmadı. Kızıl hastalığına, eritrojenik bir toksin üreten A grubu streptokokların neden olduğu artık tespit edilmiştir.

Hasta olanlar bağışıklık geliştirir - kalıcı, antitoksik. Gerginliği, Dick reaksiyonu - eritrojenik bir toksinin intradermal enjeksiyonu aşamalandırılarak belirlenir. Hasta olmayanlarda, pozitif reaksiyon (kan serumunda antitoksin yokluğu) ile karakterize olan enjeksiyon bölgesi çevresinde hiperemi ve ödem gelişir. İyileşenlerde, içlerinde oluşan antitoksin eritrojenik toksini nötralize ettiği için böyle bir reaksiyon yoktur.

profilaksi... İzolasyon, hastaneye yatış. Temas, zayıflamış çocuklara gama globulin enjekte edilir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

tedavi... Penisilin, tetrasiklin kullanılır. Ağır vakalarda antitoksik serum verilir.

Çalışmanın amacı: streptokokların tanımlanması ve serovarının belirlenmesi.

Araştırma için malzeme

1. Farinksten mukus (bademcik iltihabı, kızıl).

2. Cildin etkilenen bölgesinden kazıma (erizipel, streptoderma).

3. İrin (apse).

4. İdrar (nefrit).

5. Kan (şüpheli sepsis; endokardit).

Temel araştırma yöntemleri

1. Bakteriyolojik.

2. Mikroskobik.

Araştırma ilerlemesi

Araştırmanın ikinci günü

Fincanları fırından çıkarın ve inceleyin. Şüpheli koloniler varsa bazılarından smear yapılır, Gram'a göre boyanır ve mikroskopta incelenir. Yaymada streptokoklar bulunursa, kalan koloninin bir kısmı, saf kültürü izole etmek için serum agar üzerindeki test tüplerine ve test tüplerindeki kan suyuna alt kültürlenir. Günün sonunda, besiyerinden veya agardan alınan 5-6 saatlik bir kültür, Lensfield çökeltme reaksiyonundaki serolojik grubu belirlemek için %0.25 glukozlu Martin broth üzerinde alt kültürlenir. Test tüpleri ve şişeler bir termostata yerleştirilir ve ertesi güne kadar bırakılır.

Araştırmanın üçüncü günü

Mahsuller termostattan çıkarılır, kültürün saflığı slant agarda kontrol edilir, smear yapılır, Gram boyama ve mikroskopta incelenir. Saf bir streptokok kültürü varlığında, Giss besiyeri (laktoz, glikoz, maltoz, sukroz ve manitol), süt, jelatin, %40 safra üzerinde aşılama yapılır ve bir termostata yerleştirilir.

Martin suyuna göz atın. Spesifik büyümenin varlığında, serolojik grubu belirlemek için bir Lensfield çökeltme reaksiyonu gerçekleştirilir.

Lensfield yağış reaksiyonu kurulumu... Martin broth üzerinde yetiştirilen günlük kültür, birkaç santrifüj tüpüne döküldü, 10-15 dakika (3000 rpm) santrifüjlendi.

Süpernatant dezenfektan solüsyonlu bir kavanoza dökülür ve çökelti steril izotonik sodyum klorür solüsyonu ile dökülür ve tekrar santrifüjlenir. Tüm santrifüj tüplerinden toplanan tortuya 0,4 ml %0,2 hidroklorik asit eklenir. Daha sonra test tüpü bir su banyosuna yerleştirilir ve ara sıra sallayarak 15 dakika kaynatılır. Kaynattıktan sonra elde edilen süspansiyon tekrar santrifüjlenir. Antijen daha sonra temiz bir tüpe dökülen ve %0.2 sodyum hidroksit solüsyonu ile pH 7.0-7.2'ye nötralize edilen süpernatant içine ekstrakte edilir. İndikatör olarak bromotimol mavisi (0,01 ml %0,04 solüsyon) eklenir. Bu reaksiyonla renk saman sarısından maviye dönüşür.

Daha sonra tavşanların immünizasyonu ile hazırlanan 0,5 ml antistreptokok grubu serumları 5 adet çöktürme tüpüne dökülür (bkz. Bölüm 19). 1. test tüpüne serum A, 2.'de serum B, 3.'de serum C, 4.'de serum D ve 5.'de izotonik sodyum klorür solüsyonu (kontrol) eklenir. Bundan sonra, bir Pasteur pipeti kullanarak, elde edilen özü (antijen) duvar boyunca tüm test tüplerine dikkatlice yerleştirin.

Homolog serumlu bir test tüpünde reaksiyon pozitifse, ekstraktın serumla sınırında ince, süt beyazı bir halka oluşur (Şekil 38).

Araştırmanın dördüncü günü

Sonuçlar kaydedilir (Tablo 25).

Şu anda, deoksiribonükleazın yanı sıra antistreptohyaluronidaz, antistreptolysin-O belirlenir.

Kontrol soruları

1. Bildiğiniz streptokokların tespiti için temel laboratuvar araştırma yöntemleri nelerdir?

2. Lensfield yağış reaksiyonu ne için?

3. Bu reaksiyonu sahnelerken antijen neden şeffaf olmalıdır? Bu reaksiyonu evreleme tekniğini açıklayın.

Öğretmeninizden antistreptokok serum A, B, C, D ve izotonik sodyum klorür solüsyonu alın. Yağış reaksiyonunu koyun, sonuçları öğretmene gösterin ve çizin.

kültür medyası

kanlı ağar(bkz. bölüm 7).

serum ağarı(bkz. bölüm 7).

Çarşamba(kuru).

Et pepton jelatin (MPG)... 100 ml MPB'ye 10-15 g ince kıyılmış jelatin ekleyin. Jelatin, bir su banyosunda (40-50 ° C sıcaklıkta) yavaşça ısıtıldığında şişmelidir. Erimiş jelatine %10'luk bir sodyum karbonat çözeltisi (kabartma tozu) ilave edilir ve pH, 7.0'a ayarlanır. Sonra hemen katlanmış bir filtreden süzülür. Filtrasyon yavaş. İşlemi hızlandırmak için sıcak otoklavda filtrasyon yapılabilir. Filtrelenen ortam 6-8 ml'lik test tüplerine döküldü ve sterilize edildi. Sterilizasyon, ardışık 3 gün boyunca 100 ° C sıcaklıkta veya aynı anda bir otoklavda 20 dakika boyunca 110 ° C'de fraksiyonel olarak gerçekleştirilir. Ortamın soğutulması, dikey olarak yerleştirilmiş test tüplerinde gerçekleştirilir.

Süt hazırlama... Taze süt kaynatılır, bir gün serin bir yere konur, kremadan arındırılır, tekrar kaynatılır. Bir gün bekletin ve üst katmanı çıkarın. Yağsız süt bir pamuk tabakasından süzülür, daha sonra %10 sodyum karbonat çözeltisi ile pH 7.2'ye alkalileştirilir ve 5-6 ml'lik test tüplerine dökülür.

bulyon martini... Et suyuna eşit miktarda pepton sansar (domuz midelerinden hidroklorik aside maruz kalan kıyılmış et) eklenir. Elde edilen karışım 10 dakika kaynatılır, %10 sodyum hidroksit çözeltisi ile pH 8.0'a alkalileştirilir, sodyum asetat 0.5 ilave edilir, tekrar kaynatılır ve steril kaplara dökülür. Martin suyuna %0.25 glikoz eklenir.

Çarşamba Kitt - Tarozzi(bkz. bölüm 34).

Streptococcus pneumoniae (pnömokok)

Pnömokoklar ilk olarak R. Koch (1871) tarafından tanımlanmıştır.

morfoloji... Pnömokoklar, hücrelerin birbirine bakan kenarlarının düzleştirildiği ve karşıt kenarların uzatıldığı diplokoklardır, bu nedenle mum alevini andıran mızrak şeklinde bir şekle sahiptirler (bkz. Şekil 4). Pnömokokların boyutu 0.75-0.5 × 0.5-1 mikrondur, çiftler halinde bulunurlar. Sıvı besin ortamında, genellikle kısa zincirler oluşturarak streptokoklara benzer hale gelirler. Premokoklar hareketsizdir, sporları yoktur, vücutta her iki kokları çevreleyen bir kapsül oluştururlar. Kapsül, ısıya dayanıklı bir antifagin maddesi içerir (pnömokokları fagositoz ve antikorlardan korur). Yapay besin ortamında büyürken, pnömokoklar kapsüllerini kaybederler. Pnömokoklar gram pozitiftir. Gram negatif bakteriler eski kültürlerde bulunur.

yetiştirme... Pnömokoklar fakültatif anaeroblardır. 36-37 °C sıcaklıkta ve 7.2-7.4 pH'ta büyürler. Pek çok amino asidi sentezleyemedikleri için besiyerlerine ihtiyaç duyarlar, bu nedenle sadece doğal protein (kan veya serum) ilavesiyle ortamda büyürler. Serum agar üzerinde küçük, narin, oldukça şeffaf koloniler oluştururlar. Kanlı agarda, hemoglobinin methemoglobine geçişinin bir sonucu olan yeşil bir bölge ile çevrili ıslak yeşilimsi gri koloniler büyür. Pnömokoklar, %0,2 glikoz takviyeli et suyunda ve serumlu et suyunda iyi gelişir. Sıvı ortamda büyüme, altta dağınık bulanıklık ve tozlu tortu ile karakterizedir.

enzimatik özellikler... Pnömokoklar oldukça belirgin bir sakarolitik aktiviteye sahiptir. Parçalanırlar: asit oluşturmak için laktoz, glikoz, sakaroz, maltoz, inülin. Mannitolü fermente etmez. Proteolitik özellikleri zayıf bir şekilde ifade edilir: sütü keserler, jelatini sıvılaştırmazlar ve indol oluşturmazlar. Pnömokoklar safrada çözünür. İnülinin parçalanması ve safrada çözünmesi önemlidir. teşhis işareti Streptococcus pneumoniae'yi Streptococcus pyogenes'den ayırt etmek.

patojenik faktörler... Pnömokoklar hiyalüronidaz, fibrinolizin vb. üretir.

toksin oluşumu... Pnömokoklar endotoksin, hemolizin, lökosidin oluşturur. Pnömokokların virülansı, kapsülde antifagin varlığı ile de ilişkilidir.

Antijenik yapı ve sınıflandırma... Pnömokokların sitoplazmasında tüm grup için ortak olan bir protein antijeni ve kapsülde bir polisakkarit antijeni bulunur. Polisakkarit antijenine göre, tüm pnömokoklar 84 serovara bölünmüştür. İnsanlar için patojenik olanlar arasında serovar I, II, III en yaygın olanlarıdır.

Çevresel faktörlere dayanıklı... Pnömokoklar, kararsız mikroorganizmalar grubuna aittir. 60 ° C'lik bir sıcaklık onları 3-5 dakika içinde yok eder. Düşük sıcaklıklara ve kurumaya oldukça dayanıklıdırlar. Kuru balgamda 2 aya kadar canlı kalırlar. Bir besin ortamında, 5-6 günden fazla kalmazlar. Bu nedenle ekim sırasında 2-3 günde bir yeniden tohumlamak gerekir. Dezenfektanların geleneksel çözeltileri: 1: 1000'lik bir seyreltmede% 3 fenol, cıva klorür onları birkaç dakika içinde yok eder.

Pnömokoklar, özellikle 1: 100.000'lik bir seyreltmede onları öldüren optokine karşı hassastır.

Hayvan duyarlılığı... Pnömokokların doğal konağı insanlardır. Ancak pnömokok buzağılarda, kuzularda, domuz yavrularında, köpeklerde ve maymunlarda hastalığa neden olabilir. Deney hayvanlarından beyaz fareler, pnömokoklara karşı oldukça hassastır.

Enfeksiyon kaynakları... Hasta bir kişi ve bir bakteri taşıyıcısı.

İletim yolları... Havadaki damlacıklar, havada uçuşan toz olabilir.

Giriş kapısı... Üst solunum yollarının mukoza zarı, gözler ve kulak.

İnsanlarda hastalıklar... Pnömokoklar, farklı lokalizasyondaki inflamatuar hastalıklara neden olabilir. Pnömokoklara özgü olanlar:

1) lober pnömoni;

2) sürünen kornea ülseri;

En yaygın hastalık, akciğerin bir, daha az sıklıkla iki veya üç lobunu içeren krupöz pnömonidir. Hastalık akut, eşlik ediyor Yüksek sıcaklık, öksürük. Genellikle kritik bir şekilde biter.

bağışıklık... Aktarılan hastalıktan sonra, pnömoni nükslerle karakterize olduğundan, kararsız bağışıklık kalır.

profilaksi... Sıhhi ve önleyici tedbirlere indirgenmiştir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

tedavi... Antibiyotikler kullanılır - penisilin, tetrasiklin vb.

Kontrol soruları

1. Pnömokokların morfolojisi. Yetiştirme ve enzimatik özellikler.

2. Pnömokokların patojenitesini hangi faktörler belirler ve pnömokokları fagositozdan koruyan nedir?

3. Pnömokok enfeksiyonunun ana kapısı nedir? Hangi hastalıklar pnömokoklara neden olur?

Mikrobiyolojik inceleme

Çalışmanın amacı: pnömokok tespiti.

Araştırma için malzeme

1. Balgam (pnömoni).

2. Farinksten mukus (boğaz ağrısı).

3. Ülserden ayrılabilir (sürünen kornea ülseri).

4. Kulaktan akıntı (otitis media).

5. İrin (apse).

6. Plevral punktat (plörezi).

7. Kan (şüpheli sepsis).

1 (Sabah balgamı almak daha iyidir (spesifik pnömoni ile balgam paslı bir renge sahiptir).)

Temel araştırma yöntemleri

1. Mikroskobik.

2. Mikrobiyolojik.

3. Biyolojik.

Araştırma ilerlemesi

biyolojik örnek... Bir miktar (3-5 ml balgam) steril bir et suyu içinde emülsiyon haline getirilir, bu karışımın 0,5 ml'si beyaz bir fareye intraperitoneal olarak enjekte edilir. 6-8 saat sonra fareler hastalığın belirtilerini gösterir. Şu anda, eksüdada pnömokok zaten bulunabilir. karın boşluğu... Eksüda steril bir şırınga ile alınır. Ondan lekeler yapılır, Gram ve mikroskobik olarak boyanır. Saf kültürü izole etmek için eksüda serum agar üzerine aşılanır. Fare ölür veya hastalanırsa, saf bir kültürü izole etmek için kalpten kan serum agar üzerinde aşılanır. Mahsuller bir termostata yerleştirilir.

Pnömokok tipini belirlemek için hızlandırılmış yöntem(mikroaglutinasyon reaksiyonu). Enfekte olmuş bir farenin karın boşluğundan 4 damla eksüda bir cam slayta uygulanır. Birinci damlaya tip I aglütinasyon serumu, ikinci damlaya tip II serum, üçüncü damlaya tip III serum ve dördüncü damlaya (kontrol) izotonik sodyum klorür solüsyonu eklenir.

Tip I ve II serum 1:10 oranında önceden seyreltilir ve tip III serum - 1:5 oranında seyreltilir. Tüm damlalar karıştırılır, kurutulur, sabitlenir ve seyreltilmiş fuksin ile lekelenir. Sonuç pozitifse, damlalardan biri mikrop birikimini (aglütinasyon) gösterir.

Araştırmanın ikinci günü

Mahsuller termostattan çıkarılır, incelenir ve şüpheli kolonilerden smear alınır. Yaymalarda gram pozitif mızrak şeklinde diplokoklar varsa, saf kültür elde etmek için slant agar serumlu 2-3 koloni izole edilir. Mahsuller bir termostata yerleştirilir. Et suyundan lekeler yapılır, Gram ile boyanır ve mikroskopta tutulur.

Araştırmanın üçüncü günü

Mahsuller termostattan çıkarılır. Kültürün saflığı kontrol edilir - smear yapılır, Gram ve mikroskobik olarak boyanır. İzole kültürde gram pozitif mızrak şeklinde diplokoklar varsa, izole edilen kültür ekim ile tanımlanır:

1) Giss ortamına (laktoz, glikoz, sukroz, maltoz) ekim olağan şekilde gerçekleştirilir - ortama enjeksiyon yoluyla;

2) inülinli bir ortam üzerinde;

3) optochin içeren bir ortamda;

4) safra ile test edin.

inülin testi... İncelenen kültür, inülin ve turnusol tentürü içeren bir besin ortamına aşılanır ve bir termostata yerleştirilir. 18-24 saat sonra mahsuller termostattan çıkarılır. Pnömokok varlığında besiyeri kırmızıya döner (streptokoklar besiyerinin kıvamını ve rengini değiştirmez).

Optochin duyarlılığının belirlenmesi... Seçilen kültür, optokin 1: 50.000 içeren %10 kanlı agar üzerine aşılanır. Pnömokoklar, streptokoklardan farklı olarak optokin içeren besiyerlerinde üremezler.

safra testi... İncelenen et suyu kültüründen 1 ml aglütinasyon tüplerine dökülür. Bunlardan birine bir damla tavşan safrası eklenir, ikinci tüp kontrol görevi görür. Her iki tüp de bir termostata yerleştirilmiştir. 18-24 saat sonra, bulutlu bir et suyunun berraklaştırılmasında ifade edilen pnömokok lizisi meydana gelir. Kontrolde, süspansiyon bulanık kalır.

Safra numunesi katı bir besin ortamına konulabilir. Bunu yapmak için, agar ve serum içeren plakalarda yetiştirilen bir pnömokok kolonisine bir kuru safra tanesi uygulanır - koloni çözülür - kaybolur.

Araştırmanın dördüncü günü

Sonuçlar kaydedilir (Tablo 26).

Not. k - asit oluşumu ile karbonhidratların parçalanması.

Şu anda yaygın olarak kullanılan serolojik yöntemler streptokok antikorlarını belirlemek için çalışmalar (RSK ve RIGA). İzole edilen kültürün grup ve serovarının belirlenmesi, floresan antikorlar kullanılarak gerçekleştirilir.

Pnömokok virülansının belirlenmesi... Pnömokokların günlük et suyu kültürü, 10 -2 ila 10 -8 arasında %1 pepton su ile seyreltilir, iki beyaz fareye her seyreltmeden 0,5 ml enjekte edilir. 10 -7'lik bir seyreltmede farelerin ölümüne neden olan kültür virülent olarak değerlendirilir, 10 -4 -10 -6'lık bir seyreltmede orta virülent olarak değerlendirilir. Fareleri öldürmeyen bir kültür avirülenttir.

Kontrol soruları

1. Saf bir pnömokok kültürünün hangi izolasyon yöntemlerini biliyorsunuz?

2. Pnömokoklara en duyarlı hayvan hangisidir?

3. Enfekte olmuş bir farenin eksüdasına hangi reaksiyonlar verilir ve ne amaçla?

4. Pnömokok hangi piyojenik kok temsilcilerinden ve hangi testle ayırt edilmelidir?

5. Pnömokokların virülansı nasıl belirlenir?

Görev

Balgam testinin aşamalarını günlere göre gösteren bir çizelge yapın.

kültür medyası

serum ağarı(bkz. bölüm 7).

peynir altı suyu(bkz. bölüm 7).

kanlı ağar(bkz. bölüm 7).

Çarşamba(kuru).

İnülin numune ortamı... 200 ml damıtılmış suya 10 ml inaktive sığır serumu, 18 ml turnusol tentürü ve 3 g inülin ekleyin. Arka arkaya 3 gün boyunca 100°C'de akan buharla sterilize edilmiştir. Safra suyu (bkz. bölüm 7).